本发明公开一种植物组织中马铃薯腐烂茎线虫的分离方法，将5ml 25％(W/V)Pluronic F‑127水溶液加到细胞培养板中，室温静置30min形成半固态凝胶；将发病薯块切成2‑4mm薄片，于培养板孔边缘浸入Pluronic凝胶中，静置2h，使茎线虫从植物组织中游出；用移液器沿培养板孔另一侧缓慢吸取含有茎线虫的Pluronic凝胶，装入2ml离心管，在4℃放置20min使凝胶溶解，后离心使线虫沉淀，弃上清，加入1ml灭菌水清洗茎线虫，离心、回收茎线虫，经3‑5次重复清洗、离心回收后即获得纯净的茎线虫悬浮液。
该方法可显著提高茎线虫的分离效率及分离产物的纯净度，有效满足茎线虫病的研究工作需求。

徐振 孙厚浩 谢逸萍 孙厚俊 张成玲 杨冬静 赵永强 孙杨 孙明芳 张梅

江苏徐淮地区徐州农业科学研究所(江苏徐州甘薯研究中心)

221000 江苏省徐州市城东大道高铁站北

本发明公开一种植物组织中马铃薯腐烂茎线虫的分离方法，将5ml 25％(W/V)Pluronic F‑127水溶液加到细胞培养板中，室温静置30min形成半固态凝胶；将发病薯块切成2‑4mm薄片，于培养板孔边缘浸入Pluronic凝胶中，静置2h，使茎线虫从植物组织中游出；用移液器沿培养板孔另一侧缓慢吸取含有茎线虫的Pluronic凝胶，装入2ml离心管，在4℃放置20min使凝胶溶解，后离心使线虫沉淀，弃上清，加入1ml灭菌水清洗茎线虫，离心、回收茎线虫，经3‑5次重复清洗、离心回收后即获得纯净的茎线虫悬浮液。
该方法可显著提高茎线虫的分离效率及分离产物的纯净度，有效满足茎线虫病的研究工作需求。