本发明提供了一种短小蛇根草OpWRKY2转录因子的编码序列及其应用，从短小蛇根草中分离克隆了1071bp的OpWRKY2转录因子的编码框序列；构建了含OpWRKY2基因的植物表达载体并遗传转化短小蛇根草茎段外植体，获得过量表达OpWRKY2基因的短小蛇根草毛状根；利用高效液相色谱法分析转基因毛状根中喜树碱的含量，结果表明过量表达OpWRKY2基因可以促进短小蛇根草毛状根中喜树碱的积累；通过qRT‑PCR分析、凝胶阻滞实验和双荧光素酶报告基因实验，发现OpWRKY2转录因子可以结合和瞬时激活喜树碱合成基因OpTDC1的表达，从而提高喜树碱的积累。
本发明方法为生产具有广谱抗癌疗效的喜树碱提供了一种新型优质药源，具有重要的理论意义和潜在的应用价值。

开国银 张锡晨 武超 郝小龙

浙江中医药大学

310053 浙江省杭州市滨江区滨文路548号

本发明提供了一种短小蛇根草OpWRKY2转录因子的编码序列及其应用，从短小蛇根草中分离克隆了1071bp的OpWRKY2转录因子的编码框序列；构建了含OpWRKY2基因的植物表达载体并遗传转化短小蛇根草茎段外植体，获得过量表达OpWRKY2基因的短小蛇根草毛状根；利用高效液相色谱法分析转基因毛状根中喜树碱的含量，结果表明过量表达OpWRKY2基因可以促进短小蛇根草毛状根中喜树碱的积累；通过qRT‑PCR分析、凝胶阻滞实验和双荧光素酶报告基因实验，发现OpWRKY2转录因子可以结合和瞬时激活喜树碱合成基因OpTDC1的表达，从而提高喜树碱的积累。
本发明方法为生产具有广谱抗癌疗效的喜树碱提供了一种新型优质药源，具有重要的理论意义和潜在的应用价值。