本发明公开了一种表达BVDV‑E0的重组牛肠道病毒的构建方法及其初步应用，所述感染性克隆毒株是通过反向遗传操作的方法获得BEV BJ101毒株的全长cDNA克隆并获得拯救毒株rBEV后，将BVDV的E0序列插入到BEV全长cDNA中，获得可稳定表达外源基因E0的重组牛肠道病毒。
所述rBEV‑E0重组病毒的初步应用，将分离纯化后的重组病毒免疫6～8周龄的SPF级别的Balb/c雌鼠，在不同时间点收集其血清样本进行检测，小鼠不但可以稳定表达E0蛋白，并能对其产生有效的免疫应答。
本发明的重组病毒可同时用于BEV和BVDV的防控，也为其他外源基因提供了合适的的rBEV插入位点，为后续外源基因的插入、重组病毒的制备等研究提供有效的技术平台。

侯绍华 任肖 贾红 张姗 姜一曈

中国农业科学院北京畜牧兽医研究所

100193 北京市海淀区圆明园西路2号

本发明公开了一种表达BVDV‑E0的重组牛肠道病毒的构建方法及其初步应用，所述感染性克隆毒株是通过反向遗传操作的方法获得BEV BJ101毒株的全长cDNA克隆并获得拯救毒株rBEV后，将BVDV的E0序列插入到BEV全长cDNA中，获得可稳定表达外源基因E0的重组牛肠道病毒。
所述rBEV‑E0重组病毒的初步应用，将分离纯化后的重组病毒免疫6～8周龄的SPF级别的Balb/c雌鼠，在不同时间点收集其血清样本进行检测，小鼠不但可以稳定表达E0蛋白，并能对其产生有效的免疫应答。
本发明的重组病毒可同时用于BEV和BVDV的防控，也为其他外源基因提供了合适的的rBEV插入位点，为后续外源基因的插入、重组病毒的制备等研究提供有效的技术平台。