本发明公开了一种基于RT‑LAMP‑LFD检测猕猴桃褪绿环斑相关病毒(Actinidia chlorotic ringspot‑associated virus,AcCRaV)的引物及检测方法;引物包括内引物:FIP和BIP和外引物:F3和B3。
检测方法包括以下步骤:S1、提取猕猴桃待检测样品RNA;S2、将提取的猕猴桃待检测样品RNA反转录为cDNA;S3、以猕猴桃待检测样品cDNA为模板,进行等温扩增;S4、利用LFD试纸条对步骤S3所得等温扩增物进行检测,判断猕猴桃待检测样品是否含有猕猴桃褪绿环斑相关病毒。
本发明根据猕猴桃褪绿环斑相关病毒外壳蛋白核苷酸序列设计LAMP引物,实现了对猕猴桃褪绿环斑相关病毒的快速检测,可以在猕猴桃植株或组培苗中快速鉴定出是否含有该病毒,进而达到检测、监测、预警以及采取针对性措施的目的,减少病害带来的损失。
席德慧 彭期定 杨婷 憨宏艳 宁佳宸
四川大学
610065 四川省成都市武侯区一环路南一段24号
本发明公开了一种基于RT‑LAMP‑LFD检测猕猴桃褪绿环斑相关病毒(Actinidia chlorotic ringspot‑associated virus,AcCRaV)的引物及检测方法;引物包括内引物:FIP和BIP和外引物:F3和B3。
检测方法包括以下步骤:S1、提取猕猴桃待检测样品RNA;S2、将提取的猕猴桃待检测样品RNA反转录为cDNA;S3、以猕猴桃待检测样品cDNA为模板,进行等温扩增;S4、利用LFD试纸条对步骤S3所得等温扩增物进行检测,判断猕猴桃待检测样品是否含有猕猴桃褪绿环斑相关病毒。
本发明根据猕猴桃褪绿环斑相关病毒外壳蛋白核苷酸序列设计LAMP引物,实现了对猕猴桃褪绿环斑相关病毒的快速检测,可以在猕猴桃植株或组培苗中快速鉴定出是否含有该病毒,进而达到检测、监测、预警以及采取针对性措施的目的,减少病害带来的损失。