本发明公开了一种低Vero细胞残留DNA狂犬病疫苗原液的制备方法,具体制备步骤包括:细胞复苏;细胞传代;生物反应器培养;接种病毒;病毒收获;Mustang Q XT140膜层析处理;超滤浓缩及灭活;Sepharose 4FF凝胶层析。
其中,用Sepharose 4FF凝胶层析为:按柱床体积5~10%进行上样,以0.01M磷酸盐缓冲液洗脱,收集蛋白峰;其中,病毒收获为:当抗原含量≥0.3IU/mL时,开始收获,并进行灌流补液,连续收获连续补液;并将收获的所述病毒液用玻璃纤维滤芯进行过滤,去除细胞碎片。
本发明制备工艺可有效去除过程中的DNA杂质,使产品得到有效的纯化。
赵永强 李凡 望朔 杨文彬 蒋世鹏 吴建华 金晓中 王剑飞 孔繁荣 杨骏宇 朱实惠 唐阳
江苏金迪克生物技术股份有限公司
225300 江苏省泰州市郁金路12号
本发明公开了一种低Vero细胞残留DNA狂犬病疫苗原液的制备方法,具体制备步骤包括:细胞复苏;细胞传代;生物反应器培养;接种病毒;病毒收获;Mustang Q XT140膜层析处理;超滤浓缩及灭活;Sepharose 4FF凝胶层析。
其中,用Sepharose 4FF凝胶层析为:按柱床体积5~10%进行上样,以0.01M磷酸盐缓冲液洗脱,收集蛋白峰;其中,病毒收获为:当抗原含量≥0.3IU/mL时,开始收获,并进行灌流补液,连续收获连续补液;并将收获的所述病毒液用玻璃纤维滤芯进行过滤,去除细胞碎片。
本发明制备工艺可有效去除过程中的DNA杂质,使产品得到有效的纯化。