本发明阐述了一种酪氨酸酚裂解酶的胞外表达及其应用,属于生物技术领域。
方法为克隆高活性的酪氨酸酚裂解酶基因,和信号肽基因共表达,转化大肠杆菌感受态细胞,构建信号肽介导的酪氨酸酚裂解酶胞外分泌工程菌,实现胞外表达,所得酪氨酸酚裂解酶发酵液用于转化合成酪氨酸及衍生物。
本发明采用胞外表达方式构建酪氨酸酚解酶工程菌株,酶释放放量达到50%以上,减少蛋白在胞内过度堆积对细胞产生的毒性,总酶活较普通表达提高36%。
发酵产生的酶部分释放到发酵液中,菌体细胞通透性良好,有利于底物同酶的接触,大幅度提高酶的催化效率。
可以直接采用发酵液催化底物生产L‑酪氨酸及衍生物,无需破碎细胞提取纯酶进行反应,节约酶的使用成本。
冯志彬 张娟
鲁东大学
264025 山东省烟台市芝罘区红旗中路186号
本发明阐述了一种酪氨酸酚裂解酶的胞外表达及其应用,属于生物技术领域。
方法为克隆高活性的酪氨酸酚裂解酶基因,和信号肽基因共表达,转化大肠杆菌感受态细胞,构建信号肽介导的酪氨酸酚裂解酶胞外分泌工程菌,实现胞外表达,所得酪氨酸酚裂解酶发酵液用于转化合成酪氨酸及衍生物。
本发明采用胞外表达方式构建酪氨酸酚解酶工程菌株,酶释放放量达到50%以上,减少蛋白在胞内过度堆积对细胞产生的毒性,总酶活较普通表达提高36%。
发酵产生的酶部分释放到发酵液中,菌体细胞通透性良好,有利于底物同酶的接触,大幅度提高酶的催化效率。
可以直接采用发酵液催化底物生产L‑酪氨酸及衍生物,无需破碎细胞提取纯酶进行反应,节约酶的使用成本。