本发明公开人血清miR‑146a的双重荧光定量PCR检测试剂盒及其应用，包括有：人miR‑146a逆转录物引物和探针、内参REF1的逆转录物引物和探针。
本发明的microRNA逆转录使用的是发夹茎环法，比现在主流的加尾法特异性强，成本低，同时为双重荧光定量PCR提供了可能。
本发明的双重荧光定量PCR在同一个反应管中同时加入miR‑146a和内参的两套引物和两种不同荧光的探针，同时进行荧光定量PCR互不干扰，一管反应可以获得两个结果，比目前的单色荧光定量PCR提高了100％的效率，简化了50％的实验步骤，节省了50％的标本量和扩增试剂，提高了结果的可靠性。
本发明提供的miR‑146a定量参考品，能够绘制标准曲线并且定量标本中miR‑146a的拷贝数浓度，比目前的相对定量方法更直接客观。

宋德业 张旻 龚国忠 肖新强

中南大学湘雅二医院

410011 湖南省长沙市芙蓉区人民中路139号

本发明公开人血清miR‑146a的双重荧光定量PCR检测试剂盒及其应用，包括有：人miR‑146a逆转录物引物和探针、内参REF1的逆转录物引物和探针。
本发明的microRNA逆转录使用的是发夹茎环法，比现在主流的加尾法特异性强，成本低，同时为双重荧光定量PCR提供了可能。
本发明的双重荧光定量PCR在同一个反应管中同时加入miR‑146a和内参的两套引物和两种不同荧光的探针，同时进行荧光定量PCR互不干扰，一管反应可以获得两个结果，比目前的单色荧光定量PCR提高了100％的效率，简化了50％的实验步骤，节省了50％的标本量和扩增试剂，提高了结果的可靠性。
本发明提供的miR‑146a定量参考品，能够绘制标准曲线并且定量标本中miR‑146a的拷贝数浓度，比目前的相对定量方法更直接客观。