一种乌药外用凝胶原料药的质量评价方法

专利主权项内容

1.一种乌药醇提冻干粉的质量评价方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)供试品溶液的制备：取乌药醇提冻干粉，加萃取溶剂，浸泡、超声萃取，用萃取溶剂转移并定容，滤过，取续滤液；所述乌药醇提冻干粉，其提取工艺如下：取乌药饮片8 kg，破碎后用8倍量80%乙醇浸泡过夜，然后加热回流提取4次：第一次提取2小时，第二次用8倍量80%乙醇提取1.5小时，第三次和第四次，分别用5倍量80%乙醇分别提取1小时，四次提取液合并后，减压回收乙醇，浓缩后置于冻干机中冷冻干燥；所述萃取溶剂与乌药醇提冻干粉的体积质量比为300～500ml：1g；所述萃取溶剂为40%乙醇；所述超声萃取的温度为40～50℃，萃取时间不少于2h；(2)标准曲线溶液的制备：取各活性物质对照品，精密称定，用40%乙醇溶解并定量稀释制成不同浓度溶液；所述活性物质选自：倍半萜衍生物类化合物、香叶基苯衍生物类化合物、丁酮内酯类化合物及环戊烯二酮类化合物；所述倍半萜衍生物类化合物为：化合物A：和化合物B：；所述香叶基苯衍生物类化合物为化合物E：；所述丁酮内酯类化合物为化合物F：；和化合物G：/>；所述环戊烯二酮类化合物为化合物J：/>和化合物K：/>；(3)质谱库和定量分析方法的建立：采用超高效液相色谱质谱联用分析方法对不同结构种类的活性物质进行分离，建立各活性物质的质谱数据库，同时建立基于平行反应监测模式的活性物质定量分析方法；所述超高效液相色谱的参数为：采用五氟苯基与十八烷基硅烷相结合的键合硅胶为填充剂，规格为2.1×100mm，1.8μm；以0.1%～0.5%甲酸水溶液为流动相A，0.1%～0.5%甲酸甲醇溶液为流动相B，梯度洗脱，流速为0.5ml/min；柱温为35℃～45℃，进样体积为2μL；所述梯度洗脱的条件为：
；所述质谱的参数为：采用电喷雾电离源，正离子扫描模式，平行反应监测模式，离子传输管温度为350℃，鞘气流速60arb，辅助气加热器温度为400℃，辅助气流速为20 arb，喷雾电压为3.5kv；各活性物质定量检测的离子对为：
；所述质谱数据库的建立过程为：首先，取各活性物质对照品溶液，采用全扫描/数据依赖的二级扫描模式进行检测，一级全扫描范围为m/z 100~1000，分辨率为70000 FWHM，自动增益控制的目标值为1.0×10，最大注入时间为100 ms；利用Xcalibur4.0计算得到各活性物质母离子[M+H]准确质量，据此对总离子流图进行提取，得到各活性物质的提取离子色谱图及高分辨一级质谱图，然后以不同的碰撞能量对母离子进行打碎，得到高分辨二级质谱图，根据母离子的碎裂程度以及碎片离子的响应强度选择碰撞能量和特征碎片离子，汇总各活性物质的色谱保留时间、母离子准确质量及碎片离子准确质量信息，构建各活性物质的高分辨质谱数据库；6+(4)质量评价：取供试品溶液，按照步骤(3)所建立的各活性物质的定量分析方法以及质谱数据库，对乌药醇提冻干粉进行质量评价。