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一种ASFV的检测方法
摘要文本
本申请提供的一种ASFV的检测方法,包括以下步骤:使用DNA释放试剂盒释放ASFV基因组,备用;使用RAA试剂盒扩增ASFV靶DNA;使用限制性内切核酸酶切割扩增产物的限制性位点;切割产物释放具有磷酸化修饰的定向DNA,其在95℃下与PfAgo结合并切割探针,导致荧光基团和猝灭基团分离,从而释放荧光信号,在紫外线下进行观察,即可完成ASFV的检测。该检测方法将RAA扩增、限制性内切酶反应和PfAgo反应相结合,不需要引入额外的gDNA,具有高灵敏度和特异性,同时,REPD反应后,可以在紫外线辐射下观察到荧光,还可以使用试纸条来确定样品的阳性率。整个检测过程可在80分钟内完成,检测设备要求较低,成本较低,便于操作控制。
申请人信息
- 申请人:四川大学
- 申请人地址:610000 四川省成都市武侯区一环路南一段24号
- 发明人: 四川大学
专利详细信息
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 专利名称 | 一种ASFV的检测方法 |
| 专利类型 | 发明申请 |
| 申请号 | CN202410042017.7 |
| 申请日 | 2024/1/11 |
| 公告号 | CN117757995A |
| 公开日 | 2024/3/26 |
| IPC主分类号 | C12Q1/70 |
| 权利人 | 四川大学 |
| 发明人 | 王红宁; 赵宇; 周长宇; 杨铭; 王凯禄 |
| 地址 | 四川省成都市一环路南一段24号 |
专利主权项内容
1.一种ASFV的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤1、使用DNA释放试剂盒释放ASFV基因组,备用;步骤2、使用RAA试剂盒扩增ASFV靶DNA;步骤3、使用限制性内切核酸酶切割扩增产物的限制性位点;步骤4、将PfAgo内切酶、步骤3得到的酶切反应物、MnCl溶液以及FAM和BHQ1修饰的探针进行混合,然后使用实时荧光定量PCR仪器,在92~98℃下进行RAA-PfAgo反应至少30min,在紫外线下进行观察,即可完成ASFV的检测。2。来源:马 克 数 据 网