专利名称：制备羧酰胺类化合物的方法
技术领域：
本发明涉及制备式I的羧酰胺类化合物的新方法 其中R1是H、保护的氨基、酰氨基或低级烷基，所述基团可被芳基、保护的羟基、保护的氨基、酰氨基、琥珀酰亚氨基、2，3-二氢-1，3-二氧代-1H-苯并[d，e]异喹咻-2-基、保护的羧基、氨基甲酰基、羧基-低级链烷酰氨基、吡咯烷子基(Pyrrolidino)或吗啉代任意取代，R2是可由保护的羧基或由氨基甲酰基、一或二(低级烷基)氨基甲酰基或吗啉代任意取代的低级烷基，该方法包括使式II化合物与其中M为碱金属的式H2NO-M的化合物反应， 其中R3是低级烷基或芳基-低级烷基，条件是R3不是叔丁基或新戊基型的。
式I化合物是已知的，例如参见EP497192A2。它们具有有用的药理学特性并能用于治疗或预防疾病。
在说明书中单独或组合使用的术语“低级烷基”是指含有至多六个碳原子的直链或支链烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、正己基等。同样，术语“低级烷氧基”是指含有至多六个碳原子的直链或支链烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、叔丁氧基等。术语“芳基”是指任意取代的苯基或萘基，其取代基选自例如卤素、三氟甲基、低级烷基、低级烷氧基、苯基等。酰氨基的酰基部分由含有至多六个碳原子的链烷酸衍生，例如是乙酰基、丙酰基、丁酰基、新戊酰基等；或由任意取代的苯甲酸或萘甲酸衍生，例如是苯甲酰基、4-氯苯甲酰基、2-羧基苯甲酰基、1-或2-萘甲酰基等或由芳基取代的含有至多六个碳原子的链烷酸衍生，例如是苯乙酰基等。羧基-低级链烷酰氨基的低级链烷酰基部分由含有至多六个碳原子的链烷酸衍生，例如是乙酰基、丙酰基、丁酰基等。术语“卤素”是指氟、氯、溴或碘。
术语“保护的氨基”、“保护的羟基”和“保护的羧基”是指分别以公知的方式(例如在肽化学中公知)保护的氨基、羟基和羧基。例如氨基可被苄氧羰基、叔丁氧羰基、乙酰基等保护，或者是邻苯二甲酰亚氨基等的形式。羟基可例如以易解离的醚(如叔丁基或苄基醚)的形式或者以易解离的酯(如乙酸酯)的形式保护。再者，羧基例如可以易解离的酯(如甲酯、乙酯、苄酯等)的形式保护。
能与式H2NO-M的碱金属盐反应的式II的酯的实例是其中R3为丙基、正丁基、苄基和优选的乙基的那些酯。碱金属M的实例是Li、Na和优选的K。
优选地，在水中或在其它质子传递溶剂例如链烷醇(如乙醇)、醚(如THF、二噁烷或二甘醇二甲醚)、或DMSO、DMF等中，通过使2当量的M-OH与羟胺的一种盐(优选盐酸盐)反应，就地制备羟胺盐H2NO-M。然后使所得H2NO-M溶液与式II的酯反应，优选在水中或在水混溶的溶剂(如THF)中，在-20℃～50℃(最好在约0℃)温度下反应。
可用本身已知的方法，通过用醇R3-OH酯化相应的酸来制备式II的酯。在EP497192A2中叙述了这些酸。
本发明的另一方面，可按下法制备式II-A的酯 使式VI的酰卤或混合酸酐与式VII的胺反应， 其中X是卤素、酰氧基或低级烷氧羰氧基， 其中R2如上所定义。
该反应可在非质子传递溶剂(例如己烷、甲苯、乙酸乙酯、二异丙基醚、叔丁基-甲基醚或乙腈)中，在碱(例如三乙胺、二异丙基乙基胺、吡啶、二甲氨基吡啶、或碳酸钠、碳酸钾、碳酸氢钠或碳酸氢钾)存在下，在温度0℃～50℃、优选于约15℃下进行。
式VI的酰卤可由相应的式III的酸与卤化剂反应制得， 优选的酰卤是酰氯。它们可例如按下法制得使酸与磺酰氯、草酰氯、POCl3、PCl5或优选亚硫酰氯反应。氯化反应通常在非极性溶剂(例如己烷、甲苯、乙腈或优选乙酸乙酯)中进行。通过使相应的酸与酰氯(例如新戊酰氯)或与烷氧羰基氯(例如氯甲酸甲酯)反应，可制备其中X代表酰氧基或烷氧羰氧基的混合酸酐VI。
式VII的酰胺是已知的化合物，或是已知化合物的类似物，可以按已知的方法从相应的α-氨基酸开始制得。
本发明的另一方面，通过使式IV的外消旋二酯进行区域选择性和对映选择性酶促水解反应制得上述式III的酸， 该酶促水解反应优选在pH7.5～11.0(优选pH8～10)，于二酯IV的水乳液中进行。作为酶，可以利用枯草杆菌蛋白酶Carlsberg的制品，即从地衣芽孢杆菌制备的丝氨酸型蛋白酶。所述酶的实例是Optimase M440、蛋白酶L660、Alcalase 2，OT、Alcalase 2，5L以及枯草杆菌蛋白酶A。在酶促水解外消旋二酯VI成为手性酸III的反应中，同时也获得式VIII的对映体二酯 其中R3如上所定义。
通过碱/酸萃取，可分离式III和VIII化合物。在本发明的优选形式中，例如通过在催化量的乙醇钠或其它类似碱存在下蒸馏，对映体二酯VIII可经外消旋化作用容易地回变成外消旋前体IV。
本发明的再一方面，式IV的二酯可按下法制得a)使马来酐与异丁烯反应，b)氢化所得化合物(式5)中的烯键，c)使所得的异丁基琥珀酐与式R3-OH的醇反应。 马来酐与异丁烯的反应可在150～250℃(优选约190℃C～200℃)、在氢醌存在下进行。尽管并不关键，但优选使用一种溶剂，例如非极性溶剂，如甲苯。化合物5的氢化通常经催化作用(例如用Pd/C、Pt或院内镍催化)在非极性溶剂(例如己烷、甲苯或乙酸乙酯)中进行。异丁基琥珀酐与醇R3-OH的反应可在通常用于所述酯化作用中的酸(例如对甲苯磺酸或路易斯酸)存在下或在亚硫酰氧存在下进行。温度和溶剂的使用并不关键，但酯化反应通常于约50～100℃进行。
在本发明的优选实施方案中，式I-A化合物制备如下 其中R2如上定义，a)使式III的酸转化成酰卤或者转化成式VI的混合酸酐， b)使式VI化合物与式VII的胺反应， c)使所得的式II-A化合物与其中M为碱金属的式H2NO-M的盐反应，
在进一步的优选实施方案中，式III的酸制备如下a)使马来酐与异丁烯反应，b)氢化所得式5化合物中的烯键， c)使所得异丁基琥珀酐与式R3-OH的醇反应，d)酶促水解所得的式IV的二酯。 式II(尤其是II-A)、VI和VIII化合物是新的，因此代表本发明的另一方面。这些化合物的实例有N2-[2(R)-(乙氧羰基甲基)-4-甲基戊酰基]-N1，3-二甲基-L-缬氨酰胺，2(R)-4-甲基-2-(乙氧羰基甲基)缬氨酰氯，和(S)-异丁基琥珀酸二乙酯。
实施例1在20L高压釜中加入1kg马来酐、1.5L甲苯和13g氢醌。关闭高压釜，加入1.7kg异丁烯并使反应混合物于190～200℃加热16小时。将高压釜冷却至50℃后，放出过量的异丁烯，用1.5L甲苯转移反应混合物至6L烧瓶中。真空蒸发溶剂得到红色油状物。将残余物溶解在300ml乙酸乙酯中，用6L甲苯于室温处理搅拌的溶液2小时。搅拌过夜，过滤沉淀，用己烷洗涤，于35℃真空干燥，得到1308.8g(83％)2-异丁烯基琥珀酐的无色晶体，m.p.42-43℃，气相色谱法(GC)纯度93％。在下步反应中直接使用该物料。
真空蒸发母液，得到132g黄色油状物，用500ml己烷研制，所得浆状物于室温下搅拌过夜。过滤结晶产物，用己烷洗涤，真空干燥，得到110.1g(7％)2-异丁烯基琥珀酐的浅黄色晶体，GC纯度72％。
以100g批量水平分离该产物，产率93％，纯度95％。
实施例2A)在20L烧瓶中，将1418g 2-异丁烯基琥珀酐溶解在14L乙酸乙酯中，加入140g 5％钯/炭后，脱气并建立1.1巴的内部氢压，将反应混合物于室温搅拌5小时。用惰性气体冲洗后，过滤液体，转移至25L烧瓶中，容器用乙酸乙酯冲洗，减压蒸发溶剂，于40℃、高真空下干燥油状残余物，得到1543.9g异丁基琥珀酐粗品，为浅黄色油状物，在下步反应中直接使用。GC纯度为98％，没有用内标。
B)在6L烧瓶中，将767gA)步骤的产物溶解在2.5L乙醇与1.25L甲苯的混合液中。加入70g对甲苯磺酸后，溶液于80℃共沸蒸馏。残余物用饱和NaHCO3溶液洗涤，水相用甲苯反萃取。干燥有机相并过滤。减压蒸馏滤液得到837.7g(79％)外消旋异丁基琥珀酸二乙酯，为无色液体。GC纯度为96％，没有用内标。b.p.140℃/20托或68℃/0.1托。在下一步反应中直接使用该物料。
在类似的实验中，以3kg批量水平获得83％产率。纯度为96～98.5GC％。
实施例3A)在搅拌下，在3.28g碳酸氢钠的水(13.1L)溶液中乳化3253g实施例2B)的产物，并用2.0N NaOH调节乳液的pH至8.0。加入160mlSolvay蛋白酶L 660后，在室温下搅拌反应混合物，同时通过加入2.0N NaOH溶液维持pH在8.0。
5天后，用乙酸乙酯萃取反应混合物。干燥有机相并浓缩得到1615g(S)-异丁基琥珀酸二乙酯，为油状物。水相用25％盐酸盐化至pH2.0并用乙酸乙酯萃取。加入氯化钠后，水相再用乙酸乙酯萃取，干燥有机相并过滤。减压浓缩滤液，残余物在高真空下干燥，得到1352g(2R)-4-甲基-2-(乙氧羰基甲基)戊酸(47.3％)，浅棕色油状物，在下步反应中直接使用。GC纯度96％，[α]D25＝＋19.1°(c＝1％，乙醇)。
B)将8.6g钠溶解在250ml乙醇中并于室温将溶液加至1720.4g(S)-异丁基琥珀酸二乙酯中。减压蒸馏溶液，得到1542g外消旋异丁基琥珀酸二乙酯(89.7％)，为无色液体。GC纯度为94％，没有用内标。[α]D25＝0°(c＝1，乙醇)。
实施例4A)将171.9g(2R)4-甲基-2-(乙氧羰基甲基)戊酸溶解在200ml乙酸乙酯中。加入0.15ml DMF后，于室温用124ml亚硫酰氯处理溶液。将反应混合物于室温搅拌3.5小时，然后减压蒸发，得到215g(2R)4-甲基-2-(乙氧羰基甲基)戊酰氯，为浅黄色油状物，在下步反应中直接使用。GC纯度为76％，没有用内标。[α]D25＝+17.5°(c＝1，甲醇)。
B)将194g A)步骤的产物溶解在800ml THF中。在10-20分钟内向该溶液中加入103.1g N1-甲基(S)-叔丁基甘氨酰胺，同时使反应温度保持在30℃。然后在冷却至15℃后，向该溶液中加入103.1g三乙胺并使反应混合物于室温搅拌5.5小时。
在700ml水中处理反应混合物，水相用乙酸乙酯萃取。有机相用0.5N HCl然后用半饱和NaHCO3溶液洗涤。干燥滤液，过滤并减压蒸发溶剂。残余物于40℃、高真空下干燥，得到207.5g N2-[2(R)-(乙氧羰基甲基)-4-甲基戊酰基]-N1，3-二甲基-L-缬氨酰胺(91.6％)，为浅黄色晶体。HPLC纯度为86.2％，用内标。在下步反应中直接使用该物料，[α]D25＝-6.3°(c＝1，甲醇)，m.p.102-103℃(戊烷中结晶)。
实施例5将89.8g KOH于室温溶解在300ml水中，将该溶液加到55.6g羟胺盐酸盐在100ml水中的溶液中并搅拌10分钟。将该溶液加到冷却至0-2℃的73.2g N2-[2(R)-(乙氧羰基甲基)-4-甲基戊酰基]-N1，3-二甲基-L-缬氨酰胺在150ml THF中的搅拌的溶液中，将反应乳液于0℃搅拌3.75小时。用2N HCl于0℃将反应溶液酸化至pH＝7，并于0℃再搅拌2小时，产物开始沉淀，过滤产物。晶体用水洗涤并在高真空下干燥，得到59.95g N2-[2(R)-(羟基氨基甲酰基甲基)-4甲基戊酰基]-N1，3-二甲基-L-缬氨酰胺(产率99％)，为无色晶体，m.p.206-207℃，HPLC纯度为93.1％(用内标)。
权利要求
1.制备式I的羧酰胺类化合物的方法 其中R1是H、保护的氨基、酰氨基或低级烷基，所述基团可被芳基、保护的羟基、保护的氨基、酰氨基、琥珀酰亚氨基、2，3-二氢-1，3-二氧代-1H-苯并[d，e]异喹啉-2-基、保护的羧基、氨基甲酰基、羧基-低级链烷酰氨基、吡咯烷子基(Pyrrolidino)或吗啉代任意取代，R2是可由保护的羧基或由氨基甲酰基、一或二(低级烷基)氨基甲酰基或吗咻代任意取代的低级烷基，该方法包括使式II化合物与其中M为碱金属的式H2NO-M的化合物反应， 其中R3是低级烷基或芳基-低级烷基，条件是R3不是叔丁基或新戊基型的。
2.权利要求1所述的制备式I-A化合物的方法 其中R2如权利要求1中所定义，该方法包括使式II-A化合物与其中M为碱金属的式H2NO-M的化合物反应，
3.制备式II-A化合物的方法， 其中R2是可由保护的羧基或由氨基甲酰基、一或二(低级烷基)氨基甲酰基或吗啉代任意取代的低级烷基，R3是低级烷基或芳基低级烷基，条件是R3不是叔丁基或新戊基型的，该方法包括使式VI化合物与式VII的胺反应， 其中X为卤素、酰氧基或低级烷氧羰基氧基， 其中R2如上所定义。
4.制备式III的酸的方法， 其中R3是低级烷基或芳基低级烷基，条件是R3不是叔丁基或新戊基型的，该方法包括将式IV的二酯酶促水解， 其中R3如上所定义。
5.制备式IV的二酯的方法， 其中R3是低级烷基或芳基低级烷基，条件是R3不是叔丁基或新戊基型的，该方法包括a)使马来酐与异丁烯反应，b)氢化所得式5化合物中的烯键，c)使所得的异丁基琥珀酐与式R3-OH的醇反应，
6.权利要求2所述的制备式I-A化合物的方法， 该方法包括a)将式III的酸转化成式VI的酰卤或混合酸酐， b)使式VI化合物与式VII的胺反应， c)使所得的式II-A化合物与其中M为碱金属的式H2NO-M的盐反应，
7.权利要求4所述的制备式III的酸的方法， 该方法包括a)使马来酐与异丁烯反应，b)氢化所得化合物式5化合物中的烯键， c)使所得的异丁基琥珀酐与式R3-OH的醇反应，d)将所得的式IV的二酯酶促水解，
8.式II、II-A、VI和VIII化合物， 特别是下列化合物N2-[2(R)-(乙氧羰基甲基)-4-甲基戊酰基]-N1，3-二甲基-L-缬氨酰胺，2(R)-4-甲基-2-(乙氧羰基甲基)戊酰氯，以及(S)-异丁基琥珀酸二乙酯。
全文摘要
本发明涉及经由相应的新的羧酸酯制备式I的羟基酰胺酸衍生物的新方法，并涉及该方法中出现的新的中间体，其中R
文档编号C07C67/00GK1117487SQ95101440
公开日1996年2月28日 申请日期1995年1月20日 优先权日1994年1月21日
发明者M·苏卡普, B·韦尔兹 申请人:霍夫曼-拉罗奇有限公司