专利名称：新型3-氧代-1，4-苯并噻嗪衍生物的制作方法
技术领域：
本发明涉及新型3-氧代-1，4-苯并噻嗪衍生物，该衍生物具有蛋白质稳定效应和抑制脂质过氧化物形成效应，可用于治疗白内障等。
白内障是一种晶状体发生浑浊化的难治的眼睛疾病，它导致视觉敏锐度的下降。对于引起白内障的偶然因素和机理以及其治疗方法业已进行了各种研究。但目前几乎没有对白内障有效的药物。
据报道晶状体中过氧化物的增加与白内障的起因有关，具有抑制脂质过氧化物形成效应的化学物质对治疗白内障有效(CurrentEye Res.，5，37(1986))。还据报道在白内障患者的晶状体中观察到了蛋白质的变性(Ophthalmology，19，1283(1977))。
从上述报道可以推测具有抑制脂质过氧化物形成效应同时具有蛋白质稳定效应的化学物质对治疗白内障特别有效。然而具有上述双重效应的化合物未被研究过，人们对这种化合物的开发期望已久。
为了获得具有抑制脂质过氧化物形成效应同时具有蛋白质稳定效应的化合物，本发明人进行了精细的研究，结果发现3-氧代-1，4-苯并噻嗪衍生物具有这一双重效应。在该衍生物中，2-位被一个亚苄基取代，而4-位被一个酸性基团如四唑基、膦酰基或磺酰基取代，且所述亚苄基的苯环进一步被羟基和低级烷基取代。
据报道，某些化学结构与本发明化合物的基本结构相同的、在2-位上带有亚苄基取代基的3-氧代-1，4-苯并噻嗪衍生物可用作除草剂(美国专利No.3923709)，镇静剂(日本专利公报No.10671/1974)或苯并噻吖庚因(benzothiazepine)衍生物的合成中间体(日本未审查专利公报No.72875/1985)。然而这些公报中的描述局限于苯并噻嗪环的4-位被氨烷基或羧烷基取代的苯并噻嗪衍生物。任何带有除羧基以外的酸性取代基的苯并噻嗪衍生物未曾见报道。此外，现有技术既没有公开蛋白质稳定效应又没有公开抑制脂质过氧化物形成效应。
日本未审查专利公报No.287077/1989公开了具有活性氧消除效应或抑制脂质过氧化物形成效应的2-亚苄基-3-氧代-1，4-苯并噻嗪衍生物。然而，在该公报中，4-位上的取代基局限于低级烷基，而且根本未公开蛋白质稳定效应。
与此同时，使用醛糖还原酶抑制剂治疗白内障最近已引起人们的注意。本发明的化合物还具有醛糖还原酶抑制效应，对治疗白内障很有效。
本发明涉及式(Ⅰ)的化合物及其盐(以下称作本发明的化合物)，涉及其治疗白内障的药物用途及式(Ⅱ)的合成中间体(以下称作本发明的中间体)。
其中R1为可被保护基团保护的羟基;
R2为低级烷基;
R3为氢，低级烷基，可被保护基团保护的羟基，或低级烷氧基，且所述低级烷基可被羟基(可被保护基团保护)，氨基或低级烷氨基取代;
R4为四唑基，膦酰基或其低级烷基酯，或磺酰基或其低级烷基酯，和A为亚烷基。
这些定义将用于以后。
将上面所定义的术语更详细解释如下。
术语“低级烷基”用来代表C1-C6直链或支化烷基，其实例为甲基，乙基，丙基，己基，异丙基，叔丁基和二甲基乙基。
术语“低级烷氧基”用来代表C1-C6直链或支化烷氧基，其实例为甲氧基，乙氧基，丙氧基，己氧基，异丙氧基和叔丁氧基。
术语“亚烷基”用来代表C1-C10亚烷基，其实例为亚甲基，亚乙基，亚丙基，四亚甲基，六亚甲基，七亚甲基，十亚甲基，(二甲基)亚甲基和(二乙基)亚甲基。
术语羟基的“保护基团”指广泛用于保护羟基的基团，例如低级烷基磺酰基(如甲基磺酰基);芳基磺酰基(如苯磺酰基和对甲苯磺酰基);低级链烷酰基(如乙酰基，丙酰基和新戊酰基);低级烷氧甲基(如甲氧甲基);苯甲酰基;苄氧基甲基;四氢吡喃基或三甲基甲硅烷基。
术语“芳基”用来代表芳香烃，例如苯基，甲苯基，二甲苯基和 基。
本发明中药学上可接受的盐的实例是碱金属或碱土金属盐，如钠盐、钾盐和钙盐;铵盐，有机胺盐，例如二乙胺盐和三乙醇胺盐;或无机酸盐，例如盐酸盐，硫酸盐和硝酸盐。
本发明化合物的典型合成方法如下面的1)-3)所示。
1)取代基R4为四唑基的化合物的合成
其中X为卤素，烷基磺酰基或芳基磺酰基。以后X均按此定义。
式〔Ⅱ〕的化合物可由式〔Ⅲ〕化合物与化合物〔Ⅳ〕反应而制备。式〔Ⅱ〕化合物进一步与叠氮化钠反应，得到式〔Ⅴ〕所示的本发明化合物(其中R4为四唑基)。式〔Ⅱ〕化合物也是新型化合物，它尤其可用作将四唑基引入R4的合成中间体。
另一方面，式〔Ⅲ〕化合物可按日本未审查专利公报No.287077/1989所述的方法合成。典型合成路线如下所示。
2)取代基R4为膦酰基或其低级烷基酯的化合物的合成
其中Y为低级烷氧基，而R5或R6可相同或不同，各自为氢或低级烷基。
式〔Ⅶ〕化合物可由式〔Ⅲ〕化合物和式〔Ⅵ〕化合物在碱存在下反应而制备。式〔Ⅶ〕化合物与三甲基甲硅烷基卤反应，然后与亚磷酸三烷基酯反应，得到式〔Ⅷ〕所示的本发明的化合物(其中R4为膦酰基或其低级烷基酯)。
另一方面，式〔Ⅷ〕所示的本发明化合物可由式〔Ⅲ〕化合物与式〔Ⅸ〕化合物在碱存在下反应而制备。
3)取代基R4为磺酰基或其低级烷基酯的化合物的合成 R4为磺酰基或其低级烷基酯的式〔Ⅺ〕所示的本发明化合物可由式〔Ⅲ〕化合物与式〔Ⅹ〕化合物反应而制备。
在亚苄基的苯环上取代的羟基可在上述合成方法之前或之后用常规方法由上述保护基团保护，而保护基团可用常规方法除去。
在苯并噻嗪的4-位上取代的膦酰基或磺酰基可在上述合成方法之前或之后用常规方法转变成低级烷基酯。
另一方面，低级烷基酯可用常规方法水解成膦酸或磺酸。
用以上方法制备的化合物可用常规方法转变成如前所述的盐。
本发明的化合物和中间体具有立体异构体或旋光异构体。这些异构体也包含在本发明内。例如，本发明的化合物和中间体由于亚苄基的存在具有Z-式或E-式，这些形式也包括在本发明内。
可推测具有抑制脂质过氧化物形成效应同时具有蛋白质稳定效应的化合物对治疗白内障特别有效。然而对具有上述双重效应的化合物未曾研究过，而且人们对这种化合物的开发期望已久。
基于2-位具有亚苄基取代基的3-氧代-1，4-苯并噻嗪衍生物具有抑制脂质过氧化物形成效应这一报道(日本未审查专利No.287077/1989)，本发明人将注意力集中在基本结构为2-亚苄基-3-氧代-1，4-苯并噻嗪的化合物上，并着手对其开展研究，以期解决上述问题。
首先，本发明人注意到用羟基和叔丁基取代的甲苯衍生物具有抗氧化效应这一信息。抗氧剂对脂质过氧化物的形成表现出抑制效应。因此本发明人通过将各种取代基如烷基和羟基引入亚苄基的苯环来研究了取代基在抑制脂质过氧化物形成上的作用。结果发现，将羟基和低级烷基引入亚苄基的苯环上可以得到具有优异的抑制脂质过氧化物形成效应的化合物。但4-位被低级烷基取代的2-亚苄基-3-氧代-1，4-苯并噻嗪化合物不具有本发明的另一必需性能-蛋白质稳定效应。因此认识到4-位上的取代基影响蛋白质稳定效应。
因此，本发明人合成了在1，4-苯并噻嗪的4-位上具有各种取代基的新型化合物，并对其进行了分析，以期发现一种具有蛋白质稳定效应的化合物。分析结果发现，在4-位上引入进一步被四唑基、膦酰基或磺酰基取代的烷基的化合物具有蛋白质稳定效应。
根据这些研究，本发明人发现4-位被带有酸性部分(即四唑基、膦酰基或磺酰基)的烷基取代、而亚苄基的苯环进一步被羟基或低级烷基取代的2-亚苄基-3-氧代-1，4-苯并噻嗪化合物具有优异的抑制脂质过氧化物形成效应和蛋白质稳定效应。这就是说，本发明的化合物的基本组成是3-氧代-1，4-苯并噻嗪的4-位被具有酸性部分(即四唑基、膦酰基或磺酰基)的烷基取代，而2-位被亚苄基取代，且亚苄基的苯环进一步被至少一个羟基和一个低级烷基取代。
在医疗物质中，常采用将膦酰基或磺酰基转变成酯或用合适保护基团保护羟基的方法来制备前药，以增强吸收或提高在活体中的持续时间，或制备结构稳定的化合物。此外，这种技术常用来制造药物。换句话说，这种衍生化合物常用作合成中间体。因此在本发明中，羟基可用广泛使用的羟基保护基保护，且膦酰基或磺酰基可转变成酯。
本发明化合物的特征结构如上所解释，但对亚苄基的苯环上的取代基的优选实例作如下说明羟基在4-位取代，更优选地，低级烷基取代羟基取代基的至少一个邻位。这就是说，低级烷基优选取代3-位或3-位和5-位。低级烷基的更优选实例为甲基或叔丁基。
为了检测本发明化合物的效能，首先使用牛血清清蛋白进行实验，以检测蛋白质稳定效应。
详细情况示于药理试验项目中。本发明人发现本发明的化合物具有优异的蛋白质稳定效应，而具有不同取代基的化合物，即日本未审查专利公报No.287077/1989所描述的在4-位上具有低级烷基取代基的1，4-苯并噻嗪尽管基本结构与本发明化合物相同，但不具有蛋白质稳定效应。
其次，为了检测本发明化合物的抑制脂质过氧化物形成效应，使用鼠肝微粒体进行实验。实验结果发现本发明的化合物具有优异的抑制脂质过氧化物形成效应。
从以上药理试验结果发现，本发明化合物具有抑制脂质过氧化物形成效应和蛋白质稳定效应，且对治疗白内障有效。
此外，具有抑制脂质过氧化物形成效应或蛋白质稳定效应的化学物质可用于抗炎剂也有报道(Lancet，1，169(1965)，Biochem.Biophys.Acta.，489，163(1977))。因此，预计本发明的化合物也可用于抗炎症。
此外，按Kato等的报告进行了一项试验(Chem.Pharm.Bull.，33，(1)74-83(1985))，结果还发现本发明化合物具有醛糖还原酶抑制效应。这一结果进一步证实本发明化合物是白内障的优异治疗剂，还可预计用于治疗糖尿病并发症。
本发明的化合物可经口或胃肠外给药。剂形的实例是片剂、胶囊、粒剂、粉剂、针剂、眼科敷剂(ophthalmics)等。这些制剂可用常规方法制备。例如，经口制剂如片剂，胶囊，软胶囊和粒剂必要时可通过加入稀释剂如乳糖，淀粉，结晶纤维素或植物油;滑润剂如硬脂酸镁或滑石;粘合剂如羟丙基纤维素或聚乙烯吡咯烷酮;崩解剂如羧甲基纤维素钙，或覆盖剂如羟丙基甲基纤维素而制备。眼科敷剂可通过加入补强剂如氯化钠;缓冲剂如磷酸钠;加溶剂如多乙氧基醚，或防腐剂如氯苄烷铵而制备。
剂量根据症状、年龄、剂形等调节，但药剂为经口制剂时，一般每日剂量为1-5000mg，优选1-1000mg，分一次或几次供给。使用眼科敷剂时，剂量为0.001-10%，优选0.01-3%，每天滴注1至几滴。
本发明化合物的制剂和配剂的实例如下所示。这些实施例不限制本发明的范围，但用来更清楚地理解本发明。
实施例
2-(3，5-二叔丁基-4-羟基亚苄基)-4-氰基甲基-3，4-二氢-3-氧代-2H-1，4-苯并噻嗪(化合物1-1)在冰浴冷却和氩气气氛下将溶于四氢呋喃(6ml)中的2-(3，5-二叔丁基-4-羟基亚苄基)-3，4-二氢-3-氧代-2H-1，4-苯并噻嗪(0.83g)滴加到氢化钠(在液体石蜡中的60%悬浮液，0.22g)于四氢呋喃(2ml)的悬浮液中。室温搅拌混合物15分钟。往混合物中加入溶于四氢呋喃(2ml)的溴乙腈(0.17ml)，室温搅拌混合物过夜。往混合物中加入0.5N盐酸并用乙酸乙酯萃取。用饱和氯化钠溶液洗涤有机层，用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。用硅胶柱色谱纯化油状残余物，得到0.26g(28.4%)标题化合物。
熔点152.6-153.4℃(苯-异丙醚)红外光谱(KBr，cm-1)3630，2961，2243，1666，1593，1485，1421，1363，1263，1226，1198，905，756如下化合物可用与实施例1相似的方法制备。
2-〔5-叔丁基-3-〔1，1-二甲基-2-(四氢吡喃-2-基氧基)乙基〕-4-羟基亚苄基〕-4-氰基甲基-3，4-二氢-3-氧代-2H-1，4-苯并噻嗪(化合物1-2)红外光谱(KBr，cm-1)3206，2951，2872，2250，1655，1590，1486，1422，1390，1263，1203，1122，1035，7492-(4-乙酰氧基-3，5-二异丙基亚苄基)-4-氰基甲基-3，4-二氢-3-氧代-2H-1，4-苯并噻嗪(化合物1-3)熔点175.7-177.1℃红外光谱(KBr，cm-1)2962，2203，1756，1658，1595，1486，1445，1363，1264，1211，1164，1120，918，7472-(3，5-二叔丁基-4-羟基亚苄基)-4-(3-氰基丙基)-3，4-二氢-3-氧代-1，4-苯并噻嗪(化合物1-4)2-(3，5-二叔丁基-4-羟基亚苄基)-4-(7-氰基庚基)-3，4-二氢-3-氧代-2H-1，4-苯并噻嗪(化合物1-5)2-(3-叔丁基-4-羟基亚苄基)-4-氰基甲基-3，4-二氢-3-氧代-2H-1，4-苯并噻嗪(化合物1-6)4-氰基甲基-3，4-二氢-2-(4-羟基-3，5-二甲基亚苄基)-3-氧代-2H-1，4-苯并噻嗪(化合物1-7)4-氰基甲基-3，4-二氢-2-(4-羟基-5-甲氧基-3-甲基亚苄基)-3-氧代-2H-1，4-苯并噻嗪(化合物1-8)
2-(5-叔丁基-4-羟基-3-二甲氨基甲基亚苄基)-4-氰基甲基-3，4-二氢-3-氧代-2H-1，4-苯并噻嗪(化合物1-9)2-(3，5-二叔丁基-4-甲氧基甲氧基亚苄基)-4-氰基甲基-3，4-二氢-3-氧代-2H-1，4-苯并噻嗪(化合物1-10)2-(4-苄氧基甲氧基-3，5-二叔丁基亚苄基)-4-氰基甲基-3，4-二氢-3-氧代-2H-1，4-苯并噻嗪(化合物1-11)2-(3，5-二叔丁基-4-三甲基甲硅烷基氧基亚苄基)-4-氰基甲基-3，4-二氢-3-氧代-2H-1，4-苯并噻嗪(化合物1-12) 2-(3，5-二叔丁基-4-羟基亚苄基)-3，4-二氢-3-氧代-4-(1H-四唑-5-基甲基)-2H-1，4-苯并噻嗪(化合物2-1)
将叠氮化钠(0.078g)和氯化铵(0.064g)加到2-(3，5-二叔丁基-4-羟基亚苄基)-4-氰基甲基-3，4-二氢-3-氧代-2H-1，4-苯并噻嗪(化合物1-1，0.335g)于二甲基甲醛(5ml)的溶液中。在氮气气氛下于105℃搅拌混合物过夜。往混合物中加入水，用乙酸乙酯萃取。有机层用无水硫酸钠干燥，并真空浓缩。将1N氢氧化钠水溶液加到油状残余物中。用乙醚洗涤混合物，用2N盐酸酸化，并用乙酸乙酯萃取。有机层用饱和氯化钠溶液洗涤，用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。用硅胶柱色谱纯化油状残余物，得到0.21g(56.9%)标题化合物。
红外光谱(KBr，cm-1)3619，2958，1644，1588，1485，1438，1422，1364，1265，1198，750如下化合物可用与实施例2相似的方法制备。
2-〔5-叔丁基-4-羟基-3-〔1，1-二甲基-2-(四氢吡喃-2-基氧基)乙基〕亚苄基〕-3，4-二氢-3-氧代-4-(1H-四唑-5-基甲基)-2H-1，4-苯并噻嗪(化合物2-2)红外光谱(KBr，cm-1)3213，2949，1651，1588，1486，1423，1389，1264，1203，1122，1036，7482-(3，5-二叔丁基-4-羟基亚苄基)-3，4-二氢-3-氧代-4-〔3-(1H-四唑-5-基)丙基〕-2H-1，4-苯并噻嗪(化合物2-3)
2-(3，5-二叔丁基-4-羟基亚苄基)-3，4-二氢-3-氧代-4-〔7-(1H-四唑-5-基)庚基〕-2H-1，4-苯并噻嗪(化合物2-4)2-(3-叔丁基-4-羟基亚苄基)-3，4-二氢-3-氧代-4-(1H-四唑-5-基甲基)-2H-1，4-苯并噻嗪(化合物2-5)3，4-二氢-2-(4-羟基-3，5-二甲基亚苄基)-3-氧代-4-(1H-四唑-5-基甲基)-2H-1，4-苯并噻嗪(化合物2-6)3，4-二氢-2-(4-羟基-5-甲氧基-3-甲基亚苄基)-3-氧代-4-(1H-四唑-5-基甲基)-2H-1，4-苯并噻嗪(化合物2-7)2-(5-叔丁基-4-羟基-3-二甲氨基甲基亚苄基)-3，4-二氢-3-氧代-4-(1H-四唑-5-基甲基)-2H-1，4-苯并噻嗪(化合物2-8)2-(3，5-二叔丁基-4-甲氧基甲氧基亚苄基)-3，4-二氢-3-氧代-4-(1H-四唑-5-基甲基)-2H-1，4-苯并噻嗪(化合物2-9)
2-(4-苄氧基甲氧基-3，5-二叔丁基亚苄基)-3，4-二氢-3-氧代-4-(1H-四唑-5-基甲基)-2H-1，4-苯并噻嗪(化合物2-10)2-(3，5-二叔丁基-4-三甲基甲基硅烷基氧基亚苄基)-3，4-二氢-3-氧代-4-(1H-四唑-5-基甲基)-2H-1，4-苯并噻嗪(化合物2-11)实施例3 3，4-二氢-2-(4-羟基-3，5-二异丙基亚苄基)-3-氧代-4-(1H-四唑-5-基甲基)-2H-1，4-苯并噻嗪(化合物3-1)将叠氮化钠(0.21g)和氯化铵(0.17g)加到2-(4-乙酰氧基-3，5-二异丙基亚苄基)-4-氰基甲基-3，4-二氢-3-氧代-2H-1，4-苯并噻嗪(化合物1-3，0.47g)于二甲基甲醛(5ml)的溶液中。在氮气氛下于105℃搅拌混合物过夜。往混合物中加入1N盐酸使之酸化。加饱和氯化钠溶液到混合物中，用乙酸乙酯萃取。有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。往残余物中加入1N氢氧化钠水溶液，用乙醚洗涤。水层加入5.8N盐酸使之酸化，用乙酸乙酯萃取。有机层用饱和氯化钠溶液洗涤，用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。油状残余物用硅胶柱色谱纯化，得到0.36g(76.4%)标题化合物。
熔点189.2-190.1℃(异丙醚-乙酸乙酯)红外光谱(KBr，cm-1)3452，2959，2607，1649，1591，1467，1442，1367，1317，1279，1261，1223，1179，1135，918，762实施例4 2-(3，5-二叔丁基-4-羟基亚苄基)-4-二乙氧基磷酰基甲基-3，4-二氢-3-氧代-2H-1，4-苯并噻嗪(化合物4-1)方法1将溶于四氢呋喃(20ml)的2-(3，5-二叔丁基-4-羟基亚苄基)-3，4-二氢-3-氧代-2H-1，4-苯并噻嗪(2.00g)在冰浴冷却及氮气气氛下滴加到氢化钠(在矿物油中的60%悬浮液，0.42g)于四氢呋喃(20ml)的悬浮液中。室温搅拌混合物40分钟。往混合物中滴加(氯甲基)甲基醚(0.51g)于四氢呋喃(10ml)的溶液，再室温搅拌混合物15小时。混合物中加入水，用乙酸乙酯萃取。有机层用饱和氯化钠溶液洗涤，用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。油状残余物用硅胶柱色谱纯化，得到0.61g(27.2%)2-(3，5-二叔丁基-4-羟基亚苄基)-3，4-二氢-4-甲氧基甲基-3-氧代-2H-1，4-苯并噻嗪。
熔点138.9-139.4℃红外光谱(KBr，cm-1)3552，2953，1653，1590，1559，1441，1364，1253，1207，1116，1071，744方法2在氮气气氛下将三甲基甲硅烷基碘(0.43ml)滴加到方法1制得的2-(3，5-二叔丁基-4-羟基亚苄基)-3，4-二氢-4-甲氧基甲基-3-氧代-2H-1，4-苯并噻嗪(1.00g)于氯仿(10ml)的溶液中。室温搅拌混合物3小时。往混合物中加入亚磷酸三乙酯(4.01ml)，混合物在室温下再搅拌20分钟。将水加到混合物中，用乙酸乙酯萃取。有机层用饱和氯化钠溶液洗涤，用无水硫酸镁干燥并真空浓缩。油状残余物用硅胶柱色谱纯化，得到0.33g(26.3%)标题化合物。
熔点94.0-95.3℃红外光谱(KBr，cm-1)3396，2956，1649，1589，1484，1438，1265，1232，1026，752如下化合物可按与实施例4相似的方法制备。
4-二乙氧基磷酰基甲基-3，4-二氢-2-(4-羟基-3，5-二异丙基亚苄基)-3-氧代-2H-1，4-苯并噻嗪(化合物4-2)熔点144.8-146.0℃红外光谱(KBr，cm-1)3298，2959，1641，1590，1569，1468，1445，1358，1326，1283，1264，1241，1193，1049，10162-(3-叔丁基-4-羟基亚苄基)-4-二乙氧基磷酰基甲基-3，4-二氢-3-氧代-2H-1，4-苯并噻嗪(化合物4-3)4-二乙氧基磷酰基甲基-3，4-二氢-2-(4-羟基-3，5-二甲基亚苄基)-3-氧代-2H-1，4-苯并噻嗪(化合物4-4)2-(5-叔丁基-4-羟基-3-二甲氨基甲基亚苄基)-4-二乙氧基磷酰基甲基-3，4-二氢-3-氧代-2H-1，4-苯并噻嗪(化合物4-5)实施例5
2-(3，5-二叔丁基-4-羟基亚苄基)-4-(3-二乙氧基磷酰基丙基)-3，4-二氢-3-氧代-2H-1，4-苯并噻嗪(化合物5-1)在冰浴冷却和氮气气氛下将溶于四氢呋喃(4ml)的2-(3，5-二叔丁基-4-羟基亚苄基)-3，4-二氢-3-氧代-2H-1，4-苯并噻嗪(0.27g)滴加到氢化钠(在液体石蜡中的60%悬浮液，0.06g)于四氢呋喃(2ml)的悬浮液中。室温搅拌混合物15分钟。往混合物中加入溶于四氢呋喃(2ml)的3-氯丙基磷酸二乙酯(0.23g)，在40℃下搅拌混合物过夜。加饱和氯化铵水溶液到混合物中，用乙酸乙酯萃取。有机层用无水硫酸镁干燥并真空浓缩。油状残余物用硅胶柱色谱纯化，得到标题化合物。
如下化合物可按与实施例5相似的方法制备。
2-(3，5-二叔丁基-4-羟基亚苄基)-4-(7-二乙氧基磷酰基庚基)-3，4-二氢-3-氧代-2H-1，4-苯并噻嗪(化合物5-2)
2-(3，5-二叔丁基-4-羟基亚苄基)-3，4-二氢-3-氧代-4-膦酰基甲基-2H-1，4-苯并噻嗪(化合物6-1)将2-(3，5-二叔丁基-4-羟基亚苄基)-4-二乙氧基磷酰基甲基-3，4-二氢-3-氧代-2H-1，4-苯并噻嗪(化合物4-1，0.35g)溶于二噁烷(6ml)和5.8N盐酸(6ml)的混合物中。混合物回流50分钟。冷却到室温后，往混合物中加入1N盐酸，用氯仿萃取。有机层用饱和氯化钠溶液洗涤，用无水硫酸镁干燥并真空浓缩。加入异丙醚和环己烷使油状残余物结晶，得到0.14g(43.5%)标题化合物。
熔点232.5-233.0℃(正己烷(n-hexan)-乙酸乙酯，分解)红外光谱(KBr，cm-1)3607，2960，1630，1593，1434，1367，1217，1144，940如下化合物可按与实施例6相似的方法制备。
2-(4-羟基-3，5-二异丙基亚苄基)-3，4-二氢-3-氧代-4-膦酰基甲基-2H-1，4-苯并噻嗪(化合物6-2)红外光谱(膜，cm-1)3421，2962，1633，1587，1469，1372，1266，1199，1174，908，7332-(3，5-二叔丁基-4-羟基亚苄基)-3，4-二氢-3-氧代-4-(3-膦酰基丙基)-2H-1，4-苯并噻嗪(化合物6-3)
2-(3，5-二叔丁基-4-羟基亚苄基)-3，4-二氢-3-氧代-4-(7-膦酰基庚基)-2H-1，4-苯并噻嗪(化合物6-4)2-(3-叔丁基-4-羟基亚苄基)-3，4-二氢-3-氧代-4-膦酰基甲基-2H-1，4-苯并噻嗪(化合物6-5)3，4-二氢-2-(3，5-二甲基-4-羟基亚苄基)-3-氧代-4-膦酰基甲基-2H-1，4-苯并噻嗪(化合物6-6)2-(5-叔丁基-4-羟基-3-二甲氨基甲基亚苄基)-3，4-二氢-3-氧代-4-膦酰基甲基-2H-1，4-苯并噻嗪(化合物6-7)。
2-(5-叔丁基-3-(2-羟基-1，1-二甲基乙基)-4-羟基亚苄基〕-3，4-二氢-3-氧代-4-(1H-四唑-5-基甲基)-2H-1，4-苯并噻嗪(化合物7-1)将2-〔5-叔丁基-4-羟基-3-〔1，1-二甲基-2-(四氢吡喃-2-基氧基)乙基〕亚苄基〕-3，4-二氢-3-氧代-4-(1H-四唑-5-基甲基)-2H-1，4-苯并噻嗪(化合物2-2，0.31g)溶于甲醇(5ml)和氯仿(1ml)的混合物中。往混合物中加入对甲苯磺酸一水合物(0.05g)，于60℃搅拌混合物3小时。加入饱和氯化钠溶液，用乙酸乙酯萃取。有机层用饱和氯化钠溶液洗涤，用无水硫酸镁干燥并真空浓缩。油状残余物用硅胶柱色谱纯化，得到0.16g(60.7%)标题化合物。
红外光谱(KBr，cm-1)3106，2961，1629，1586，1486，1422，1369，1265，1190，1047，750实施例8 2-(4-乙酰氧基-3，5-二叔丁基亚苄基)-3，4-二氢-3-氧代-4-(1H-四唑-5-基甲基)-2H-1，4-苯并噻嗪(化合物8-1)将乙酸酐(5.8ml)和三乙胺(2.1ml)加到2-(3，5-二叔丁基-4-羟基亚苄基)-3，4-二氢-3-氧代-4-(1H-四唑-5-基甲基)-2H-1，4-苯并噻嗪(化合物2-1，0.32g)中，回流混合物过夜。往混合物中加入稀盐酸，用乙酸乙酯萃取。有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。油状残余物用硅胶柱色谱纯化，得到标题化合物。
如下化合物可按与实施例8相似的方法制备。
2-(4-苯甲酰氧基-3，5-二叔丁基亚苄基)-3，4-二氢-3-氧代-4-(1H-四唑-5-基甲基)-2H-1，4-苯并噻嗪(化合物8-2)2-(4-乙酰氧基-3，5-二叔丁基亚苄基)-3，4-二氢-3-氧代-4-膦酰基甲基-2H-1，4-苯并噻嗪(化合物8-3)2-(4-苯甲酰氧基-3，5-二叔丁基亚苄基)-3，4-二氢-3-氧代-4-膦酰基甲基-2H-1，4-苯并噻嗪(化合物8-4) 2-(3，5-二叔丁基-4-羟基亚苄基)-3，4-二氢-3-氧代-4-(1H-四唑-5-基甲基)-2H-1，4-苯并噻嗪(化合物2-1)将溶于水(10ml)的氢氧化钾(0.58g)加到2-(4-乙酰氧基-3，5-二叔丁基亚苄基)-3，4-二氢-3-氧代-4-(1H-四唑-5-基甲基)-2H-1，4-苯并噻嗪(化合物8-1，0.19g)于乙醇(10ml)的溶液中。回流混合物过夜。加6N盐酸到混合物中使之酸化。真空浓缩混合物，用乙酸乙酯萃取。有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。油状残余物用硅胶柱色谱纯化，得到标题化合物。上面得到的化合物的物理性质与实施例2制备的化合物(2-1)相同。
实施例10 2-(3，5-二叔丁基-4-羟基亚苄基)-3，4-二氢-3-氧代-4-磺基甲基-2H-1，4-苯并噻嗪(化合物10-1)在冰浴冷却和氮气气氛下将溶于二甲基甲醛(2ml)的2-(3，5-二叔丁基-4-羟基亚苄基)-3，4-二氢-3-氧代-2H-1，4-苯并噻嗪(0.20g)滴加到氢化钠(在液体石蜡中的60%悬浮液，0.042g)于二甲基甲醛(1ml)的悬浮液中。室温搅拌混合物40分钟。往混合物中滴加溶于二甲基甲醛(2ml)的(氯)甲基磺酸钾(0.096g)，室温搅拌混合物一天。加1N盐酸到混合物中，用乙酸乙酯萃取。有机层用饱和氯化钠溶液洗涤，用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。油状残余物用硅胶柱色谱纯化得到标题化合物。
制剂本发明化合物的制剂实例如下所示。
片剂本发明化合物1mg乳糖131mg结晶纤维素35mg羟丙基纤维素2mg硬脂酸镁1mg总计170mg本发明化合物50mg乳糖140mg结晶纤维素45mg聚乙烯吡咯烷酮3mg硬脂酸镁2mg总计240mg粒剂本发明化合物100mg
乳糖390mg聚乙烯吡咯烷酮8mg硬脂酸镁2mg总计500mg滴眼液本发明化合物0.5g浓缩甘油1.5g氢化蓖麻油1.0g氯苄烷铵0.005g乙二胺四乙酸钠0.01g稀盐酸适量氢氧化钠适量无菌纯水适量总计100ml本发明化合物3.0g浓缩甘油1.0g多乙氧基醚7.0g氯苄烷铵0.005g乙二胺四乙酸钠0.01g
稀盐酸适量氢氧化钠适量无菌纯水适量总计100ml本发明化合物0.01g浓缩甘油2.0g多乙氧基醚0.5g氯苄烷铵0.005g乙二胺四乙酸钠0.01g稀盐酸适量氢氧化钠适量无菌纯水适量总计100ml眼膏本发明化合物1.0g液体石蜡(parafine)10.0g白凡士林89.0g总计100.0g
药理试验为了研究本发明化合物的效用，检验了蛋白质稳定效应和抑制脂质过氧化物形成效应。
1.蛋白质稳定效应作为检验蛋白质稳定效应的方法，测定化合物对牛血清清蛋白对热凝聚的稳定效应的方法是已知的(Lancet，1，169(1965))。
本发明化合物的蛋白质稳定效应按上一杂志所描述的方法检验。
试验方法在冰浴冷却下，将牛血清清蛋白(SigmaChemicalCompany)溶于0.2M磷酸钾缓冲溶液(pH5.3)中，将浓度调为0.75%。往2.7ml这种清蛋白中加入0.3ml试验化合物于二甲亚砜的溶液并搅拌。反应混合物在室温下保持15分钟。溶液在67℃水浴中振摇2分钟后，冰浴冷却以使反应停止。将反应混合物温度升至室温，在660nm波长下测定取决于由热凝聚所引起的水溶性蛋白质的白色混浊的吸收度。按下式计算本发明化合物的蛋白质稳定效应。
使用日本未审查专利公报No.287077/1989所描述的2-(3，5-二叔丁基-4-羟基亚苄基)-3，4-二氢-4-甲基-3-氧代-2H-1，4-苯并噻嗪作参照化合物。
蛋白质稳定效应(％)＝ (A0-A1)/(A0) ×100A0没有试验化合物时的吸收度A1有试验化合物时的吸收度结果试验结果示于表1。
表1 本发明化合物明显抑制了蛋白质的热凝聚，表现出优异的蛋白质稳定效应。但参照化合物未表现出蛋白质稳定效应，并观察到了加速蛋白质热凝聚的倾向。
2.抑制脂质过氧化物形成效应试验方法在含试验化合物的0.04M三羟甲基氨基甲烷缓冲液中(含0.09M氯化钾，pH7.4)，使鼠肝微粒体与ADP(13.2mM)，Fe2+(0.9mM)及抗坏血酸(0.5mM)在37℃反应15分钟。用TBA法(Yagi等，Biochem.Med.，15，212(1976))测定产生的脂质过氧化物量。
结果试验结果示于表2。
表2 如表2所示，本发明的各化合物表现出优异的抑制脂质过氧化物形成效应。
如以上药理试验的结果所示，本发明的化合物同时具有蛋白质稳定效应和抑制脂质过氧化物形成效应，预计本发明的化合物是白内障的优异治疗剂。
权利要求
1.一种具有如下结构式[Ⅰ]的化合物及其盐 其中R1为可被保护基团保护的羟基；R2为低级烷基；R3为氢，低级烷基，可被保护基团保护的羟基，或低级烷氧基，且所述低级烷基可被羟基(可被保护基团保护)，氨基或低级烷氨基取代；R4为四唑基，膦酰基或其低级烷基酯，或磺酰基或其低级烷基酯，和A为亚烷基。
2.一种具有如下结构式〔Ⅰ〕的化合物及其盐 其中R1为羟基，低级烷基磺酰氧基，芳基磺酰氧基，低级链烷酰氧基，低级烷氧基甲氧基，苯甲酰氧基，苄氧基甲氧基，四氢吡喃基氧基或三甲基甲硅烷基氧基;R2为低级烷基;R3为氢，低级烷级，羟基，低级烷基磺酰氧基，芳基磺酰氧基，低级链烷酰氧基，苯甲酰氧基，低级烷氧基甲氧基，苄氧基甲氧基，四氢吡喃基氧基，三甲基甲硅烷基氧基或低级烷氧基，且所述低级烷基可被羟基，低级烷基磺酰氧基，芳基磺酰氧基，低级链烷酰氧基，苯甲酰氧基，低级烷氧基甲氧基，苄氧基甲氧基，四氢吡喃基氧基，三甲基甲硅烷基氧基，氨基或低级烷氨基取代;R4为四唑基，膦酰基或其低级烷基酯，或磺酰基或其低级烷基酯，和A为亚烷基。
3.按照权利要求2所要求的化合物及其盐，其中R1为羟基。
4.按照权利要求2所要求的化合物及其盐，其中R1为羟基;R3为低级烷基或羟基低级烷基。
5.按照权利要求2所要求的化合物及其盐，其中R1为羟基;R3为低级烷基或羟基低级烷基;R4为四唑基，膦酰基或磺酰基。
6.2-(3，5-二叔丁基-4-羟基亚苄基)-3，4-二氢-3-氧代-4-膦酰基甲基-2H-1，4-苯并噻嗪。
7.2-(3，5-二叔丁基-4-羟基亚苄基)-3，4-二氢-3-氧代-4-(1H-四唑-5-基甲基)-2H-1，4-苯并噻嗪。
8.2-〔5-叔丁基-3-(2-羟基-1，1-二甲基乙基)-4-羟基亚苄基〕-3，4-二氢-3-氧代-4-(1H-四唑-5-基甲基)-2H-1，4-苯并噻嗪。
9.一种药物组合物，它包括权利要求1所要求的一种化合物或其盐及一种药学上可接受的载体。
10.一种治疗白内障的方法，它包括施给权利要求9所要求的组合物。
11.一种具有如下结构式〔Ⅱ〕的化合物及其盐， 其中R1是可被保护基团保护的羟基;R2是低级烷基;R3是氢，低级烷基，可被保护基团保护的羟基，或低级烷氧基，且所述低级烷基可被羟基(可被保护基团保护)，氨基或低级烷氨基取代，和A是亚烷基。
12.一种具有如下结构式〔Ⅱ〕的化合物及其盐 其中R1为羟基，低级烷基磺酰氧基，芳基磺酰氧基，低级链烷酰氧基，低级烷氧基甲氧基，苯甲酰氧基，苄氧基甲氧基，四氢吡喃基氧基或三甲基甲硅烷基氧基;R2为低级烷基;R3为氢，低级烷级，羟基，低级烷基磺酰氧基，芳基磺酰氧基，低级链烷酰氧基，苯甲酰氧基，低级烷氧基甲氧基，苄氧基甲氧基，四氢吡喃基氧基，三甲基甲硅烷基氧基或低级烷氧基，且所述低级烷基可被羟基，低级烷基磺酰氧基，芳基磺酰氧基，低级链烷酰氧基，苯甲酰氧基，低级烷氧基甲氧基，苄氧基甲氧基，四氢吡喃基氧基，三甲基甲硅烷基氧基，氨基或低级烷氨基取代，和A为亚烷基。
13.按照权利要求12所要求的化合物及其盐，其中R1为羟基。
14.按照权利要求12所要求的化合物及其盐，其中R1为羟基;R3为低级烷基或羟基低级烷基。
15.2-(3，5-二叔丁基-4-羟基亚苄基)-4-氰基甲基-3，4-二氢-3-氧代-2H-1，4-苯并噻嗪。
全文摘要
本发明涉及对治疗白内障有效的式(I)的化合物，及式(II)的合成中间体。其中RRRRA为亚烷基。
文档编号C07D417/06GK1109882SQ94112918
公开日1995年10月11日 申请日期1994年12月8日 优先权日1993年12月9日
发明者河洋一, 太田淳稔, 森川裕子, 壬生宽之 申请人:参天制药株式会社