3-苯基呋喃取代的2-苯基-4h-苯并[1,3]恶嗪类衍生物的应用
技术领域
[0001]
本发明涉及药物技术领域，尤其涉及3-苯基呋喃取代的2-苯基-4h-苯并[1,3]恶嗪类衍生物作为钠离子通道阻滞剂在制备用于治疗神经病理性疼痛的药物中的应用。


背景技术：

[0002]
钠离子通道广泛存在于可兴奋细胞如骨骼肌细胞、心肌细胞、神经细胞的细胞膜上，参与可兴奋细胞动作电位的形成。它是电信号的主要启动键，而电信号则是神经活动和肌肉收缩等一系列生理过程的控制基础，在人体中，一共有九种已知的电压门控钠离子通道亚型，在不同的器官和生理过程中发挥作用，其中八种亚型在drg(dorsal root ganglia，背根神经节)表达，drg神经元是主要的感觉神经元。钠离子通道阻滞剂在神经病理性疼痛治疗方面具有较多应用，目前用于治疗神经病理性疼痛的钠离子阻滞剂有多种，但可用药物的使用往往受到疗效不完全，耐药性差或者具有生物毒性的限制。
[0003]
因此，现有技术仍有待于改进和发展。


技术实现要素：

[0004]
为了解决现在有技术中存在的问题，本发明提供了3-苯基呋喃取代的2-苯基-4h-苯并[1,3]恶嗪类衍生物作为钠离子通道阻滞剂在制备用于治疗神经病理性疼痛的药物中的应用，旨在解决现有钠离子阻滞剂疗效不完全，耐药性差或者具有生物毒性的问题。
[0005]
本发明的技术方案如下：
[0006]
3-苯基呋喃取代的2-苯基-4h-苯并[1,3]恶嗪类衍生物作为钠离子通道阻滞剂的应用，所述3-苯基呋喃取代的2-苯基-4h-苯并[1,3]恶嗪类衍生物的结构式如下所示：
[0007][0008]
其中，r1为烷基、烷氧基或卤素；
[0009]
r2、r3独立地为芳基、取代芳基或杂环芳基；
[0010]
ar1、ar2独立地为芳基或取代芳基。
[0011]
可选地，所述芳基为c6-c10的芳基。
[0012]
可选地，所述取代芳基中的取代基为烷基、烷氧基、硝基和卤素中的一种。
[0013]
可选地，所述杂环芳基为含硫原子的c5-c6的芳基或含氮原子的c5-c6的芳基。
[0014]
可选地，所述3-苯基呋喃取代的2-苯基-4h-苯并[1,3]恶嗪类衍生物选自以下化合物中的一种：
[0015][0016]
[0017]
进一步可选地，所述3-苯基呋喃取代的2-苯基-4h-苯并[1,3]恶嗪类衍生物为如下结构式的化合物：
[0018][0019]
本发明所述的3-苯基呋喃取代的2-苯基-4h-苯并[1,3]恶嗪类衍生物作为钠离子通道阻滞剂在制备用于治疗神经病理性疼痛的药物中的应用。
[0020]
可选地，所述神经病理性疼痛选自带状疱疹后神经痛、糖尿病性神经痛、三叉神经痛或脊髓损伤疼痛。
[0021]
有益效果：本发明提供了一种3-苯基呋喃取代的2-苯基-4h-苯并[1,3]噁嗪类衍生物作为钠离子通道阻滞剂的应用，该类化合物可以有效抑制钠离子通道，降低钠电流，具有治疗神经病理性疼痛的潜力，如带状疱疹后神经痛，糖尿病性神经痛，三叉神经痛以及脊髓损伤等疾病。
附图说明
[0022]
图1为实验组与对照组细胞钠离子通道电流的电流密度图。
[0023]
图2为3-苯基呋喃取代的2-苯基-4h-苯并[1,3]噁嗪类衍生物对钠离子电流抑制柱状图。
具体实施方式
[0024]
本发明提供3-苯基呋喃取代的2-苯基-4h-苯并[1,3]恶嗪类衍生物作为钠离子通道阻滞剂在制备用于治疗神经病理性疼痛的药物中的应用，为使本发明的目的、技术方案及效果更加清楚、明确，以下对本发明进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
[0025]
钠离子通道阻滞剂在神经病理性疼痛治疗方面具有较多应用，目前有关治疗神经病理性疼痛的钠离子通道亚型的作用效力低，对细胞有生物毒性，在缓解疼痛上的效果达不到预期。基于此，发明人研究发现，3-苯基呋喃取代的2-苯基-4h-苯并[1,3]恶嗪类衍生物可以有效抑制钠离子通道电流，且没有生物毒性，可以应用于神经病理性疼痛方面的治疗。
[0026]
具体地，本发明实施例提供3-苯基呋喃取代的2-苯基-4h-苯并[1,3]恶嗪类衍生物作为钠离子通道阻滞剂的应用，所述3-苯基呋喃取代的2-苯基-4h-苯并[1,3]恶嗪类衍生物的结构式如下所示：
[0027][0028]
其中，r1为烷基、烷氧基或卤素；
[0029]
r2、r3独立地为芳基、取代芳基或杂环芳基；
[0030]
ar1、ar2独立地为芳基或取代芳基。
[0031]
本实施例通过验证不同的化合物作用细胞后的的钠离子通道电流并与对照组的钠离子通道电流对比，证明了该类化合物即3-苯基呋喃取代的2-苯基-4h-苯并[1,3]噁嗪类衍生物可以有效的抑制钠离子通道，降低钠离子电流，提高了钠离子通道的选择性与作用效果。
[0032]
需说明的是，本实施例中的3-苯基呋喃取代的2-苯基-4h-苯并[1,3]噁嗪类衍生物为现有技术，关于该类化合物的制备方法可以详见以下专利中的记载：申请号为：202111238509.6，专利名称为：一种含3-苯基呋喃取代的2-苯基-4h-苯并[1,3]恶嗪类衍生物及其制备与应用。
[0033]
在一种实施方式中，所述芳基为c6-c10的芳基。
[0034]
在一种实施方式中，所述取代芳基中的取代基为烷基、烷氧基、硝基和卤素中的一种。
[0035]
在一种实施方式中，所述杂环芳基为含硫原子的c5-c6的芳基或含氮原子的c5-c6的芳基。
[0036]
在一种实施方式中，所述3-苯基呋喃取代的2-苯基-4h-苯并[1,3]恶嗪类衍生物可以选自以下化合物中的一种：
[0037]
[0038]
[0039]
[0040][0041]
本发明实施例提供3-苯基呋喃取代的2-苯基-4h-苯并[1,3]恶嗪类衍生物作为钠离子通道阻滞剂在制备用于治疗神经病理性疼痛的药物中的应用。
[0042]
关于3-苯基呋喃取代的2-苯基-4h-苯并[1,3]恶嗪类衍生物的具体细节见上文，在此不再赘述。
[0043]
在一种实施方式中，所述神经病理性疼痛可以选自带状疱疹后神经痛、糖尿病性神经痛、三叉神经痛或脊髓损伤疼痛等，但不限于此。
[0044]
本实施例通过验证不同的化合物作用细胞后的的钠离子通道电流并与对照组的钠离子通道电流对比，证明了该类化合物即3-苯基呋喃取代的2-苯基-4h-苯并[1,3]噁嗪类衍生物可以有效的抑制钠离子通道，降低钠离子电流，提高了钠离子通道的选择性与作用效果，具有治疗神经病理性疼痛的潜力，如带状疱疹后神经痛，糖尿病性神经痛，三叉神经痛以及脊髓损伤等疾病。
[0045]
本实施例中，主要通过取原代培养的小鼠背根神经节细胞进行培养，并采用单电极膜片钳技术的全细胞记录模式，对drg神经元细胞的钠离子通道电流进行研究，将细胞分为实验组和对照组，通过比较实验组与对照组细胞钠离子通道电流的电流密度(j)，得出不同化合物对全细胞钠离子通道电流的抑制效果，结果发现该类化合物即3-苯基呋喃取代的2-苯基-4h-苯并[1,3]噁嗪类衍生物对于电压门控型钠电流均有一定的抑制作用，其中，对第13号化合物做进一步实验发现其对全细胞钠通道电流有明显的抑制作用，且在加药培养后，细胞状态保持良好，表明对细胞没有产生明显的生物毒性作用。
[0046][0047]
需要说明的是，本实施例通过分离小鼠背根神经节细胞来检测钠离子通道的电流，在小鼠海马中也存在电压门控钠离子通道以及与治疗神经病理性疼痛相关的钠离子通道亚型。具体实验操作时，可以替换成将小鼠麻醉断头，分离出小鼠脑组织，做成小鼠脑部海马切片，通过急性分离海马神经细胞，记录海马神经细胞的单通道钠电流，对化合物衍生物的钠离子通道电流进行比较，从而验证出最具抑制效果的化合物衍生物。
[0048]
当前发现与神经性疼痛模式相关的电压门控钠离子通道亚型有nav1.6、nav1.7、nav1.8、nav1.9，它们都在初级感觉神经元表达，对治疗神经病理性疼痛的治疗有着潜在作用。本实施例中的3-苯基呋喃取代的2-苯基-4h-苯并[1,3]噁嗪类衍生物可能选择性结合以上某一亚型的受体结合位点，阻滞电压门控钠离子通道的开放，从而抑制钠离子通道电流，达到缓解神经性疼痛。
[0049]
下面通过具体的实施例对本发明作进一步地说明。
[0050]
本实验使用原代培养的小鼠背根神经节细胞(dorsal root ganglion neuron)。实验所用动物为c57bl/a小鼠(雄性，4-6周龄，购买自广州迪恩基因技术有限公司)。所有的动物实验均在相关的规范与指引下进行。使用七氟烷将小鼠麻醉。随后使用冰冻人工脑脊液(自配，试剂均购自sigma-aldrich)对小鼠进行心脏灌流。液体先配制为10x的储存液，使用当天再进行混合及稀释。心脏灌流所需液体为：10x碳酸氢钠溶液(mm：26nahco3)、10x蔗糖人工脑脊液(mm：2.5kcl，1.25nah2po4，0.5cacl2，10mgso4，10d-glucose)，工作溶液＝50ml蔗糖人工脑脊液+50ml碳酸氢钠溶液+39.36g蔗糖，并用纯水稀释定容至500ml。
[0051]
灌流后分离小鼠的脊柱，剪开椎管、暴露脊髓。借助显微镜于椎间孔处分离出约20-25个背根神经节(drg)，将刚分离的drg转移至预热(37
°
c)的dmem中(该dmem添加了10％fbs和1％ps)。分离结束后向含有drg和培养基的ep管中加入适量胰酶，并用移液枪缓慢、轻柔地吹打培养基。随后将ep管转移至37℃恒温孵育箱中消化约50min。消化结束时用移液枪将ep管中的团块状物质吹散，放入离心机中离心。移除上层废液，加入相同的培养基混匀形成细胞悬液。将drg细胞贴于12孔板中，加入1ml培养基，放入细胞培养箱(37℃，5％co2)中培养2h以上。电生理实验采用单电极膜片钳技术的全细胞记录模式，对drg神经元的钠离子通道电流进行研究，电极的电阻为2-4mω。实验所需的液体为添加于浴槽中的外液(mm：140nacl，3kcl，30tta，1cacl2，0.5cdcl2，1mgcl2，10nd-glucose，10hepes；ph 7.3，310-315mosm/l)以及添加于电极内的内液(mm：140csf，1.1cs-egta，10nacl，15hepes；ph 7.3，290-310mosm/l)。化合物均用dmso稀释并配制成浓度为50mm的混合液。细胞被分为实验组和对照组，实验组添加于浴槽中的浴液加入了1ul含50mm化合物的混合液，而对照组的浴液则仅加入了1ul dmso，通过比较实验组与对照组细胞钠离子通道电流的电流密度(j)，得出不同化合物对全细胞钠离子通道电流的抑制效果(inhibition percentage＝1-je/jc；je：实验组，jc：对照组)。
[0052]
图1为实验组与对照组细胞钠离子通道电流的电流密度图，从图1可知，第13号化
合物具有抑制钠离子通道电流的作用。
[0053]
图2为3-苯基呋喃取代的2-苯基-4h-苯并[1,3]噁嗪类衍生物(如上表格中化合物2-21)对钠离子电流抑制柱状图，从图2可知，在3-苯基呋喃取代的2-苯基-4h-苯并[1,3]噁嗪类衍生物中化合物13的抑制钠离子通道电流的作用效果最好。
[0054]
应当理解的是，本发明的应用不限于上述的举例，对本领域普通技术人员来说，可以根据上述说明加以改进或变换，所有这些改进和变换都应属于本发明所附权利要求的保护范围。