本发明提供了一种基于多色荧光可逆终止核苷酸的DNA单分子测序系统及装置,所述测序系统包括引物、待测DNA模板、多色荧光可逆终止核苷酸测序试剂;所述引物固定在流通池反应器表面;将待测DNA模板与测序引物进行杂交,然后用多色荧光可逆终止核苷酸延伸引物后,检测延伸引物的荧光信号即可得到待测DNA序列信息;所述待测DNA模板的3’端不需要标记定位荧光。
本发明通过利用测序循环过程中,延伸反应物的荧光作为下一次延伸的定位荧光,或采用固定在流通池反应器表面的定位荧光标记物作为定位荧光,无需对待测DNA模板的3’端标记定位荧光,从而有效避免了由于淬灭而导致定位信息丢失的问题,可进一步大幅延长测序读长并降低错误率。
沈玉梅 谭连江 邵志峰 龚兵 李小卫
上海交通大学
200240 上海市闵行区东川路800号
本发明提供了一种基于多色荧光可逆终止核苷酸的DNA单分子测序系统及装置,所述测序系统包括引物、待测DNA模板、多色荧光可逆终止核苷酸测序试剂;所述引物固定在流通池反应器表面;将待测DNA模板与测序引物进行杂交,然后用多色荧光可逆终止核苷酸延伸引物后,检测延伸引物的荧光信号即可得到待测DNA序列信息;所述待测DNA模板的3’端不需要标记定位荧光。
本发明通过利用测序循环过程中,延伸反应物的荧光作为下一次延伸的定位荧光,或采用固定在流通池反应器表面的定位荧光标记物作为定位荧光,无需对待测DNA模板的3’端标记定位荧光,从而有效避免了由于淬灭而导致定位信息丢失的问题,可进一步大幅延长测序读长并降低错误率。