本发明涉及一种提高毕赤酵母表面展示β‑葡萄糖醛酸苷酶活性的方法。
该方法包括:(1)将来自于酿酒酵母基因组的Agα1蛋白的编码基因与来源于米曲霉β‑葡萄糖醛酸酶(PGUS)的编码基因融合,导入到毕赤酵母细胞中,得到通过Agα1表面展示PGUS的重组酵母细胞;(2)将来自于酿酒酵母基因组的Pir1蛋白的编码基因与PGUS的编码基因融合,导入(1)获得的重组毕赤酵母细胞中,得到Agα1与Pir1两种锚定蛋白共同展示PGUS的重组酵母菌株。
实验证明,这种方法能够显著增加毕赤酵母表面展示PGUS蛋白的量,且大幅提高了PGUS的稳定性。
该方法解决了通过酶解法转化甘草酸为甘草次酸过程中存在的GUS不稳定与低效率的问题,同时对优化酵母表面展示效率的研究提供了方法指导。
冯旭东 李春 王旭东 吕波
北京理工大学
100081 北京市海淀区中关村南大街5号
本发明涉及一种提高毕赤酵母表面展示β‑葡萄糖醛酸苷酶活性的方法。
该方法包括:(1)将来自于酿酒酵母基因组的Agα1蛋白的编码基因与来源于米曲霉β‑葡萄糖醛酸酶(PGUS)的编码基因融合,导入到毕赤酵母细胞中,得到通过Agα1表面展示PGUS的重组酵母细胞;(2)将来自于酿酒酵母基因组的Pir1蛋白的编码基因与PGUS的编码基因融合,导入(1)获得的重组毕赤酵母细胞中,得到Agα1与Pir1两种锚定蛋白共同展示PGUS的重组酵母菌株。
实验证明,这种方法能够显著增加毕赤酵母表面展示PGUS蛋白的量,且大幅提高了PGUS的稳定性。
该方法解决了通过酶解法转化甘草酸为甘草次酸过程中存在的GUS不稳定与低效率的问题,同时对优化酵母表面展示效率的研究提供了方法指导。