1.本发明涉及一种包含含有散沫花的提取物的天然染色剂的组合的染料组合物。本发明还涉及所述组合物用于使角蛋白纤维染色的美容用途。最后，本发明涉及一种用于使角蛋白纤维染色的美容方法，其包括应用该组合物。


背景技术：

2.染发的方法包括氧化染料或永久性染料。这种化学染色方法使用一种或多种氧化染料前体(通常是一种或多种氧化碱)，任选地与一种或多种成色剂(coupler)组合。
3.这些氧化碱为无色或淡色化合物，其与氧化产品结合，能够通过氧化缩合过程接触到留在毛发纤维内的有色物质。
4.然而，已知氧化染料会引起皮肤问题。此外，已经证明氧化染料为内分泌干扰物，对生态系统有负面影响，并且它们可能导致癌症、过敏等。
5.有色分子和染料也可以是来源于植物或树木的天然化合物。
6.散沫花(lawsonia inermis)通常被称为指甲花(henna)，属于千屈菜科(lythraceae family)。这种灌木可以达到6米高，尤其自然生长于非洲和亚洲的热带和亚热带地区。其具有灰色的树皮，密集的分枝，在最老的枝条上有四边形且带刺的分枝。它的叶子彼此相对生长，并且为单叶和全缘(whole)。有香味的白色或红色花朵聚集成25cm长的大型圆锥花序。
7.指甲花叶子产生红色和橙色色彩，其已被用于使毛发和皮肤染色，或甚至纺织品染色持续超过5000年。
8.它们的染料性质归因于指甲花醌(lawsone)(2-羟基-1,4-萘醌)，其通过迈克尔(michael)加成与皮肤或指甲中的角蛋白发生反应。
[0009][0010]
然而，单独的指甲花很难顾及到毛发范围的所有色调(从金色到深金色甚至黑色)。
[0011]
已描述了其他植物作为用于染料(尤其是用于使毛发或其他角蛋白材料染色)的提取物或粉末的来源。然而，每一种植物都会产生特定的颜色。
[0012]
此外，仅使用没有不相容性的植物提取物或粉末(因此数量有限)和使用指甲花提取物作为基质难以提供从金色到深金色或甚至黑色并覆盖整个着色范围(尤其是毛发)的色调。
[0013]
在毛发染料领域，我们谈论同系配色染料(tone-on-tone dye)或永久性或半永久性染料，后者通常使用较多的双氧水和碱性化学试剂。
[0014]
同系配色染料通常用于增强或强化毛发的自然颜色，赋予其高光和大量光泽。
[0015]
因此，大多数时候选择与自然毛发色调相同或更深的颜色。
[0016]
永久性染料可以更有效地遮盖白色毛发。
[0017]
在永久性或半永久性毛发染料领域，期望染料能够抵抗洗发。
[0018]
本发明涉及同系配色染料和永久性染料。
[0019]
特别地，本发明旨在提供一种染料组合物：
[0020]-是天然的，不含动物产品，即基于来自植物、微生物或微藻的染料活性成分；
[0021]-暴露时间短，有利地染发小于一小时；
[0022]-优选单次应用，包括染发；
[0023]-优选是有机的和纯素的；
[0024]-具有良好的颜色保持性，包括染发后多次洗涤，包括10次洗发，有利地15次洗发。
[0025]
还寻求避免使用过氧化氢和碱性化学试剂的染发剂。
[0026]
此外，期望能够达到所有寻求的颜色。
[0027]
因此，确实需要开发来自天然产品(特别是植物产品，包括指甲花)的毛发染料，其覆盖整个毛发颜色范围，特别地用于能够覆盖白发的同系配色方法或永久性染料方法，同时限制植物提取物的数量以简化配方并避免相互作用和不相容性。
[0028]
因此，本发明的发明人开发了一种基于指甲花提取物与至少一种第二染色剂的组合的染料组合物，其能够达到设定的目标，包括宽范围的颜色。特别地，在毛发领域中使用时，组合物覆盖从黑色到非常浅的金色的整个色调范围。


技术实现要素：

[0029]
本发明涉及一种染料组合物，其包含以下物质的组合作为染色剂：
[0030]-散沫花的地上部分的提取物a，所述提取物a包含相对于干燥提取物的总重量以重量计7至60％的指甲花醌，其中指甲花醌尤其来源于糖基化(glycosylated)的指甲花醌衍生物如指甲花苷(hennoside)的酶水解，其中所述提取物进一步包含木犀草素(luteolin)、芹菜素(apigenin)和2,3,4,6-四羟基苯乙酮；和
[0031]-至少另一种染色剂b，所述染色剂b来源于除了散沫花以外的着色植物、微生物或微藻。
[0032]
本发明进一步涉及染料组合物用于角蛋白纤维的美容染色的用途。
[0033]
本发明还涉及一种用于使角蛋白纤维，尤其是人角蛋白纤维染色的美容方法，其包括以下步骤：
[0034]
a)提供粉末形式的如本文所公开的组合物，
[0035]
b)通过在20℃至98℃的温度向步骤a)的粉末中加入水性组合物(aqueous composition)尤其是水并混合来制备水性组合物，
[0036]
c)应用到角蛋白纤维上，任选地同时加热如此处理的纤维，
[0037]
d)冲洗，和
[0038]
e)任选地，重复步骤c)和d)。
[0039]
本发明还涉及一种组合产品，其包含：
[0040]-组分(x)，所述组分(x)包含如本文所公开的散沫花的地上部分的提取物a和至少一种染色剂b的组合，和
[0041]-组分(y)，所述组分(y)包含至少一种化妆品上可接受的赋形剂，所述赋形剂选自质地和/或感觉剂、酸度校正剂及其混合物。
[0042]
在权利要求中陈述和/或在下文中描述本发明的其他方面。
[0043]
详细描述
[0044]
本发明涉及一种染料组合物，其包含以下物质的组合作为染色剂：
[0045]-散沫花的地上部分的提取物a，所述提取物a包含相对于干燥提取物的总重量以重量计7至60％的指甲花醌，其中指甲花醌尤其来源于糖基化的指甲花醌衍生物如指甲花苷的酶水解，其中所述提取物进一步包含木犀草素、芹菜素和2,3,4,6-四羟基苯乙酮；和
[0046]-至少另一种染色剂b，所述染色剂b来源于除了散沫花以外的着色植物、微生物或微藻。
[0047]
定义
[0048]
下列术语在本文中使用时应具有以下含义。
[0049]“植物提取物”是指从植物中提取的产品，无论是全株、地上部分、地下部分、花朵还是果实，包括干燥的果实。提取可以仅由压制组成，或者涉及使用提取溶剂。溶剂有利地为水、水醇溶剂或醇溶剂，虽然可以考虑其他类型的溶剂，特别是对于指甲花的提取物a。
[0050]
本发明是建立合成途径的期望的一部分，所述合成途径是更绿色的，并且能够宣称由此获得的活性成分是天然的。因此，本发明中使用的溶剂将优选为天然溶剂和/或来自可再生资源(而非化石资源)的天然来源的溶剂，这些溶剂可有利地通过尊重环境的方法获得。如此获得的提取物将是天然提取物和/或来自可再生资源(而非化石资源)的天然来源。
[0051]“干燥提取物”是指不含提取溶剂或介质的提取物，或仅含有不显著的痕量提取溶剂或介质的提取物。因此，这种干燥提取物仅包含来自植物特别是来自散沫花(对于指甲花提取物a)的材料。
[0052]“标准化提取物”是指具有选定含量的植物提取物的至少一种染料组分的提取物。通常通过将惰性载体加入到植物提取物中来获得标准化提取物，所述惰性载体的量可能因批次而变化。
[0053]
所述“载体”必须相对于提取物及其组分是惰性的：它不与提取物或其组分(更特别地指甲花醌)相互作用，有助于其保护作用，并能够使活性提取物或分子的最终含量标准化。
[0054]
载体可以选自丙二醇、戊二醇、甘油、丙二醇、甲基thf和戊醇。
[0055]
载体还可以选自糖和多糖衍生物，例如果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖糊精、纤维素衍生物、淀粉(例如玉米、小麦或大米淀粉)、琼脂、树胶、粘质物；以及多元醇，如甘露醇、山梨醇、木糖醇等。特别地，载体选自果糖、麦芽糖糊精和淀粉，特别是大米淀粉。
[0056]
载体优选为天然载体和/或来自可再生资源(而非化石资源)的天然来源，这些载体可有利地通过尊重环境的方法获得。
[0057]“干燥标准化提取物”是指不含提取溶剂的标准化提取物，或仅含有不显著的痕量提取溶剂的标准化提取物。
[0058]“粉末”是指平均颗粒尺寸为0.1μm至250μm，特别是1μm至250μm的细颗粒形式的产品。可以通过研磨获得这些细颗粒。可以通过能够减小尺寸并获得如上所述的细颗粒的任何合适的方式进行研磨。
[0059]
有利地，根据本发明的粉末为干燥的粉状产品，其水分可以忽略不计。根据本发明的粉末为水溶性的或易于水分散的，即，其可用于获得水性或水醇液体组合物，所述水性或水醇液体组合物包含以重量计20至60％的干物质，更特别地以重量计30至50％的干物质，更特别地约40％的干物质。因此，干物质代表粉末。
[0060]“植物粉末”是指来源于植物的纯天然产品，无论是全株、地上部分、地下部分、花朵还是果实，包括干燥的果实，通过研磨或任何其他机械方式被粉碎成粉末。
[0061]“地上部分”是指植物位于地面以上的部分，例如叶子、叶柄、花朵、种子和枝条，特别是叶子、枝条和叶柄或其混合物，优选叶子、枝条或其混合物。
[0062]“糖基化的指甲花醌衍生物”也被称为指甲花醌糖苷(glycoside)或糖杂体(heteroside)，是指以下通式(i)的任何化合物：
[0063][0064]
其中r1、r2和r3彼此独立地表示h或糖，如葡萄糖，r1至r3中的至少一个不为h，
[0065]
糖苷键的水解导致苷元的形成，所述苷元经过自氧化反应以形成指甲花醌。
[0066]
特别地，指甲花苷a、b和c为糖基化的指甲花醌衍生物。
[0067]“酶水解”是指通过酶催化的水解反应，所述酶可以为内源性散沫花酶或来自外部来源的酶，优选内源性散沫花酶，应理解，所述酶为葡萄糖苷酶，如β-葡萄糖苷酶(gallo等人)，其作用导致破坏糖基化的指甲花醌衍生物的葡萄糖苷(glucoside)键。
[0068]
对于如本文所公开的散沫花提取物，术语“随时间稳定的”是指在室温(15℃-25℃)，相对湿度(rh)为60％且避光的情况下，最初存在于提取物中的指甲花醌的量在1个月内降低不大于50％，有利地不大于40％，特别地不大于30％，有利地不大于20％，尤其不大于15％，有利地不大于10％。室温值为欧洲药典中定义的室温值。
[0069]
还可以在所谓的加速稳定性条件下评价如本文所公开的提取物a的稳定性。这些条件是温度为40℃(
±
2)和rh为75％(
±
5)。如果最初存在于提取物中的指甲花醌的量在1个月内降低不大于50％，有利地不大于40％，优选不大于30％，特别地不大于20％，尤其不大于15％，有利地不大于10％，则提取物的指甲花醌含量为在加速稳定性条件下“随时间稳定的”。
[0070]“中性ph”是指6.5至7.5，特别是约7的ph。
[0071]“酸性ph”是指低于7，有利地低于6.5，更有利地低于6的ph。
[0072]“弱极性”是指偶极矩小于2.0d的溶剂。
[0073]“醇”是指式r
4-oh的化合物，其中r4为烃基，特别是(c
1-c6)烷基或c
4-c
12
烃基。包含(c
1-c6)烷基的醇在本文中被称为“c
1-c6醇”。包含(c
4-c
12
)烃基的醇在本文中被称为“c
4-c
12
醇”。
[0074]“氯化溶剂”是指烷烃，即饱和烃，含有1至6个碳原子，特别是1至3个碳原子，其中部分或全部氢原子被氯原子取代。
[0075]“酮”是指式r
5-co-r6的化合物，其中r5和r6为相同或不同的(c1–
c6)烷基。
[0076]“醚”是指式r
7-o-r8的化合物，其中r7和r8为相同或不同的(c1–
c6)烷基。
[0077]“酯”是指式r
9-coo-r
10
的化合物，其中r9和r
10
为可以相同或不同的(c1–
c6)烷基。酯可以特别地为乙酸酯，即ch3coo-r
10
化合物。
[0078]“(c1–
c6)烷基”是指饱和的、直链或支链的烃链，其有利地包含1至6个，优选1至4个碳原子。示例包括以下基团：甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基或己基。
[0079]“c
4-c
12
烃链”表示包含4至12个碳原子，优选4至8个碳原子的直链或支链的、饱和或不饱和的(优选饱和的)烃链。“c
4-c
12
烃链”的示例包括但不限于丁基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基，包括它们的任何位置异构体。
[0080]“饱和或不饱和烃”是指只由氢和碳原子组成的化合物。
[0081]“角蛋白纤维”是指存在于表皮和外皮中的角蛋白，如皮肤、毛发、睫毛、眉毛，特别是毛发。
[0082]“化妆品上可接受的”是指它可用于制备化妆品组合物，并且通常安全、无毒且在生物学上或其他方面均不是不期望的，并且对于美容用途是可接受的，尤其是通过局部应用于角蛋白纤维，特别是毛发和头皮。
[0083]“化妆品上可接受的赋形剂”是指含有某些成分的赋形剂，所述成分适合于配制化妆品组合物(如霜剂、洗剂、洗发剂、乳剂)或任何适合应用于角蛋白纤维，特别是毛发的制剂。
[0084]
指甲花提取物a
[0085]
本发明的染料组合物包含至少一种特定的指甲花提取物，在本文中被称为“提取物a”。
[0086]
该提取物a的特征在于高的指甲花醌含量。
[0087]
因此，提取物a包含相对于干燥提取物的总重量以重量计7至60％的指甲花醌。该指甲花醌含量有利地是随时间稳定的，即使在加速稳定性条件下。
[0088]
在一些实施方案中，在室温(15℃-25℃)，相对湿度(rh)为60％且避光的情况下，提取物a的指甲花醌含量在3个月内降低不大于50％，有利地不大于40％，特别地不大于30％，有利地不大于20％，更有利地不大于10％。
[0089]
有利地，在室温(15℃-25℃)，相对湿度(rh)为60％且避光的情况下，提取物a的指甲花醌含量在6个月内降低不大于50％，有利地不大于40％，特别地不大于30％，有利地不大于20％，更有利地不大于10％。
[0090]
优选地，在室温(15℃-25℃)，相对湿度(rh)为60％且避光的情况下，提取物a的指甲花醌含量在12个月内降低不大于50％，有利地不大于40％，特别地不大于30％，有利地不大于20％，更有利地不大于10％。
[0091]
有利地，在温度为40℃(
±
2)和rh为75％(
±
5)的情况下，提取物a的指甲花醌含量在3个月内降低不大于50％，有利地不大于40％，特别地不大于30％，有利地不大于20％，更有利地不大于10％。
[0092]
特别地，在温度为40℃(
±
2)和rh为75％(
±
5)的情况下，提取物a的指甲花醌含量在6个月内降低不大于50％，有利地不大于40％，特别地不大于30％，有利地不大于20％，更有利地不大于10％。
[0093]
因此，与许多市售可得的指甲花提取物(其具有低的指甲花醌含量，该含量随着时间的推移迅速减少，特别是通过与各种包含氨基的化合物如蛋白质、肽或氨基酸缩合)不同，如本文所公开的提取物a包含高且稳定量的指甲花醌。
[0094]
提取物a中的指甲花醌通常来源于糖基化的指甲花醌衍生物(如指甲花苷)的酶水解。下文描述了制备这种提取物的方法。
[0095]
提取物a进一步包含木犀草素、芹菜素和2,3,4,6-四羟基苯乙酮。
[0096]
可以根据下文描述的方法制备散沫花的地上部分的提取物a，所述提取物a包含相对于干燥提取物的总重量以重量计7至60％的指甲花醌，其中指甲花醌来源于糖基化的指甲花醌衍生物(如指甲花苷)的酶水解，并且其中所述提取物进一步包含木犀草素、芹菜素和2,3,4,6-四羟基苯乙酮。
[0097]
提取物a可以进一步具有一个或多个以下的有利特征，有利地具有所有以下的有利特征：
[0098]-提取物a包含相对于干燥提取物的总重量以重量计7％至50％，或10％至50％，特别地15％至40％的指甲花醌。有利地，提取物a包含相对于干燥提取物的总重量以重量计至少7％，有利地至少10％，至少15％，优选地至少20％，更有利地至少25％的指甲花醌；以相对于所述干燥提取物的总重量(在任何最终加入干燥载体之前)表示百分比。可以根据实施例后描述的hplc测定方法(方法1)来确定指甲花醌含量。
[0099]-提取物a包含相对于干燥提取物的总重量以重量计不大于2％，优选不大于1.5％，尤其不大于1％的蛋白质、肽或氨基酸，有利地包含相对于干燥提取物的总重量以重量计0至1％或以重量计0.1至1％的蛋白质、肽或氨基酸。可以根据实施例后描述的方法(方法2)，通过茚三酮分光光度法来分析游离氨基酸、肽和蛋白质。
[0100]-提取物a包含叶绿素，特别是叶绿素a和/或叶绿素b，总叶绿素含量为相对于干燥提取物的总重量以重量计小于25％，或以重量计小于20％，有利地相对于干燥提取物的重量以重量计小于10％。在一些实施方案中，提取物a包含相对于干燥提取物的总重量以重量计不大于5％，优选以重量计不大于2％的叶绿素。在一些实施方案中，提取物a不包含叶绿素。可以根据实施例后描述的方法(方法3)通过重量测定法来分析叶绿素。
[0101]-提取物a包含相对于干燥提取物的总重量以重量计1％至40％，有利地2％至30％的酚化合物。可以根据本文实施例后描述的方法(方法4)通过分光光度法来测定酚化合物含量。
[0102]-提取物a包含相对于干燥提取物的总重量以重量计不大于5％，有利地0.1至5％，更有利地以重量计0.5至5％的糖。可以通过使用二硝基水杨酸的比色法(方法5)来测定糖含量。
[0103]-提取物a进一步包含酚化合物，如没食子酸、香豆酸(特别是对香豆酸)和3,4,5-三羟基苯乙酮；另外的黄酮类，如儿茶素(catechin)、3’,4’,5,7-四羟基黄酮、3’,5,7-三羟基-4
’‑
甲基黄酮；甾醇类，如β-谷甾醇；三萜类，如羽扇豆醇(lupeol)；和/或其糖杂体，如黑麦草苷(lalioside)、多花香叶酰苯a(myrciaphenone a)、1,2-二羟基-4-o-糖基氧基萘(也被称为4-o-β-d-吡喃葡萄糖苷)、木犀草素-4
’‑
o-葡萄糖苷、芹菜素-7-o-β-葡萄糖苷、木犀草素-3
’‑
o-葡萄糖苷、芹菜素-4
’‑
o-β-葡萄糖苷和木犀草素-6-c-新橙皮苷。在一些实施方案中，提取物a进一步包含酚化合物，如没食子酸、香豆酸(特别是对香豆酸)和3,4,5-三羟
基苯乙酮；另外的黄酮类，如儿茶素、3’,4’,5,7-四羟基黄酮、3’,5,7-三羟基-4
’‑
甲基黄酮；和/或其糖杂体，如黑麦草苷、多花香叶酰苯a、1,2-二羟基-4-o-糖基氧基萘、木犀草素-4
’‑
o-葡萄糖苷、芹菜素-7-o-β-葡萄糖苷、木犀草素-3
’‑
o-葡萄糖苷、芹菜素-4
’‑
o-β-葡萄糖苷和木犀草素-6-c-新橙皮苷。
[0104]-提取物进一步包含3,4,5-三羟基苯乙酮和/或1,2-二羟基-4-o-糖基氧基萘。
[0105]-提取物a进一步包含香豆酸，特别是对香豆酸；
[0106]-提取物a进一步包含3,4,5-三羟基苯乙酮和/或1,2-二羟基-4-o-糖基氧基萘；
[0107]-提取物进一步包含糖基化木犀草素，特别是木犀草素-6-c-新橙皮苷。
[0108]
黄酮类(如木犀草素和芹菜素)具有许多令人关注的生物学性质，如自由基清除和抗氧化作用(romanov等人,neoplasma 2001,48(2),104-107)及抗炎活性，这些性质以及其吸收紫外线的能力是黄酮类能够提供免受uv辐射的原因(saewan等人,japs 2013,3(9),129-141)。尽管毛发光保护是一个不常提出的话题，但不应忽视uv辐射的化学作用及其对发干的影响(draelos,dermatol.clin.2006,24,81-84)。因此，具有光保护作用的化合物在旨在用于染发的化妆品组合物中的存在是特别令人关注的。
[0109]
木犀草素和芹菜素也是熟知的天然染料，可以用于给毛发和纺织品着色。
[0110]
此外，已显示芹菜素为毛发生长促进剂(huh等人arch.dermatol.res.,2009,301,381-385)。
[0111]
多酚类(如2,3,4,6-四羟基苯乙酮)和酚酸类(如对香豆酸)也具有抗氧化和光保护性质(nichols等人,arch.dermatol.res.2010,302,71-83)。
[0112]
提取物a还可以包含天然存在于散沫花的地上部分，特别是散沫花的叶和/或枝条中的任何化合物。
[0113]
在一些实施方案中，如本文所公开的提取物a可以为干燥提取物的形式，有利地为粉末形式，尤其具有小于250μm的颗粒尺寸。
[0114]
在一些实施方案中，如本文所公开的提取物a可以为标准化提取物an，特别是标准化干燥提取物an。标准化提取物an(特别是标准化干燥提取物an)包含散沫花的地上部分的提取物a和载体。
[0115]
因此，在一些实施方案中，特别有利地当染料组合物为化妆品组合物时，组合物包含标准化提取物an(特别是标准化干燥提取物an)，通过向如本文所公开的提取物a中加入惰性载体以使提取物的指甲花醌含量标准化来获得所述标准化提取物an。换言之，本发明的染料组合物包含如本文所公开的提取物a和惰性载体，提取物a和载体形成标准化提取物an，特别是标准化干燥提取物an。
[0116]
标准化提取物an具有一个或多个以下的有利特征，有利地具有所有以下的有利特征(相对于标准化干燥提取物的总重量以重量计表示百分比)：
[0117]-标准化提取物an包含以重量计0.6％至1.4％，有利地1至1.3％，特别地约1.3％的指甲花醌；
[0118]-惰性载体不含蛋白质；
[0119]-惰性载体是化妆品上可接受的；
[0120]-载体选自丙二醇、戊二醇、甘油、丙二醇、甲基thf和戊醇；或者载体选自糖和多糖衍生物，例如果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖糊精、纤维素衍生物、淀粉(例如玉米、小麦或大米
淀粉)、琼脂、树胶、粘质物和多元醇，如甘露醇、山梨醇、木糖醇等；
[0121]-标准化提取物an包含3,4,5-三羟基苯乙酮和/或1,2-二羟基-4-o-糖基氧基萘；
[0122]-标准化提取物an包含香豆酸，特别是对香豆酸；
[0123]-标准化提取物an包含先前列出的对于提取物a的化合物；
[0124]-标准化干燥提取物an包含以重量计0.2至3.0％的酚化合物；
[0125]-标准化干燥提取物an包含糖基化木犀草素，特别是木犀草素-6-c-新橙皮苷；
[0126]-标准化干燥提取物an包含以重量计0.05至1.0％的木犀草素；
[0127]-标准化干燥提取物an包含以重量计0.01至0.5％的芹菜素；
[0128]-标准化干燥提取物an包含以重量计0.01至0.1％的香豆酸，特别是对香豆酸；
[0129]-标准化干燥提取物an包含以重量计0.05至1.0％的2,3,4,6-四羟基苯乙酮；
[0130]-标准化干燥提取物包含以重量计不大于0.2％的蛋白质、肽或氨基酸，有利地以重量计0至0.2％，有利地以重量计0.1至0.2％的蛋白质、肽或氨基酸；
[0131]-标准化干燥提取物an不包含叶绿素；
[0132]-标准化干燥提取物an包含以重量计不大于0.5％的糖化合物，有利地以重量计0.01至0.5％，有利地0.05至0.5％的糖化合物；
[0133]-标准化干燥提取物an符合稳定性规范，包括在加速条件下，如之前对指甲花提取物a所定义；
[0134]-标准化干燥提取物an包含以重量计至少80％，有利地至少90％，尤其至少92％，特别地至少95％的载体。
[0135]
在一些实施方案中，散沫花的标准化干燥提取物an包含相对于干燥提取物的总重量：
[0136]-以重量计0.05至1.0％的木犀草素；
[0137]-以重量计0.01至0.5％的芹菜素；
[0138]-以重量计0.05至1.0％的2,3,4,6-四羟基苯乙酮。
[0139]
优选地，标准化提取物an为干燥提取物的形式，有利地为粉末形式，尤其具有小于250μm的颗粒尺寸。
[0140]
提取物a的制备
[0141]
散沫花叶子中游离态的指甲花醌的量实际上非常小，制备具有高指甲花醌含量的散沫花提取物可能很麻烦。
[0142]
在植物中，指甲花醌主要以糖杂体的形式存在(gallo等人rev.bras.pharmacogn.2014,23,133
–
140；colipa no.c169,2013)。
[0143]
尤其地，已经鉴定了指甲花苷a、b和c，其为单糖基化的指甲花醌衍生物。
[0144]
根据以下所示的反应方案，这些前体水解，然后所得的苷元自氧化，导致指甲花醌的形成。
[0145][0146]
r1＝葡萄糖，r2＝r3＝h；
[0147]
r2＝葡萄糖，r1＝r3＝h；或
[0148]
r3＝葡萄糖，r1＝r2＝h。
[0149]
因此，许多已知的散沫花提取方法包括在酸性介质中的步骤，通常在ph为1至3，在该步骤期间指甲花苷被水解。
[0150]
本发明的发明人已经开发了用于散沫花的提取方法，其能够通过实施糖基化的指甲花醌衍生物的酶水解来获得具有高的指甲花醌含量的提取物。所述提取物的特征还在于其随时间的稳定性。
[0151]
因此，有利地，通过包括以下步骤的方法获得散沫花的地上部分的提取物a：
[0152]
a)将散沫花的地上部分在4至8的ph在水中浸渍，使最初存在于散沫花的地上部分中的糖基化的指甲花醌衍生物如指甲花苷被部分或全部酶水解，以提供含有指甲花醌的水溶液(aqueous solution)；
[0153]
b)向从步骤a)获得的溶液中加入有机溶剂以提供水相(aqueous phase)和有机相，所述有机溶剂选自c4-c12直链或支链醇和在25℃与水的溶混度以重量计小于10％，有利地小于5％的溶剂；
[0154]
c)回收从步骤b)获得的有机相；和
[0155]
d)浓缩从步骤c)回收的有机相，以提供富含指甲花醌的提取物a。
[0156]
特别地，在步骤a)中接受浸渍的散沫花的地上部分为叶子、枝条或其混合物。叶子可以为新鲜的或干燥的，优选干燥的。
[0157]
优选在20℃至60℃，或20℃至50℃，特别地25℃至45℃，更特别地30℃至45℃，典型地约40℃的温度进行步骤a)。
[0158]
应理解，在允许一种或多种催化糖基化的指甲花醌衍生物水解的酶起作用的ph进行步骤a)。特别地，在4至8，优选5至7.5，有利地5.5至7.5，典型地中性ph的ph进行步骤a)。
[0159]
散沫花的地上部分通常浸渍持续15分钟至2小时，优选15分钟至1小时，有利地约30分钟。
[0160]
在一些实施方案中，在搅拌下进行步骤(a)15分钟至2小时，优选15分钟至1小时，有利地约30分钟。
[0161]
散沫花的地上部分通常浸渍在一定体积的水中，所述水的重量比散沫花的地上部分的重量大2至15倍，有利地大5至15倍，更有利地大6至10倍，典型地大10倍。例如，当方法在100g的散沫花的地上部分中实施时，在步骤a)中使用的水的体积可以为200ml至1500ml，或500ml至1500ml，有利地600ml至1000ml，典型地1000ml。
[0162]
在一些实施方案中，可以在步骤a)中加入果胶酶型酶(pectinase-type enzyme)。
[0163]
在一些实施方案中，将有机溶剂直接加入到步骤a)中获得的水溶液中。然后，水溶液包含植物材料和浸渍水。在这些实施方案中，应理解，将有机溶剂直接加入到步骤a)中获得的水溶液中，即，在步骤a)和b)之间不进行过滤步骤。
[0164]
在一些实施方案中，方法包括在步骤a)和步骤b)之间的过滤步骤，以从含有指甲花醌的水溶液中分离散沫花的地上部分。可替代地，在一些实施方案中，方法包括在步骤c)和步骤d)之间的过滤步骤，以从步骤c)中回收/收集的有机相中分离散沫花的地上部分。
[0165]
可以分批或连续地进行步骤b)。
[0166]
在一些特别的分批实施方案中，方法的步骤b)包括以下3个子步骤：
[0167]
b.1)向在步骤a)中获得的水溶液中加入有机溶剂；
[0168]
b.2)搅拌在步骤b.1)中获得的溶液持续15分钟至2小时，特别地15分钟至1小时，典型地约30分钟；和
[0169]
b.3)倾析在b.2)中获得的混合物，直到获得两个不同的相，即，水相和有机相。
[0170]
因此，连续的子步骤b.1)、b.2)和b.3)导致水相和有机相的形成。
[0171]
在步骤b)期间，特别是在步骤b.1)期间加入的有机溶剂的体积使得在b)期间加入的所述有机溶剂与在步骤a)期间使用的水的体积的体积比为0.25至2，尤其0.5至2，尤其0.8至1.5，特别地1至1.3。
[0172]
在一些实施方案中，在本文所公开的方法的步骤b)期间，特别是步骤b.1)期间加入的有机溶剂为弱极性的溶剂。应理解，尽管所述有机溶剂为弱极性的，但其确实溶解了指甲花醌。因此，在25℃，指甲花醌在b)特别是步骤b.1)中加入的有机溶剂中的溶解度为以重量计大于70％，尤其大于80％，有利地大于90％；以相对于存在于从步骤a)获得的含有指甲花醌的水溶液中的指甲花醌的总重量表示百分比。
[0173]
在一些实施方案中，在本文所公开的方法的步骤b)期间，特别是步骤b.1)期间加入的有机溶剂选自c
1-c6醇、氯化溶剂、酮、醚、酯及其混合物，其满足以下标准：
[0174]-在25℃水在所述有机溶剂中的溶混度以重量计小于10％，有利地小于5％，
[0175]-在25℃所述有机溶剂在水中的溶混度以重量计小于10％，有利地小于5％。
[0176]
特别地，有机溶剂可以选自正戊醇、二氯甲烷、氯仿、甲基异丁基酮、乙醚、二异丙醚、二丁醚、甲基叔丁基醚、乙酸(c
1-c6)烷基酯，如乙酸乙酯、乙酸异丙酯、乙酸丁酯、乙酸异戊酯及其任何混合物。
[0177]
在一些实施方案中，在步骤b)中，特别是步骤b.1)中加入的有机溶剂为乙酸(c1–
c6)烷基酯或乙酸(c1–
c6)烷基酯的混合物，优选选自乙酸乙酯、乙酸异丙酯、乙酸丁酯、乙酸异戊酯及其任何混合物。优选地，有机溶剂为乙酸异丙酯。
[0178]
在一些实施方案中，在步骤b)中加入的有机溶剂为c
4-c
12
直链或支链醇，优选c
4-c8直链或支链醇。有利地，有机溶剂为生物来源的。
[0179]
有利地，有机溶剂为c
4-c
12
直链或支链醇，其选自正丁醇、仲丁醇、异丁醇及其任何混合物，更特别地为正丁醇。
[0180]c4-c
12
醇的优势在于在回收操作期间不会降解，这与酯(如乙酸乙酯或乙酸异丙酯)或某些酮(特别是丙酮)不同。此外，回收溶剂中残留水的存在不会造成任何实施问题。因此，总之，这种类型的溶剂使得在工业水平回收溶剂变得更容易。
[0181]
步骤c)包括回收从步骤b)获得的有机相。
[0182]
能够在所述步骤b)的先前重复中获得的水相上重复步骤b)。然后，回收由此获得的新的有机相(重复步骤c))，并将其与从步骤b)的先前重复所得的有机相合并。
[0183]
因此，在方法的一个变型中，步骤d)包括浓缩有机相组合的步骤d’)，所述有机相组合从步骤c)前的步骤b)的多次重复中回收。
[0184]
在一些实施方案中，方法可以包括干燥从步骤d)获得的富含指甲花醌的提取物的附加步骤e)。在所述步骤e)的最后，获得的富含指甲花醌的提取物为干燥提取物。
[0185]
可以根据技术人员熟知的方法进行干燥步骤e)。特别地，可以通过托盘干燥机、真空干燥、雾化、微波、沸石干燥(zeodration)或冻干来完成干燥步骤。
[0186]
在一些实施方案中，方法可以在步骤c)和d)之间包括加入载体的附加步骤c’)，并且步骤d)之后为上面的干燥步骤e)。在所述步骤e)的最后，所得的富含指甲花醌的提取物为标准化干燥提取物。
[0187]
根据一些优选的实施方案，方法不包括通过加入酸或碱来改变水溶液或水相的ph的任何步骤。
[0188]
根据一些优选的实施方案，方法进一步包括提取颜料的步骤，也被称为脱色步骤。
[0189]
在脱色步骤期间提取的颜料尤其为叶绿素。但是，应理解，指甲花醌不是脱色步骤试图去除的颜料的一部分。
[0190]
颜料提取步骤尤其可以用有机溶剂完成，所述有机溶剂不能很好地溶解指甲花醌。因此，在25℃，指甲花醌在用于脱色步骤的有机溶剂中的溶解度以重量计小于15％，尤其小于10％，有利地小于5％；以相对于接受脱色步骤的提取物或溶液中所含有的指甲花醌的总重量表示百分比。
[0191]
优选地，指甲花醌不溶于用于颜料提取步骤的有机溶剂。
[0192]
有利地，所述有机溶剂为饱和烃或不饱和烃。特别地，所述饱和烃可以选自戊烷、己烷、庚烷、壬烷、癸烷、环己烷及其混合物。所述不饱和烃尤其可以为苯。
[0193]
优选地，用庚烷完成颜料(如叶绿素)的提取步骤。
[0194]
用有机溶剂完成的颜料提取步骤可以包括液-液提取或液-固提取。
[0195]
当其为液-液提取时，将所述步骤插入至所公开方法的步骤a)和b)之间。
[0196]
有利地，使用有机溶剂的液-液提取脱色步骤包括以下4个子步骤：
[0197]
i)将所述有机溶剂加入到从步骤a)获得的水溶液中，
[0198]
ii)搅拌从步骤i)获得的溶液，搅拌持续时间为15分钟至2小时，特别地15分钟至1小时，典型地，搅拌持续时间为约30分钟，和
[0199]
iii)倾析从步骤ii)获得的混合物，直到获得两个不同的相，即，水相和有机相，和
[0200]
iv)去除有机相。
[0201]
然后，在步骤iii)得到的水相中实施方法的步骤b)。
[0202]
当其为液-固提取时，该步骤在方法的干燥步骤e)之后。可以根据技术人员熟知的方法进行液-固提取。
[0203]
可替代地，可以直接在干燥提取物中使用超临界co2(有或没有加入共溶剂)进行脱色步骤。叶绿素被超临界co2带走(entrain)。残余物为脱色的干燥提取物。
[0204]
染色剂b
[0205]
根据本发明的染料组合物还包含染色剂b，所述染色剂b来源于除散沫花以外的着色植物或来源于微生物或微藻。
[0206]
优选地，染色剂b为干燥形式，有利地为粉末形式，尤其具有小于250μm的颗粒尺寸。
[0207]
染色剂b可以为除散沫花以外的着色植物的粉末，或微生物或微藻的粉末。
[0208]
染色剂b可以为除散沫花以外的着色植物的提取物，或微生物或微藻的提取物。提取物通常为水提取物(aqueous extract)或水醇或醇提取物。
[0209]
有利地，染色剂b来自于至少一种除散沫花以外的着色植物，所述着色植物选自木蓝属植物、红色颜料的来源植物、红色或紫色至黑色颜料的来源植物、黄色颜料的来源植
物、红色至蓝绿色颜料的来源植物、单宁的来源植物、栗色颜料的来源植物及其组合。
[0210]
特别地，木蓝属植物选自真靛蓝树(true indigo tree)(木蓝(indigofera tinctoria))、染料虎杖(dyer's knotweed)(蓼蓝(polygonum tinctorium)或蓼蓝(persicaria tinctoria))、染料菘蓝(dyer's woad)(菘蓝(isatis tinctoria l.))、炮弹树(couroupita guianensis)(炮弹果树(cannon ball tree))、野靛蓝(wild indigo)(虻赝靛(baptisia tinctoria))、染料巴豆(dyer's croton)(染料沙戟(chrozophora tinctoria))、染料夹竹桃(dyer's oleander)(蓝树(wrightia tinctoria))、约鲁巴靛蓝(yoruba indigo)(philenoptera cyanescens＝lonchocarpus cyanescens)、l.laxiflorus(lonchocarpus laxiflorus)、蓝叶藤(marsdenia tinctoria)(萝摩科(asclepiadaceae))、中国雨铃(chinese rain bell)(板蓝(strobilanthes cusia)或板蓝(strobilanthes flaccidifolius))及其组合。
[0211]
有利地，染色剂b包含靛玉红和/或靛白。
[0212]
有利地，染色剂b为靛蓝叶的提取物，特别是水或水醇或醇提取物，或靛蓝叶的粉末。
[0213]
有利地，染色剂b为染料虎杖叶的提取物，特别是水或水醇或醇提取物，或染料虎杖叶的粉末。
[0214]
有利地，染色剂b为染料菘蓝叶的提取物，特别是水或水醇或醇提取物，或染料菘蓝叶的粉末。
[0215]
有利地，染色剂b为炮弹树花和/或果实的提取物，特别是水或水醇或醇提取物，或炮弹树花和/或果实的粉末。
[0216]
有利地，染色剂b为整个野靛蓝植物的提取物，特别是水或水醇或醇提取物，或整个野靛蓝植物的粉末。
[0217]
有利地，染色剂b为整个染料巴豆植物的提取物，特别是水或水醇或醇提取物，或整个染料巴豆植物的粉末。
[0218]
有利地，染色剂b为整个染料夹竹桃植物的提取物，特别是水或水醇或醇提取物，或整个染料夹竹桃植物的粉末。
[0219]
有利地，染色剂b为约鲁巴靛蓝叶的提取物，特别是水或水醇或醇提取物，或约鲁巴靛蓝叶的粉末。
[0220]
有利地，染色剂b为l.laxiflorus叶的提取物，特别是水或水醇或醇提取物，或l.laxiflorus叶的粉末。
[0221]
有利地，染色剂b为整个蓝叶藤植物的提取物，特别是水或水醇或醇提取物，或整个蓝叶藤植物的粉末。
[0222]
有利地，染色剂b为整个中国雨铃植物的提取物，特别是水或水醇或醇提取物，或整个中国雨铃植物的粉末。
[0223]
有利地，染色剂b来源于至少一种作为红色颜料来源的着色植物。特别地，红色颜料的来源植物选自高粱、木槿及其组合。
[0224]
有利地，染色剂b包含花青素。
[0225]
有利地，染色剂b为高粱的地上部分(特别是茎)的水提取物或水醇提取物，或高粱的地上部分(特别是茎)的粉末。在提取物的情况下，提取溶剂(有利地水的或水醇的)有利
地为酸性ph，有利地低于6。在水醇提取物的情况下，醇有利地与水混溶，如乙醇。
[0226]
有利地，染色剂b为木槿花(特别是干花(karkade))的水提取物或水醇提取物，或木槿花(特别是干花(karkade))的粉末。在提取物的情况下，提取溶剂(有利地水的或水醇的)有利地为酸性ph，有利地低于6。在水醇提取物的情况下，醇有利地与水混溶，如乙醇。
[0227]
有利地，染色剂b来源于至少一种作为红色或紫色至黑色颜料来源的着色植物。特别地，红色或紫色至黑色颜料的植物来源为洋苏木。
[0228]
有利地，染色剂b为洋苏木木材(特别是心材)的水提取物或水醇提取物，或洋苏木木材(特别是心材)的粉末。在水醇提取物的情况下，醇有利地与水混溶，如乙醇。
[0229]
有利地，染色剂b来源于至少一种作为黄色颜料来源的着色植物。特别地，黄色颜料来源植物选自栀子、姜黄、藏红花、桦树、甘菊、木犀草属植物(reseda)及其组合。
[0230]
有利地，染色剂b包含藏红花素。
[0231]
有利地，染色剂b为栀子果实的水提取物或水醇提取物，或栀子果实的粉末。可以从申请wo2018162760中描述的栀子中提取这种染色剂b。特别地，栀子提取物或粉末包含相对于干燥提取物或干燥粉末的总重量以重量计0.1至10％，优选1至5％的藏红花素级分。
[0232]
栀子提取物可以是流体、水或水醇提取物，或干燥提取物。特别地，其为水提取物。流体栀子提取物(更特别地水或水醇栀子提取物)可以为提取和液-固分离后获得的液体级分(或多或少粘稠的)的形式，并在水或水醇溶剂中包含20％至60％的干提取物，更特别地30至50％的干提取物，仍然更特别地约40％的干提取物。当水或水醇溶剂从流体提取物中蒸发后，提取物也可以为干燥提取物的形式。这种提取物通常是粉状的，平均颗粒尺寸为0.1μm至250μm，特别地1μm至250μm。
[0233]
有利地，染色剂b为姜黄根茎的水提取物或水醇提取物，或姜黄根茎的粉末。在水醇提取物的情况下，醇有利地与水混溶，如乙醇。
[0234]
有利地，染色剂b为藏红花柱头的水提取物或水醇提取物，或藏红花柱头的粉末。在水醇提取物的情况下，醇有利地与水混溶，如乙醇。
[0235]
有利地，染色剂b为桦树叶的水提取物或水醇提取物，或桦树叶的粉末。在水醇提取物的情况下，醇有利地与水混溶，如乙醇。
[0236]
有利地，染色剂b为甘菊花(尤其是舌叶(ligule))的水提取物或水醇提取物，或甘菊花(尤其是舌叶)的粉末。在水醇提取物的情况下，醇有利地与水混溶，如乙醇。
[0237]
有利地，染色剂b为木犀草属植物根的水提取物或水醇提取物，或木犀草属植物根的粉末。在水醇提取物的情况下，醇有利地与水混溶，如乙醇。
[0238]
有利地，染色剂b来源于至少一种作为绿蓝色颜料来源的着色植物。特别地，绿蓝色颜料的来源植物选自接骨木、蓝莓、花楸果及其组合。
[0239]
有利地，染色剂b为接骨木果实的水提取物或水醇提取物，或接骨木果实的粉末。在水醇提取物的情况下，醇有利地与水混溶，如乙醇。
[0240]
有利地，染色剂b为蓝莓果实的水提取物或水醇提取物，或蓝莓果实的粉末。在水醇提取物的情况下，醇有利地与水混溶，如乙醇。
[0241]
有利地，染色剂b为花楸果果实的水提取物或水醇提取物，或花楸果果实的粉末。在水醇提取物的情况下，醇有利地与水混溶，如乙醇。
[0242]
有利地，染色剂b来源于至少一种作为单宁来源的着色植物。特别地，单宁的来源
植物选自栗树、余甘子(emblica officinalis)、石榴及其组合。
[0243]
在此处，单宁植物试图使颜色变暗，特别是变暗至灰色或深栗色。
[0244]
有利地，染色剂b包含单宁。
[0245]
有利地，染色剂b为栗树木材的水提取物或水醇提取物，或栗树木材的粉末。在水醇提取物的情况下，醇有利地与水混溶，如乙醇。
[0246]
有利地，染色剂b为余甘子果实的水提取物或水醇提取物，或余甘子果实的粉末。在水醇提取物的情况下，醇有利地与水混溶，如乙醇。
[0247]
有利地，染色剂b为石榴果实(尤其是果皮)的水提取物或水醇提取物，或石榴果实(尤其是果皮)的粉末。在水醇提取物的情况下，醇有利地与水混溶，如乙醇。
[0248]
有利地，染色剂b来源于至少一种作为栗色颜料来源的着色植物。特别地，栗色颜料的植物来源为大黄(rhapontic)。
[0249]
有利地，染色剂b为大黄根的水提取物或水醇提取物，或大黄根的粉末(食用大黄(rheum rhaponticum)根粉末)。
[0250]
上面提到的所有提取物和粉末都可以带有“有机”标签，即，不涉及化学合成步骤，并且可以通过对环境负责的方法获得。它们也可以被称为“纯素的”。
[0251]
本发明还可以提供通过半合成或合成方法获得的提取物的用途。
[0252]
特别地，染色剂b可以为叶绿素。叶绿素是绿色颜料的来源。
[0253]
可以通过根据包括叶绿素皂化步骤的半合成方法的提取来获得叶绿素。
[0254]
富含叶绿素的植物尤其可以选自苜蓿、白桑树、荨麻、藻类及其组合。
[0255]
例如，可以使用有机溶剂如丙酮、醇、烷烃(己烷或庚烷)或超临界co2从苜蓿的地上部分提取叶绿素。
[0256]
例如，可以使用有机溶剂如丙酮、醇、烷烃(己烷或庚烷)或超临界co2从白桑树的地上部分提取叶绿素。
[0257]
例如，可以使用有机溶剂如丙酮、醇、烷烃(己烷或庚烷)或超临界co2从荨麻的地上部分提取叶绿素。
[0258]
例如，可以使用有机溶剂如丙酮、醇、烷烃(己烷或庚烷)或超临界co2从藻类的叶状体(thallus)提取叶绿素。
[0259]
有益试剂
[0260]
根据本发明的组合物还可以包含有益试剂，特别是促进染料附着到其基质，尤其是纤维素纤维和/或角蛋白纤维的试剂。
[0261]
有益试剂优选为干燥形式，有利地为粉末形式，尤其具有小于250μm的颗粒尺寸。
[0262]
有益试剂还可以为植物提取物或植物粉末。
[0263]
例如，肉桂(中性指甲花(neutral henna))可以用于促进指甲花提取物a与纤维素和/或角蛋白纤维的附着。其还可以为毛发提供光泽。
[0264]
例如，芦荟，特别是芦荟叶的汁液提取物可以用作天然媒染剂，即，用作促进染色剂粘附的化合物。其还可以滋养和滋润角蛋白纤维并保护它们免受uv辐射。
[0265]
芦荟还包含蒽醌(如芦荟素和芦荟大黄素)、树脂、单宁和多糖。可以从芦荟叶中提取汁液/凝胶，其主要包含水和多糖，如果胶、半纤维素、葡甘露聚糖、乙酰甘露聚糖和甘露糖衍生物。这种汁液/凝胶还可以包含氨基酸、脂质、甾醇(如羽扇豆醇和菜油甾醇)和酶。
[0266]
有益试剂可以为果聚糖，如菊粉，因为其具有包覆角蛋白纤维的特性。
[0267]
组合物
[0268]
根据本发明的组合物包含指甲花提取物a和至少一种染色剂b。其可以进一步包含如上文所公开的有益试剂和/或如下文所公开的一种或多种另外的染色剂。
[0269]
有利地，其包含有限数量的染色剂，所述有限数量的染色剂不超过10种染色剂，有利地不超过5种染色剂，更有利地不超过4种染色剂，甚至更有利地不超过3种染色剂。
[0270]
特别有利地注意到，利用指甲花提取物a，使用有限数量的染色剂可以获得宽泛的调色板，特别是在染发中寻求的整个调色板。这种有限的数量降低了不耐受和不相容的风险，并且更经济。
[0271]
此外，根据本发明的组合提供了一种染料组合物：
[0272]-是天然的，不含动物产品，即基于来自植物、微生物或微藻的染料；
[0273]-暴露时间短，有利地染发小于一小时；
[0274]-优选单次应用，包括染发；
[0275]-优选是有机的和纯素的；
[0276]-具有良好的颜色保持性，包括对染发多次洗涤后，包括10次洗发，有利地15次洗发后。
[0277]
本发明还能够制备不需要使用过氧化氢的染发剂。其还可以不需要使用碱性化学试剂。
[0278]
特别有利的组合为：
[0279]-指甲花提取物a(特别是指甲花提取物an)和洋苏木提取物，
[0280]-指甲花提取物a(特别是指甲花提取物an)和洋苏木粉末，
[0281]-指甲花提取物a(特别是指甲花提取物an)和高粱提取物，
[0282]-指甲花提取物a(特别是指甲花提取物an)和高粱粉末，
[0283]-指甲花提取物a(特别是指甲花提取物an)和栀子花提取物，
[0284]-指甲花提取物a(特别是指甲花提取物an)和栀子花粉末，
[0285]-指甲花提取物a(特别是指甲花提取物an)和叶绿素，
[0286]-指甲花提取物a(特别是指甲花提取物an)和木蓝属(indigofera)植物提取物，
[0287]-指甲花提取物a(特别是指甲花提取物an)和木蓝属植物粉末。
[0288]
在一个特别的实施方案中，根据本发明的染料组合物包含以重量计10至90％，尤其10至50％，或50％至90％的标准化指甲花提取物an，相对于组合物的总干重以干燥提取物表示标准化提取物的重量。
[0289]
在一个特别的实施方案中，根据本发明的染料组合物包含以重量计10至90％，尤其10至50％，或50％至90％的染色剂b，相对于组合物的总干重以干燥提取物表示染色剂b的重量。
[0290]
可以将提取物特别是指甲花提取物a标准化，将在组合物中发现载体。
[0291]
载体尤其可以选自丙二醇、戊二醇、甘油、丙二醇、甲基thf和戊醇。
[0292]
当根据本发明的染料组合物为粉末形式时，载体优选选自糖和多糖衍生物，如果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖糊精、纤维素衍生物、淀粉(例如玉米、小麦或大米淀粉)、琼脂、树胶、粘质物和多元醇，如甘露醇、山梨醇、木糖醇等。特别地，载体选自果糖、麦芽糖糊精和淀
粉，特别是大米淀粉。
[0293]
当根据本发明的染料组合物为粉末形式时，技术人员可以通过他们熟知的任何方法调整其颗粒尺寸。
[0294]
特别地，根据本发明的染料组合物可以为颗粒尺寸小于250μm的粉末形式。
[0295]
组合物可以进一步包含一种或多种可接受的赋形剂，特别是一种或多种适合应用于人角蛋白纤维的化妆品上可接受的赋形剂(例如下文所公开的)。
[0296]
有利地，组合物不含通常存在于指甲花组合物中以稳定指甲花醌的稳定剂。
[0297]
有利地，根据本发明的染料组合物不含由合成染料(如二氨基甲苯和二氨基苯，特别是最常使用的ppd(对苯二胺))或重金属组成的添加剂(wang等人j.environ.anal.toxicol.2016,6(3)；wang等人j.chromatogr.b 2011,879,1795
–
1801)。
[0298]
化妆品组合物
[0299]
染料组合物优选为化妆品组合物，可以将其配制成通过外部局部途径施用。
[0300]
可以将根据本发明的化妆品组合物配制成适合局部施用的各种制剂形式，特别地包括霜剂、乳剂、乳液、软膏剂、洗剂、油、水或水醇或乙二醇(glycolic)溶液、粉末、喷雾剂、洗发剂、清漆(varnish)或任何用于外部应用的其他产品。
[0301]
染色化妆品组合物有利地包含化妆品上可接受的赋形剂。
[0302]
尤其，根据本发明的组合物还可以包含至少一种本领域技术人员已知的化妆品上可接受的赋形剂，所述赋形剂选自表面活性剂、质地和/或感觉剂、防腐剂、香料、染料、化学或矿物uv过滤剂、保湿剂、矿物水、酸度校正剂等。本领域技术人员知晓如何使用他们的常识来调整根据本发明的组合物的制剂。
[0303]
特别地，组合物包含至少一种酸度校正剂，所述酸度校正剂有利地选自有机酸(特别是柠檬酸、乙酸)、碳酸盐和碳酸氢盐(特别是碳酸氢钠、碳酸氢钙或碳酸氢钾)。
[0304]
特别地，组合物可以包含至少一种质地和/或感觉剂，所述质地和/或感觉剂有利地选自麦芽糖糊精、果聚糖(如菊粉)、竹硅纤维素、多糖如瓜尔胶、黄原胶、藻酸盐、角叉菜胶、刺槐豆胶、阿拉伯树胶、金合欢胶、魔芋、果胶及其组合，有利地，组合物包含黄原胶或黄原胶-金合欢胶组合。纤维素可以尤其为纤维素醚，如羧甲基纤维素或羟丙基甲基纤维素。
[0305]
在一些实施方案中，根据前述权利要求中任一项所述的染料组合物进一步包含至少一种如本文所公开的有益试剂和/或至少一种如本文所公开的化妆品上可接受的赋形剂，所述赋形剂优选选自质地和/或感觉剂、酸度校正剂及其混合物。
[0306]
试剂盒或组合产品
[0307]
本发明还涉及一种试剂盒或组合产品，其包含以下组分：包含根据本发明的散沫花的地上部分的提取物a和至少一种如前面所定义的染色剂b的组合的组分(x)和包含至少一种化妆品上可接受的赋形剂的组分(y)。
[0308]
该赋形剂可以如先前对于化妆品组合物所定义，并且特别地选自质地和/或感觉剂、酸度校正剂及其混合物。
[0309]
有利地，组分(y)为护发产品，其选自洗发水、护发素、护发油、护发洗剂、护发霜剂等。
[0310]
组分(x)有利地为干燥形式，尤其是粉末。
[0311]
方法和用途
[0312]
本发明还涉及根据本发明的组合物用于角蛋白纤维，尤其是人角蛋白纤维的美容染色的用途。在这种情况下，优选使用标准化指甲花提取物an。
[0313]
已经有效地看到，组合物可以包含有限数量的染色剂，但仍然覆盖了毛发染料所寻求的整个颜色范围，无论是同系配色的还是永久性的。根据本发明的组合物还能够获得颜色和反射(色调)的色度盘。染料还可以更有效地遮盖白发。
[0314]
本发明和根据本发明的组合物的另一个优势在于，尽管反复洗涤，仍能维持所获得的颜色，尤其是在角蛋白纤维(如毛发)上所获得的颜色。
[0315]
因此，有利地，染色后洗涤10次，有利地15次后，着色角蛋白纤维的光泽降低不大于8个单位，有利地不大于6个单位，更有利地不大于5个单位，甚至更有利地不大于4个单位，甚至更有利地不大于3个单位，根据实施例中描述的方案，通过测量de*参数来评估所述光泽。
[0316]
本发明和根据本发明的组合物的另一个优势在于在较短的暴露时间内获得染色，有利地染发少于一小时。它也可以在单次应用中获得。
[0317]
本发明还涉及一种用于使角蛋白纤维染色的美容方法，其包括将根据本发明的组合物应用到角蛋白纤维上，任选随后进行冲洗。
[0318]
特别地，用于使角蛋白纤维，尤其是人角蛋白纤维染色的美容方法包括以下步骤：
[0319]
a)提供根据本发明的组合物，特别是干燥形式，尤其是粉末形式，
[0320]
b)通过在20℃至98℃的温度向步骤a)的粉末中加入水性组合物尤其是水并混合来制备水性组合物，
[0321]
c)应用到角蛋白纤维上，任选地同时加热如此处理的纤维，
[0322]
d)冲洗，
[0323]
e)任选地，重复步骤c)和d)。
[0324]
有利地，不重复步骤c)和d)。
[0325]
观察到，少量的根据本发明的组合物和少量的水就足以为成人的头发染色。传统上，对于包含植物粉末或提取物的天然染料，建议将至少100g粉末与至少300g水混合，这导致“膏状物”很厚重，处理和应用时不太舒服。
[0326]
根据本发明，在步骤a)期间，提供有利地小于50g，更有利地小于30g，甚至更有利地小于25g，例如15g至30g，有利地15g至25g，更有利地约20g的根据本发明的组合物的粉末。
[0327]
在步骤b)期间，有利地加入足量的水以制备100g至150g的组合物。
[0328]
加入的水可以为常温水或热水(热自来水)。热水温度可以为至少50℃，有利地至少70℃，或甚至至少90℃，其容易在茶壶中获得。
[0329]
因此，100g或150g的水性组合物足以获得可应用于头部的制剂。所获得的组合物具有令人愉悦的制剂，这与已知天然染料的非常厚重和令人不快的“膏状物”感不同。
[0330]
应用步骤可以是那些已经用于化学染发剂的步骤，在冲洗步骤之前有暴露时间步骤。特别地，暴露时间步骤还包括加热步骤，特别是在25℃至65℃、有利地30℃至60℃、特别地55℃或特别地35℃的温度。可替代地，可以在环境温度(尤其是20℃至30℃)进行暴露时间步骤，无需额外的热输入，因此无需加热步骤。
[0331]
有利地，暴露时间短，即小于1小时，优选小于45分钟。
[0332]
有利地，在20℃至55℃的温度进行应用步骤c)，持续时间为15分钟至1小时，更有利地15分钟至45分钟。
[0333]
可以在干的或湿的角蛋白纤维束上进行应用步骤c)。
[0334]
在一个实施方案中，染料为同系配色染料。
[0335]
特别地，染料为在金色毛发上的金色染料。在这种情况下，染色剂b有利地选自栀子提取物、栀子粉末或其组合。
[0336]
特别地，染料为在金色或红色毛发上的红色染料。在这种情况下，染色剂b有利地选自高粱提取物、高粱粉末或其组合。
[0337]
特别地，染料为在金色、红色或深金色毛发上的深金色染料。在这种情况下，染色剂b有利地为叶绿素。
[0338]
可替代地，用于使角蛋白纤维，尤其是人角蛋白纤维染色的美容方法包括以下步骤：
[0339]
a.1)提供根据本发明的提取物a，任选地具有至少一种如前面所定义的化妆品上可接受的赋形剂，特别是干燥形式，尤其是粉末形式，
[0340]
b.1)通过在20℃至98℃的温度向步骤a.1)的粉末中加入水性组合物尤其是水并混合来制备水性组合物，
[0341]
c.1)将步骤b.1)的组合物应用到角蛋白纤维上，任选地同时加热如此处理的纤维，
[0342]
d.1)冲洗，
[0343]
a.2)提供根据本发明的提取物b，任选地具有至少一种如前面所定义的化妆品上可接受的赋形剂，特别是干燥形式，尤其是粉末形式，
[0344]
b.2)通过在20℃至98℃的温度向步骤a.2)的粉末中加入水性组合物尤其是水并混合来制备水性组合物，
[0345]
c.2)将步骤b.2)的组合物应用到角蛋白纤维上，任选地同时加热如此处理的纤维，
[0346]
d.2)冲洗，
[0347]
e)任选地，但非优选地，重复步骤c.1)和d.1)和/或c.2)和d.2)。
[0348]
可替代地，用于使角蛋白纤维，尤其是人角蛋白纤维染色的美容方法包括以下步骤：
[0349]
a.1)提供根据本发明的提取物b，任选地具有至少一种如前面所定义的化妆品上可接受的赋形剂，特别是干燥形式，尤其是粉末形式，
[0350]
b.1)通过在20℃至98℃的温度向步骤a.1)的粉末中加入水性组合物尤其是水并混合来制备水性组合物，
[0351]
c.1)将步骤b.1)的组合物应用到角蛋白纤维上，任选地同时加热如此处理的纤维，
[0352]
d.1)冲洗，
[0353]
a.2)提供根据本发明的提取物a，任选地具有至少一种如前面所定义的化妆品上可接受的赋形剂，特别是干燥形式，尤其是粉末形式，
[0354]
b.2)通过在20℃至98℃的温度向步骤a.2)的粉末中加入水性组合物尤其是水并
corporation,milford,美国)，并将流速设置为0.4ml/min。流动相由(a)含0.1％甲酸的水和(b)乙腈和(c)甲醇(作为洗涤溶剂)的线性梯度系统组成：0-9min,2％-100％b；9-9.55min,维持100％b；9.55-9.70min,0％-100％c；9.7-10.2min,维持100％c；10.20-10.35min,0％-100％b；10.35-10.85min,维持100％b；10.85-11min,0％-98％a；进行98％a-2％b持续1min用于使柱平衡。
[0377]
通过高分辨率质谱、1d-nmr和2d-nmr实验(1h nmr、
13
c nmr、dept、cosy、hmbc、hsqc)鉴定化合物。
[0378]
b)定量分析：实验条件
[0379]
通过用c18柱(xbridge 100c18；3.5mm,150mm x 4.6mm)进行的分析型hplc滴定木犀草素、芹菜素，所述hplc使用梯度条件(见下文)，以h2o/三氟乙酸0.1％(a)和乙腈/三氟乙酸0.1％(b)作为洗脱剂：
[0380]
梯度条件：t0 a 18％b 82％；t1min:a 18％b 82％；10min a 50％b 50％；10.1min:a 18％b 82％
[0381]
uv检测在340nm(对于芹菜素)和310nm(对于木犀草素)。流速为1ml/min，温度为40℃。使用纯的木犀草素、芹菜素和对香豆素用于校准。
[0382]
实施例1：根据本发明的乙酸异丙酯提取物。
[0383]
在30-40℃，用500ml水提取50g未粉碎的散沫花叶子持续30分钟。将600ml乙酸异丙酯加入至该溶液。将其混合30分钟。倾析后，回收上层的乙酸异丙酯相(480ml)，将水相分离，因为其几乎不含指甲花醌。将乙酸异丙酯相过滤，然后用rotavapor干燥。残余物为干燥的指甲花提取物。
[0384]
植物包含1.5g指甲花醌/100g干燥植物。
[0385]
乙酸异丙酯上层相包含80.7％的植物中存在的指甲花醌潜力。
[0386]
干燥的指甲花提取物包含以重量计30.2％的指甲花醌，即，71％的植物中存在的指甲花醌。
[0387]
稳定性研究：将样品储存在25℃、60％相对湿度且避光：
[0388]
在t0时：指甲花醌含量＝相对于干燥提取物的重量以重量计30.2％的指甲花醌。
[0389]
在t1月时：指甲花醌含量＝相对于干燥提取物的重量以重量计29.7％的指甲花醌；因此，在本发明的意义内没有显著的损失。
[0390]
实施例2：根据本发明的乙酸异丙酯提取物n
°
2。
[0391]
在30-40℃，用500ml水提取49.5g未粉碎的散沫花叶子持续30分钟。将600ml乙酸异丙酯加入至该溶液。将其混合30分钟。倾析后，将上层的乙酸异丙酯相回收并在b
ü
chner(k900)上过滤，将残余物用50ml乙酸异丙酯冲洗。然后，将所得的溶液用rotavapor干燥。残余物为干燥的指甲花提取物(样品e2)。
[0392]
干燥的指甲花提取物(样品e2)包含30.9重量％的指甲花醌。
[0393]
结果
[0394]
uhplc-uv色谱图
[0395]
所得的uhplc-uv色谱图显示在图1和图2中。在所述色谱图的放大中可以观察到的峰(图2，实线)与以下化合物相关：
[0396][0397]
uv光谱
[0398]
对应于峰n
°
15、20、22、10和5的化合物的uv光谱分别显示在图3a、图3b、图3c、图3d和图3e中。
[0399]
定量分析
[0400]
材料和方法
[0401]
批次样品
[0402]-lp110：指甲花提取物an，用麦芽糖糊精标准化的乙酸乙酯提取物-工业规模。
[0403]-es310：指甲花提取物an，用麦芽糖糊精标准化的乙酸乙酯提取物-实验室规模。
[0404]-jq137a：指甲花提取物an，用果糖的乙酸异丙酯指甲花提取物-实验室规模。
[0405]
每一种上面的标准化提取物中的指甲花醌均等于1.1重量％。
[0406]
结果：
[0407][0408][0409]
实施例3：根据本发明的乙酸乙酯标准化干燥提取物。
[0410]
在30-40℃，用500ml水提取50g粉碎的散沫花叶子持续30分钟。将600ml乙酸乙酯加入至该溶液。将其混合30分钟。倾析后，回收上层的乙酸乙酯相，去除水相，因为其具有非常低的指甲花醌含量。
[0411]
通过h.p.l.c测定乙酸乙酯相中的指甲花醌含量，加入足量的麦芽糖糊精以获得含有1.3重量％的指甲花醌的混合物，然后将其冻干。
[0412]
用麦芽糖糊精标准化的干燥指甲花提取物包含1.1重量％的指甲花醌，即71％的植物中的最初指甲花醌含量。
[0413]
实施例4：根据本发明的正丁醇提取物
[0414]
在30-40℃，用6体积水提取50g未粉碎的散沫花叶子持续30分钟。在室温将6体积正丁醇加入至该溶液。将该混合物搅拌30分钟。倾析后，回收上层的丁醇相，将水相去除，因为其几乎不含指甲花醌。有机相通过水而浓缩。
[0415]
通过hplc测定正丁醇相中的指甲花醌含量。加入足量的麦芽糖糊精以获得含有1.1至1.3重量％的指甲花醌的混合物。
[0416]
将浓缩物干燥以获得粉末。
[0417]
结果
[0418]
uhplc-uv色谱图
[0419]
所得的uhplc-uv色谱图显示在图5中。可以观察到的峰与以下化合物相关：
[0420]
分辨时间化合物
4.47指甲花醌3.382,3,4,6-四羟基苯乙酮5.34木犀草素5.96芹菜素
[0421]
注意到糖基化木犀草素(特别是木犀草素-6-c-新橙皮苷)和香豆酸的存在。
[0422]
方法1：通过hplc的指甲花醌分析
[0423]
该方法可以应用于：
[0424]
a.提取物中指甲花醌的分析
[0425]
b.总指甲花醌的分析，所述总指甲花醌在散沫花的地上部分中以游离形式或糖基化的指甲花醌衍生物形式存在，通过酸水解获得，由此量化植物中的指甲花醌潜力，
[0426]
c.通过酶形成的指甲花醌的分析。
[0427]
试剂
[0428]
指甲花醌》97％(hplc)sigma
–
ref:h46805。
[0429]
分析用二氯甲烷。
[0430]
分析用硫酸。
[0431]
分析用甲醇。
[0432]
hplc级水。
[0433]
hplc级乙腈。
[0434]
hplc级三氟乙酸。
[0435]
hplc条件
[0436]-柱：xbridge c18,3.5μm,4.6x150mm waters
[0437]
炉温：40℃
[0438]-溶剂：s-a：0.1％三氟乙酸水溶液。
[0439]
s-b：0.1％三氟乙酸乙腈溶液。
[0440]-梯度：t0 min 40％s
–
a；t 1min 40％s
–
a；t 10min 5％s
–
a；t 11min 5％s
–
a；t 11.1min 40％s
–
a。
[0441]-波长：λ＝278nm。
[0442]-流速：1ml/min
[0443]-进样：10μl。
[0444]
样品制备：
[0445]
对于整片或粗粉碎的叶子：
[0446]
将50g叶子粉碎，然后通过0.355μm的筛子过筛。
[0447]
对于叶子粉末：
[0448]
按原样使用50g叶子粉末。
[0449]
溶液的制备
[0450]
·
对照溶液：
[0451]
在1/1甲醇/乙醇中的0.3mg/ml指甲花醌溶液。用1/1甲醇/水稀释至1/10、1/20、1/100。
[0452]
·
测试溶液：
[0453]-测试溶液a(提取物中存在的指甲花醌的分析)
[0454]
将50mg提取物溶解在100ml的1/1甲醇/水中。用超声波溶解。在acrodisc gfghp上过滤。进样10μl。
[0455]-测试溶液b(总指甲花醌的分析)
[0456]
将80mg叶子粉末加入至容量瓶中。加入50ml的2n h2so4。加热至97℃持续30分钟。冷却。加入甲醇适量至100ml。在acrodisc gf ghp 0.45μm上过滤溶液。进样10μl滤液。
[0457]-测试溶液c(通过酶形成的指甲花醌的分析)
[0458]
将80mg叶子粉末加入至容量瓶中。加入50ml脱矿物质水。在30至40℃在超声波浴中放置30分钟。冷却。加入甲醇适量至100ml。在acrodisc gf ghp 0.45μm上过滤溶液。进样10μl滤液。
[0459]
结果
[0460]
使用由对照溶液计算的回归线以确定：
[0461]
a.提取物的指甲花醌含量，
[0462]
b.总指甲花醌含量，和/或
[0463]
c.通过酶形成的指甲花醌的含量。
[0464]
方法2：含氮化合物(氨基酸、蛋白质)的分析
[0465]
可以通过茚三酮分光光度法在水解之前或之后分析游离氨基酸和蛋白质。以相对于天冬酰胺的氨基酸百分比表示结果。
[0466]
总蛋白质和氨基酸的分析
[0467]
原理
[0468]
酸水解后通过茚三酮试剂的氨基酸比色分析。以相对于天冬酰胺的总氨基酸百分比表示结果。
[0469]
试剂
[0470]
·
柠檬酸盐缓冲液(ph＝5)
[0471]
将2.1g柠檬酸溶解于20ml水中，加入20ml的1n氢氧化钠，并用水调节至50ml。
[0472]
·
茚三酮试剂：
[0473]
将0.08g氯化锡(ii)(sncl2，2h2o)溶解于50ml柠檬酸盐缓冲液(ph＝5)中。
[0474]
将2g茚三酮溶解于50ml乙二醇单甲醚(egme)中。
[0475]
将两种溶液混合。
[0476]
·
6n盐酸
[0477]
稀释至浓盐酸(36％)的1/2。
[0478]
·
稀释剂
[0479]
将100ml的1-丙醇与100ml水混合。
[0480]
溶液的制备
[0481]
·
校准范围的制备
[0482]
将17mg天冬酰胺溶解于100ml水中。
[0483]
·
测试溶液的制备
[0484]
根据待分析的样品，称取约30至200mg提取物(pe1)至螺纹管中，加入2ml的6n hcl。
[0485]
密封，然后在110℃放置约16小时。
[0486]
用3n氢氧化钠中和(甲基红改变颜色)，然后用水调节至20ml。
[0487]
分析
[0488][0489][0490]
搅拌并在100℃的水浴中放置20分钟。在冰浴中冷却。用稀释剂调节至10ml。
[0491]
测量不同溶液在570nm处的相对于空白的吸光度。
[0492]
计算
[0493]
绘制校准曲线。从中推导出测试溶液中以天冬酰胺表示的总氨基酸浓度(q
aat
)。提取物的总氨基酸含量(t
aat
)由下式给出：
[0494][0495]
其中q
aat
以mg/ml为单位，pe1以mg为单位
[0496]
方法3：叶绿素的重量分析
[0497]
可以通过用庚烷洗涤提取物后获得的重量来评价提取物中的叶绿素含量。用10体积的甲醇处理提取物。搅拌15min后，将溶液过滤。将上清液干燥，并构成含有叶绿素的级分。
[0498]
方法4：酚化合物的分光光度法分析
[0499]
可以根据欧洲药典(9.0,2.8.14版)的方法通过分光光度法评价提取物中酚化合物的含量。
[0500]
通过将25mg提取物溶解在100ml水中制备待测溶液。
[0501]
参照连苯三酚表示酚化合物的含量。
[0502]
方法5：糖化合物在水解前后的比色分析
[0503]
原理：在水解前后，与葡萄糖相比，通过二硝基水杨酸(dns)的糖化合物的比色测定。结果表示为糖化合物相对于葡萄糖的百分比。
[0504]
试剂：
[0505]
dns试剂：将30g双酒石酸钠和双酒石酸钾溶解于50ml水中。加入20ml的2n氢氧化钠。在稍微加热的同时溶解1g二硝基水杨酸(dns)。用水定容至100ml。
[0506]
溶液的制备：
[0507]
校准范围的制备：将5mg葡萄糖溶解在10ml水中。
[0508]
水解测试溶液的制备(总糖化合物)：称取约1g提取物(pe2)。加入1ml的4n h2so4。加热回流2小时。用1n氢氧化钠中和，并转移到20ml容量瓶中。用水定容至20ml。
[0509]
非水解测试溶液的制备(游离糖化合物＝单糖)：在20ml容量瓶中称取约10g提取物(pe3)。用水定容至20ml。
[0510]
剂量：溶液根据下表配制(dosed)：
[0511] t 0.5t1t1.5t2测试空白对照溶液(ml)0.511.52
‑‑
测试溶液(ml)
‑‑‑‑
1-水(ml)1.510.5012dns111111
[0512]
摇动，然后在100℃的水浴中放置5分钟。在冰浴上冷却，并用水定容至10ml。测量不同溶液在540nm处的相对于空白的吸光度。
[0513]
计算：
[0514]
绘制校准曲线。
[0515]
推导出测试溶液中以葡萄糖表示的总糖化合物(qsrt)和游离糖(qsrl)的浓度。提取物的总糖化合物(tsrt)的滴度由下式提供：
[0516][0517]
其中q
srt
以mg/ml为单位，pe2以mg为单位
[0518]
提取物的游离糖化合物(tsrl)的滴度由下式提供：
[0519][0520]
其中q
srl
以mg/ml为单位，pe3以mg为单位
[0521]
方法6：参数de*的测定
[0522]
使用反射色度计(cr400 chroma meter，minolta，法国)测量颜色。通过该设备测量的颜色参数l*a*b*描述了发束(strand)颜色。
[0523]
评估的参数为l*a*b的导数，即，颜色差(de*)。
[0524]
[数学式4]
[0525][0526]
其中l1*、a1*、b1*为国际照明委员会(the international commission on illumination)于1976年建立的cielab色彩空间中第一种待比较颜色的坐标，l2*、a2*、b2*为第二种颜色的坐标。