本发明公开了一种人血浆载脂蛋白A‑I的分离纯化方法,包括以下步骤:1)将人血浆组分FIV‑1蛋白沉淀溶解于缓冲液中,过滤,得滤液;2)利用阴离子交换层析对步骤1)得到的滤液进行初步分离,收集含载脂蛋白A‑I的洗脱液;3)利用阳离子交换层析对步骤2)中的收集的载脂蛋白A‑I洗脱液进行二次分离,收集含载脂蛋白A‑I的洗脱液;4)利用疏水作用层析对步骤3)中的收集的洗脱液进行三次分离,收集含载脂蛋白A‑I的洗脱液。
本方法步骤简单、安全性好、易规模化生产,得到的载脂蛋白A‑I纯度≥95%,每步层析回收率≥90%,解决了目前载脂蛋白制备方法中纯度和回收率低的问题。
何洁 郭采平 丁玉江 谭淑娴 王锦才 张战 张运佳 黄伟荣
深圳市卫光生物制品股份有限公司
518107 广东省深圳市光明新区光明街道光侨大道3402号
本发明公开了一种人血浆载脂蛋白A‑I的分离纯化方法,包括以下步骤:1)将人血浆组分FIV‑1蛋白沉淀溶解于缓冲液中,过滤,得滤液;2)利用阴离子交换层析对步骤1)得到的滤液进行初步分离,收集含载脂蛋白A‑I的洗脱液;3)利用阳离子交换层析对步骤2)中的收集的载脂蛋白A‑I洗脱液进行二次分离,收集含载脂蛋白A‑I的洗脱液;4)利用疏水作用层析对步骤3)中的收集的洗脱液进行三次分离,收集含载脂蛋白A‑I的洗脱液。
本方法步骤简单、安全性好、易规模化生产,得到的载脂蛋白A‑I纯度≥95%,每步层析回收率≥90%,解决了目前载脂蛋白制备方法中纯度和回收率低的问题。