本发明公开了一种适用于雷帕霉素介导调控蛋白亚细胞定位的黄酒酵母,属于遗传工程领域。
本发明是以黄酒酵母XZ‑11(MATa,Δura3,Δtrp1)作为出发菌株,通过敲除雷帕霉素结合亚基编码基因FPR1,阻断雷帕霉素与内源基因FPR1编码产物的结合。
同时将TOR1基因1972位的丝氨酸残基突变为精氨酸,使菌株生长不受雷帕霉素抑制。
由此构建的重组菌JNZ01(MATa,Δura3,Δtrp1,TOR1 S1972R,Δfpr1)在含有1μg/mL、5μg/mL、10μg/mL雷帕霉素的培养基中生长良好,为运用雷帕霉素介导调控蛋白亚细胞定位提供了基础。
周景文 陈坚 张伟平 曾伟主 方芳 堵国成 夏小乐
江南大学
214000 江苏省无锡市蠡湖大道1800号
本发明公开了一种适用于雷帕霉素介导调控蛋白亚细胞定位的黄酒酵母,属于遗传工程领域。
本发明是以黄酒酵母XZ‑11(MATa,Δura3,Δtrp1)作为出发菌株,通过敲除雷帕霉素结合亚基编码基因FPR1,阻断雷帕霉素与内源基因FPR1编码产物的结合。
同时将TOR1基因1972位的丝氨酸残基突变为精氨酸,使菌株生长不受雷帕霉素抑制。
由此构建的重组菌JNZ01(MATa,Δura3,Δtrp1,TOR1 S1972R,Δfpr1)在含有1μg/mL、5μg/mL、10μg/mL雷帕霉素的培养基中生长良好,为运用雷帕霉素介导调控蛋白亚细胞定位提供了基础。