1.本发明涉及体外诊断试剂技术领域，尤其是一种尿素测定试剂盒。
背景技术：
2.尿素氮是人体蛋白质代谢的主要终末产物，通常肾脏为排泄尿素的主要器官，尿素从肾小球滤过后在各段小管均可重吸收，但肾小管内尿流速越快重吸收越少，也即达到了最大清除率；和血肌酐一样，在肾功能损害早期，血尿素氮可在正常范围；当肾小球滤过率下降到正常的50％以下时，血尿素氮的浓度才迅速升高；各种肾实质性病变，如肾小球肾炎、间质性肾炎、急慢性肾功能衰竭、肾内占位性和破坏性病变均可使血尿素氮增高；多肾外因素也可引起血尿素氮升高。
3.由于测定尿素在临床非常重要，国内外厂家都开发出尿素测定试剂盒为临床提供了间接而准确的诊断工具。现有的第一代常规尿素测定试剂盒，在实际临床应用过程中，申请人发现国内外厂家的尿素测定试剂盒都有一个问题存在，尿素测定试剂盒在存放时间长以后在临床应用过程中由于脲酶的降解，导致定标出来的k值不断变大，使得临床需要过一段时间就定标，如果临床不注意就容易导致检测结果不准，引起误诊。
4.有鉴于此，申请人研发了第二代尿素测定试剂盒。
技术实现要素：
5.本发明需要解决的技术问题是提供一种尿素测定试剂盒，该测定试剂盒和第一代相比解决了脲酶稳定性问题，在存放过程中临床定标后k值稳定，不需要定期或不定期的定标问题。
6.为解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是：
7.一种尿素测定试剂盒，包括彼此独立的试剂1和试剂2，试剂1和试剂2的比例为5：1，所述试剂1的组分为：tris缓冲液、6n盐酸、α酮戊二酸、edta-na22h2o、bsa、叠氮钠、二磷酸腺苷单钾盐、脲酶、谷氨酸脱氢酶；
8.所述试剂2的组分为：tris缓冲液、α酮戊二酸、氢氧化钠、edta-na22h2o、叠氮钠、nadh。
9.本发明技术方案的进一步改进在于：
10.所述试剂1的组分和用量为：21.09～21.11g/ltris缓冲液、6.29～6.31ml/l6n盐酸、1.49～1.51g/lα酮戊二酸、0.362～0.382g/ledta-na22h2o、0.99～1.01g/lbsa、0.49～0.51g/l叠氮钠、0.615～0.635g/l二磷酸腺苷单钾盐、9.9～10.1ku/l脲酶、1.65～1.85ku/l谷氨酸脱氢酶；
11.所述试剂2的组分和用量为：12.0～12.2g/ltris缓冲液、3.99～4.01g/lα酮戊二酸、5.99～6.01g/l氢氧化钠、3.71～3.73g/ledta-na22h2o、0.49～0.51g/l叠氮钠、1.648～1.652g/lnadh。
12.本发明技术方案的进一步改进在于：
13.所述试剂1的组分和用量为：21.1g/ltris缓冲液、6.3ml/l6n盐酸、1.5g/lα酮戊二酸、0.372g/ledta-na22h2o、1.0g/lbsa、0.5g/l叠氮钠、0.625g/l二磷酸腺苷单钾盐、10ku/l脲酶、1.75ku/l谷氨酸脱氢酶；
14.所述试剂2的组分和用量为：12.1g/ltris缓冲液、4.00g/lα酮戊二酸、6.00g/l氢氧化钠、3.72g/ledta-na22h2o、0.5g/l叠氮钠、1.65g/lnadh。
15.由于采用了上述技术方案，本发明取得的技术进步是：
16.1、本发明将脲酶放置于试剂1中，只需要投料10ku/l，减缓了脲酶的降解速度，通过调整谷氨酸脱氢酶的含量来达到稳定的目的，临床平时不需要定标就能确保检测结果的准确性，临床使用起来更方便更准确。
17.2、本发明有效的解决了尿素测定试剂盒在存放过程中脲酶降解从而导致临床检测不准的问题，能更好的满足临床要求，和目前市场上的同类产品使用更方便，更准确。
18.3、本发明解决了临床使用尿素测定试剂盒反复定标和尿素测定试剂盒里面脲酶稳定性问题。
附图说明
19.图1是本发明的实施例的定标曲线；
20.图2是本发明的对比例的定标曲线。
具体实施方式
21.下面结合附图及实施例对本发明做进一步详细说明：
22.实施例
23.试剂1
24.[0025][0026]
试剂2
[0027]
名称用量单位允许误差tris缓冲液12.1g/l
±
0.1gα酮戊二酸4.00g/l
±
0.01g氢氧化钠6.00g/l
±
0.01gedta-na22h2o3.72g/l
±
0.01g叠氮钠0.5g/l
±
0.01gnadh1.65g/l
±
0.002g
[0028]
对比例
[0029]
试剂1
[0030]
[0031][0032]
试剂2
[0033]
名称用量单位允许误差tris缓冲液12.1g/l
±
0.1gα酮戊二酸4.00g/l
±
0.01g氢氧化钠6.00g/l
±
0.01gedta-na22h2o3.72g/l
±
0.01g叠氮钠0.5g/l
±
0.01g脲酶50-80ku/l
±
0.1kunadh1.65g/l
±
0.002g
[0034]
工作原理：
[0035]
尿素测定试剂盒试剂1和试剂2比例都是5：1，目前国内外厂家都是将脲酶放置在试剂2中(如对比例)，为了保证试剂盒的有效期内的有效性，脲酶投料量一般在50-80ku/l之间，各厂家采用了大量投料来抵消脲酶的降解以确保有效期内的准确性，但随着脲酶的降解临床质控会不定期的失控，导致检测数据不准，一旦失控临床就需要重新定标来保证准确度；本发明将脲酶放置于试剂1中，只需要投料10ku/l，减缓了脲酶的降解速度通过调整谷氨酸脱氢酶的含量来达到稳定的目的，临床平时不需要定标就能确保检测结果的准确性，临床使用起来更方便、更准确。
[0036]
实施例与对比例测试结果比对：
[0037]
选用接近有效期末的对比例和实施例试剂同时测定三个已知数值的质控样本，测定结果如表1所示：
[0038]
表1
[0039]
对比例靶值123平均值相对偏差 20.618.6518.5418.5918.59-9.74％
ꢀ
7.316.736.656.566.65-9.07％ 36.0232.4532.6532.5232.54-9.66％实施例20.620.5520.5920.4420.53-0.36％ 7.317.417.417.377.401.19％ 36.0236.9936.7536.7736.842.27％
[0040]
由表1中数据明显得出，对比例测定的结果与质控品靶值相对偏差接近10％，而实施例测定的结果与质控品靶值相对偏差的结果均在3％以下，可见实施例的测定结果要优于对比例的测定结果。
[0041]
选取30个临床样本(高值样本可以通过向血清中加入线性物质获得)，用对比例和实施例同时测定，结果如表2所示：
[0042]
表2
[0043]
[0044][0045]
由表2可以看出，对比例与实施例测定结果绝对偏差在-3.41mmol/l～-0.1mmol/l7之间，相对偏差在-13.75％～-8.10％之间，可见实施例的测定结果优于对比例的测定结果。
[0046]
实施例的定标曲线，如图1所示。
[0047]
对比例的定标曲线，如图2所示。
[0048]
综上所述，本发明将脲酶放置于试剂1中，只需要投料10ku/l，减缓了脲酶的降解速度，通过调整谷氨酸脱氢酶的含量来达到稳定的目的，临床平时不需要定标就能确保检测结果的准确性，临床使用起来更方便更准确。