专利名称：核苷衍生物及抗疱疹组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及新的核苷衍生物，它们的制备方法和含有它们的抗疱疹组合物。
近来，为提供治疗各种病毒疾病的药物人们已认真做了大量的研究，尤其是获得性免疫缺损综合性(AIDS)构成了严重的社会问题。已知AIDS是因感染了人体免疫缺损病毒(HIV)，一种逆病毒(retroviruses)而引起的。目前，3′-脱氧-3′-叠氮胸苷(AZT)是被认定的治疗HIV感染的疾病的药物。但是，这种药物存在一个问题，即它对宿主细胞具有高毒性，会产生麻烦的副作用。因此，需要开发一些具有高抗逆病毒活性，但对宿主细胞具有低毒性的化合物。
还需要一种具有高抗疱疹病毒活性，特别是抗水痘带状疱疹病毒活性的化合物。作为抗疱疹病毒药物，无环鸟苷-一种鸟苷衍生物是已知的。无环鸟苷在小于0.05μl/ml的低浓度下对1型和2型单纯疱疹病毒(HSV)具有抑制作用，而它对水痘带状疱疹病毒(VZV)是在非常高的浓度下例如是HSV的400至600倍的浓度下具有抑制作用，并且，在“Clinic and Study，vol.70，No.8(1993，August)，P21”中报导无环鸟苷对不含胸苷激酶(TK)的巨细胞病毒(CMV)无作用。水痘带状疱疹病毒株被分成两种类型，即胸苷激酶-阳性(TK+)株和胸苷激酶-缺乏(TK-)株。因此，所需要的是对两种类型的水痘带状疱疹病毒株均有活性，特别是对胸苷激酶-缺乏的水痘带状疱疹病毒有活性的抗疱疹剂。
本发明的目的是提供新的具有高抗病毒活性如高抗疱疹病毒活性和高抗逆病毒活性的核苷衍生物。
明确地说，本发明的目的是提供对人体免疫缺损病毒和水痘带状疱疹病毒具有高抗病毒活性的新的核苷衍生物。
本发明是具有式(1-1)或(1-2)的核苷衍生物 其中A是通过其氮原子连接的含氮杂环;B是氢原子，卤素原子、叠氮基，具有1至7个碳原子的烷基，具有5至19个碳原子的芳烷基，具有2至15个碳原子的烷氧基烷基，具有1至7个碳原子的烷氧基，具有1至7个碳原子的卤代烷氧基，具有5至19个碳原子的芳烷氧基，具有4至10个碳原子的芳氧基，具有3至7个碳原子的环烷氧基，或具有4至6个碳原子和1或2个选自氧、氮和硫杂原子的环烷氧基;每个R1和R4分别是氢原子，具有1至7个碳原子的烷基，具有3至7个碳原子的环烷基，具有5至19个碳原子的芳烷基，或具有4至10个碳原子的芳基，其中每个芳烷基和芳基可带有1个或多个选自下列基团的取代基卤素原子，具有1至7个碳原子的烷基，具有1至7个碳原子的烷氧基，具有1至7个碳原子的卤代烷基，具有2至15个碳原子的烷氧基烷基和具有1至7个碳原子的卤代烷氧基;每个R2、R3、R5和R6分别是氢原子;卤素原子、羟基，具有1至7个碳原子的烷基，具有1至7个碳原子的烷氧基，具有1至7个碳原子的卤代烷基，具有2至15个碳原子的烷氧基烷基，具有1至7个碳原子的卤代烷氧基，具有5至19个碳原子的芳烷基，或具有4至10个碳原子的芳基;X1和X2分别是氧原子、硫原子、亚甲基或羰基。
式(1-1)和(1-2)的核苷衍生物可以是其药学上可接受的盐的形式。
式(1-1)和(1-2)中，糖化物环的第2和第3位置的空间构型可以是其脱氧型式的阿糖型、木糖型、核糖型或来苏糖型。
式(1-1)和(1-2)中的“A”是含有至少一个氮原子作为环原子的杂环，并通过其氮原子连接到糖化物的1位上。“A”表示的含氮杂环基团的优选结构是具有至少两个氮原子作为环原子的单环和每个环具有至少两个氮原子作为环原子的稠合双环。
具有至少两个氮原子的单环类型的“A”的优选实例是下列式(5-1)至(5-4)的基团
其中Q1是氢原子、卤素原子、-NQ7Q8基团、-N＝CQ9Q10基团、或-OQ7基团，其中的每个Q7和Q8分别是氢原子，具有1至7个碳原子的烷基(优选1至4个碳原子)，具有1至7个碳原子的卤代烷基(优选1至4个碳原子)，具有5至19个碳原子的芳烷基，具有4至10个碳原子的芳基(优选4至6个碳原子)，具有1至10个碳原子的酰基、烯丙基、或式(6)的基团 其中R1是氢原子，具有1至7个碳原子的烷基(优选1至4个碳原子)，具有3至7个碳原子的环烷基，具有5至19个碳原子的芳烷基，或具有4至10个碳原子的芳基，其中的芳烷基和芳基可以带有一个或多个选自下列基团的取代基卤素原子，具有1至7个碳原子的烷基(优选1至4个碳原子)具有1至7个碳原子的烷氧基(优选1至4个碳原子)，具有1至7个碳原子的卤代烷基(优选1至4个碳原子)，和具有1至7个碳原子的卤代烷氧基(优选1至4个碳原子);每个R2和R3分别是氢原子、卤素原子、羟基，具有1至7个碳原子的烷基(优选1至4个碳原子)，具有1至7个碳原子的烷氧基(优选1至4个碳原子)，具有1至7个碳原子的卤代烷基(优选1至4个碳原子)，具有1至7个碳原子的卤代烷氧基(优选1至4个碳原子)，具有5至19个碳原子的芳烷基，或具有4至10个碳原子的芳基;X1是氧原子、硫原子、亚甲基、或羰基，Q9和Q10分别是氢原子，具有1至7个碳原子的烷基(优选1至4个碳原子)，具有1至7个碳原子的烷氧基(优选1至4个碳原子)，具有1至7个碳原子的卤代烷基(优选1至4个碳原子)，具有5至19个碳原子的芳烷基，具有4至10个碳原子的芳基、烯丙基、或-NQ7Q8基团，其中的每个Q7和Q8定义同上;
Q3是氢原子，具有1至7个碳原子的烷基(优选1至4个碳原子)，具有1至7个碳原子的卤代烷基(优选1至4个碳原子)，具有5至19个碳原子的芳烷基，具有1至10个碳原子的酰基;具有4至10个碳原子的芳基，或烯丙基;
Q5是氢原子、卤素原子，具有1至7个碳原子的烷基(优选1至4个碳原子)，具有1至7个碳原子的卤代烷基(优选1至4个碳原子)，具有5至19个碳原子的芳烷基，具有4至10个碳原子的芳基，或烯丙基;
Q6是氢原子、卤素原子、硫基或硒基，其中硫基和硒基可带有一个选自下列基团的取代基具有1至7个碳原子的烷基(优选1至4个碳原子)，具有1至7个碳原子的卤代烷基(优选1至4个碳原子)，具有5至19个碳原子的芳烷基，具有4至10个碳原子的芳基，或烯丙基;
每个Y1和Y2分别是氧原子或硫原子。
具有至少两个氮原子的稠合环类型的“A”的优选实例是下列式(7-1)至(7-13)的基团

其中的每个Q1、Q3、Y1和Y2具有同上文相同的含义，Q2具有同Q1相同的含义，Q4具有同Q3相同的含义，Y3是氢原子、卤素原子、或羟基。
卤素原子优选是氟、氯，或溴，说明书下文中出现的“Z”代表的卤素原子除外。
具有1至7个碳原子的烷基(优选1至4个碳原子)的优选实例包括甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、仲丁基和叔丁基。
具有1至7个碳原子的烷氧基(优选1至4个碳原子)的优选实例包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基，和正丁氧基。
具有1至7个碳原子的卤代烷基(优选1至4个碳原子)的优选实例包括三氟甲基和2，2，2-三氟乙基。
具有1至7个碳原子的卤代烷氧基(优选1至4个碳原子)的优选实例包括三氟甲氧基和2，2，2-三氟乙氧基。
具有2至15个碳原子的烷氧基烷基(优选2至8个碳原子)的优选实例包括甲氧基甲基，乙氧基甲基、甲氧基乙基和甲氧基丁基。
具有5至19个碳原子的芳烷基的优选实例是具有7至19个碳原子和芳香烃环如苯基或萘基的芳烷基，和具有5至19个碳原子和杂环如2-呋喃基、噻吩基或吡啶基的芳烷基。特别优选的是苄基、苯乙基、三苯甲基、糠基和噻吩甲基。
具有5至19个碳原子的芳烷氧基的优选实例是具有7至19个碳原子和芳香烃环的芳烷氧基，和具有5至19个碳原子和杂环的芳烷氧基。特别优选的是苄氧基、苯基乙氧基、三苯甲氧基、糠基氧基和噻吩甲氧基。
具有3至7个碳原子的环烷基的优选实例包括环丙基和环己基。
具有3至7个碳原子的环烷氧基的优选实例包括环丙氧基和环己氧基。
具有4至10个碳原子的芳基的优选实例是具有6至10个碳原子的芳香烃基和具有4至10个碳原子的芳香杂环基。特别优选的是苯基、萘基、2-呋喃基、噻吩基和吡啶基。
具有4至10个碳原子的芳氧基的优选实例是具有6至10个碳原子的芳香烃基的芳氧基和具有4至10个碳原子的芳香杂环基的芳氧基。特别优选的是苯氧基、萘氧基、甲苯氧基、2-呋喃氧基和噻吩氧基。
具有1至10个碳原子的酰基的优选实例包括甲酰基、乙酰基、丙酰基、苯甲酰基和甲氧基苯甲酰基。
如果具有4至6个碳原子(优选4或5)和1或2个选自氧、氮和硫的杂原子的环烷氧基有一个氮原子作为其环原子，那么该氮原子可带有一个具有1至7个碳原子(优选1至4个碳原子)的烷基或一个具有5至19个碳原子(优选5至7个碳原子)的芳烷基作为取代基。
式(1-1)和(1-2)的“A”的特别优选的基团包括下列式(8-1)至(8-27)表示的基团


式(1-1)和(1-2)中的“B”优选是氢、甲氧基、乙氧基、苯氧基、三氟甲氧基、芳烷氧基(例如苄氧基)，卤素(例如氟、氯、和溴)，叠氮基，或下列式(9-1)至(9-6)之一 带有一个或多个取代基(R1和R4所列基团)的5至19个碳原子的芳烷基和4至10个碳原子的芳基的特别优选的实例包括3，4-二甲氧基苯乙基、4-甲氧基苯基、甲苯基、3-氯苯基、3，4，5-三甲氧基苯基和4-溴呋喃基。
式(1-1)和(1-2)中的用下列式(10-1)和(10-2)表示的基团
式(1-1)或(1-2)的核苷衍生物的药学上可接受的盐是由核苷与无机或有机酸或碱制备的。酸加成盐的例子包括氢氯化物、硫酸盐、乙酸盐、酒石酸盐、富马酸盐、甲磺酸盐和甲苯磺酸盐。碱加成盐的例子包括钠盐和钾盐。
下面描述制备本发明核苷衍生物及其药学上可接受的盐的方法。
其中的R1和R4相同，R2和R5相同，及R3和R6相同的式(1-1)或(1-2)的核苷衍生物及其药学上可接受的盐，即式(4-1)或(4-2)的核苷衍生物。

与式(3)的化合物进行缩合反应来制备 其中每个R1、R2、R3和X1定义如本文中所述，Z是卤素原子或磺酰氧基。
如果必要，可将连接在式(4-1)或(4-2)中的“A”基团上的保护基团除去，或用其它保护基团置换。
式(3)中，Z表示的卤素原子优选是氯、溴或碘。磺酰氧基优选的甲磺酰氧基，对甲苯磺酰氧基，或三氟甲磺酰氧基。
在反应中，式(2-1)或(2-2)的核苷衍生物[下文称作化合物(2)]与式(3)化合物[下文称作化合物(3)]最好是按每当量化合物(2)使用大约1至20当量(优选2至10当量)的化合物(3)的比例使用。
化合物(2)与化合物(3)的反应可在有机溶剂中，在有碱或无碱的存在下进行。在使用碱的情况下，碱最好是碳酸钾、氢化锂、氢化钠、吡啶或三乙胺。每一当量化合物(3)可以使用不多于2当量，优选0.5至1.5当量，更优选0.8至1.2当量的碱。
关于反应溶剂没有特殊的限制，只要该溶剂对反应呈惰性。优选使用乙醚、苯、氯仿、丙酮、N，N-二甲基甲酰胺(DMF)、二甲亚砜(DMSO)、1，3-二甲基-2-咪唑啉、六甲基磷酰胺(HMPA)和吡啶。反应可在0℃至所用溶剂的回流温度的温度范围内进行，优选从室温至170℃。加入或去除保护基团的反应，以及形成核苷衍生物的药学上可接受的盐的反应可按已知方法进行。化合物(2)和化合物(3)是已知化合物。或者可从已知化合物用已知方法制备。
式(1-1)或(1-2)的核苷衍生物也可以用下列的方法(A)、(B)、(C)、(D-1)和(D-2)中的一种方法制备。
方法(A)下列式(12-1)和(12-2)之一的核苷衍生物 其中每个A、B、R1、R2、R3和X1定义同式(1-1)和(1-2)，在缩合条件下，与式(13)化合物进行反应。
其中每个R4、R5、R6和X2定义同式(1-1)和(1-2)，Z定义同式(3)。
该反应中，式(12-1)或(12-2)的核苷衍生物[下文称作化合物(12)]和式(13)的化合物[下文称作化合物(13)]最好按照每一当量的化合物(12)使用大约0.5至10当量(优选1至5当量)的化合物(13)的比例使用。
制备式(4-1)或(4-2)的核苷衍生物的方法的反应中所述的其它条件可用于方法(A)的反应。
下列式(14-1)和(14-2)之一的核苷衍生物 其中每个A、B、R4、R5、R6和X2定义同式(1-1)和(1-2)，在缩合条件下与上文提到的式(3)化合物进行反应。
该反应中，式(14-1)或(14-2)的核苷衍生物[下文称作化合物(14)]和式(3)的化合物[化合物(3)]最好按照每一当量的化合物(14)使用大约0.5至10当量(优选1至5当量)的化合物(3)的比例使用。
制备式(4-1)或(4-2)的核苷衍生物的方法的反应中所述的其它条件可用于方法(B)的反应中。
方法(C)下列式(15-1)和(15-2)之一的核苷衍生物 其中每个B、R1、R2、R3、R4、R5、R6、X1和X2定义同式(1-1)和(1-2)，Z定义同式(3)或表示乙酰氧基，在缩合条件下与式(16-1)、(16-2)和(16-3)的化合物进行反应A-H A-M A-Si(CH3)3(16-1) (16-2) (16-3)其中A定义同式(1-1)和(1-2)，M是一价金属，优选Na、K、Ag、Hg和HgCl。
该反应中，式(15-1)或(15-2)的核苷衍生物[下文称为化合物(15)]和式(16-1)、(16-2)或(16-3)的化合物[下文称为化合物(16)]最好按照每一当量的化合物(15)使用大约1至20当量(优选1至10当量)的化合物(16)的比例使用。
例如，具有卤素原子作为“Z”的化合物(15)与式(16-1)化合物之间的反应可在硝基甲烷中，在有氰化汞存在下进行。参考J.Org.Chem.，30，149(1965)。
具有卤素原子作为“Z”化合物(15)与式(16-2)化合物之间的反应可在惰性溶剂(例如苯、甲苯、二甲苯、乙腈或二氯甲烷)中进行，参考J.Am.Chem.Soc.，78，2117(1956)。
具有卤素原子作为“Z”的化合物(15)与式(16-3)化合物之间的反应可按照J.Org.Chem.，34，431(1969)中描述的方式进行。
具有乙酰氧基作为“Z”的化合物(15)与式(16-1)化合物之间的反应可在1，2-二氯乙烷中，在有氯化锡(Ⅳ)或氯化铝的存在下进行。参考J.Org.Chem.，39，3654，3660，3664，3668(1974)。该反应也可在130-195℃减压下，在有Lewis酸或无Lewis酸存在下进行。参考Bull.Chem.Soc.Japan.，46，556，3858(1973)。
方法(D-1)下列式(17-1)和(17-2)之一的核苷衍生物 其中每个A、R1、R2、R3、R4、R5、R6、X1和X2定义同式(1-1)和(1-2)，与上述带有离去基团“Z”的烷基、芳基、卤代烷基或环烷基化合物进行反应给出其中的B是烷氧基、芳氧基、卤代烷氧基或环烷氧基的式(1-1)或(1-2)的核苷衍生物。
方法(D-2)
式(17-1)和(17-2)的核苷衍生物(称作化合物(17))和具有1个或2个氧、氮或硫原子作为环原子的环烯基化合物进行加成反应，给出其中的B是具有4至6碳原子和1或2个氧、氮或硫原子作为环原子的环烷氧基的式(1-1)或(1-2)的核苷衍生物。
方法(E)下列式(18-1)和(18-2)之一的核苷衍生物 其中每个A、R1、R2、R3、R4、R5、R6、X1和X2定义同式(1-1)和(1-2)，Z定义同式(3)，与适当的叠氮化试剂(例如叠氮化锂)或氟化剂(例如氟化四烷基铵如氟化四丁基铵)进行反应，给出其中的B是叠氮基或氟原子的式(1-1)或(1-2)的核苷衍生物。
上述反应中使用的起始物在下列文献中描述例如J.Am.Chem.Soc.，106(16)1984，P4552，Nucleoic Acids Research，17(20)1989，P8135，Nucleosides & Nucleotides，11(7)1992，P1333.Biochemistry，30(40)，P9735，Biochemistry，30(16)，P4001，Tetrahedron Lett.，22(45)，P4537，等等。
通过下列HIV生长抑制试验测定本发明的核苷衍生物对HIV的生长抑制作用。
1.培养制备其中悬浮有1.2×105个细胞的溶液将2.0×105个H9细胞(从人体T淋巴细胞中产生)在介质中培养24小时，离心培养介质，将1.0×106个细胞悬浮30分钟，然后稀释悬浮的细胞。
将试验化合物按不同的浓度溶于DMSO(二甲基亚砜)中，并取每种溶液12.5μl置于24-穴平皿的每个穴孔中。
在每个装有试验化合物的穴中加入2，000μl1.2×105细胞悬浮液。盖上培养皿并剧烈振荡以混合悬浮液，然后将培养皿在37℃下放置1小时。接着将50μl可保藏的高滴度HIV溶液置于每个穴中，并用1ml吸移管将穴中的成份混匀。将穴中的混合物在37℃5%CO2气氛下培养。在培养的第4天上，将培养混合物分成两部分。一部分在培养的第7天上用MTT法测定存活的细胞。从另一部分混合物中取出1000μl的样品与同样体积的新鲜介质混合。然后用所得混合物继续培养至7天，然后进行RT测定。
作为阳性对照化合物，将叠氮胸苷(AZT)溶于DMSO并稀释，给出具有与上述试验所用化合物相同浓度的试验溶液。进一步地，对DMSO，H9细胞悬浮液，和含有Hg细胞和HIV的悬浮液进行试验作为对照。
2.测定存活细胞的MTT试验在培养的第7天，从分出的培养混合物之一中取每种样品100μl，置于一个新的96穴培养皿中，向穴中的培养混合物中加入20μl(2.5mg/ml PBS)的MTT[3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-2，5-二苯基四唑鎓溴化物]-磷酸缓冲剂(Sigma，No.M-2128)并将生成的混合物于37℃培养4小时。向培养混合物中加入100μl异丙醇/0.04N-HCl，并用常规吸移手段混合。1小时内于570nm处测定吸光度(文献于630nm)。
用MTT数据制作标准曲线，计算每个样品中的细胞数。进一步用下列式子计算出存活细胞比(%)存活细胞比(%)＝[样品部分中的细胞数/H9(+HIV)部分中的细胞数]×1003.RT(逆转录酶)试验用已知方法进行该试验，用下列式子计算出病毒生长率(%)病毒生长率(%)＝[样品部分的放射性/H9(+HIV)部分的放射性]×100参考Poiesz，B.J.等，Proc，Natl.Acad.Sci.U.S.A.77，7415-7419(1980)。
按照上述HIV生长抑制试验，用实施例2中得到的2-O-四氢吡喃基-3′，5′-O-二(9-苯基占吨基)-腺苷以不同的浓度进行MTT试验和RT试验。从试验中得到的存活细胞比(%)和病毒生长率(%)列于表1中。
表1试验化合物的浓度(mg/ml) 存活细胞比(%) 病毒生长率(%)200 109 1720 116 172 117 260.2 97 840 100 100从上述数据明显地看到本发明的核苷衍生物具有高的病毒生长抑制活性，并显示了高的存活细胞比。
因此，该核苷衍生物能有效地治疗或预防逆病毒，特别是HIV引起的疾病。
通过下列试验进一步测定本发明的核苷衍生物对水痘带状疱疹病毒(VZV)的抗病毒活性和细胞毒性。
1.细胞人体胚胎的肺纤维细胞(HEL细胞、ATCC CCL-137)培养将细胞在最少量的添加有10%去活化的牛胎儿血清，1%L-谷氨酰胺和0.3%碳酸氢钠的基本培养基(MEM，Gibco)中培养。
2.病毒水痘-带状疱疹病毒(VZV)株(a)胸苷激酶阳性(TK+)株OKA & YS(b)胸苷激酶缺乏(TK-)株YS/R & 07/13.抗病毒活性试验以20噬菌斑形成单位(PEU)的输入量将病毒接种到于96-穴微量滴度培养皿中培养着的细胞上。将培养细胞在37℃培育2小时，接着除去剩余的病毒;培育的细胞再一次在MEM培养基中培养，一式两份，培养基中加有试验化合物，10%去活化的牛胎儿血清，1%L-谷氨酰胺和0.3%碳酸氢钠。培养5天后，微量滴度培养皿用乙醇固定，用Giekmsa染色方法染色，显微镜下观察测定形成的噬菌斑数目。结果用IC50(即病毒的噬菌斑形成被抑制50%时的浓度)表示。
4.细胞毒性的试验将3×103细胞/穴的HEL细胞接种到96穴微量滴度培养皿中，使其在含有10%去活化牛胎儿血清的MEM培养基中，于37℃繁殖24小时。接着将培养基换成含有不同浓度试验化合物的MEM培养基，然后继续再培育3天。当单层细胞生长至70%时，用库尔特氏(Coulter)计数器计细胞的数目。细胞毒性用CC50(即细胞生长被抑制成50%的浓度)表示。
用实施例2得到的2′-O-四氢吡喃基-3′，5′-O-二(9-苯基占吨基)-腺苷进行测定抗病毒活性和细胞毒性的试验。试验中得到的IC50和CC50列于表2。
表2试验化合物抗病毒活性IC50(μg/ml) 细胞毒性CC50TK+VZV TK-VZV (μg/ml)OKA株 Ys株 07/1株 Ys/R株实施例2的产物 2 1 0.8 2 >50从上述数据明显地看到本发明的核苷衍生物对TK+VZV及TK-VZV具有高的抗病毒活性，同时显示了高的CC50值。
因此，该核苷衍生物能有效地治疗或预防VZV引起的感染疾病。
根据本发明的式(1-1)和(1-2)的核苷衍生物及其药学上可接受的盐可以以口服形式或肠胃外途径给病人用药，治疗因逆病毒如HIV引起的疾病或因水痘-带状疱疹病毒(VZV)引起的疱疹，等等。也可以使用局部用药和直肠用药。剂量通常是大约0.2mg/Kg/天至200mg/Kg/天。用药可一天一次或多次。剂量可以根据病人的年龄，体重和其它情况或增加或减少。
可以采用多种药剂形式。例如，可以使用片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊、栓剂、锭剂、糖浆、乳剂、软明胶胶囊、乳膏、凝胶、糊剂、喷雾剂和可注射制剂。在这些制剂中可以使用载体、赋形剂和其它已知的添加剂。作为载体，可提及的固体载体有例如乳糖、高岭土、蔗糖、结晶纤维素、淀粉、滑石、琼脂、果胶、硬脂酸镁和卵磷脂。也可以使用液体载体例如甘油、聚乙烯吡咯烷酮、橄榄油、乙醇、苯甲醇、丙二醇和水。
下列实施例说明了制备本发明核苷衍生物的典型合成方法。
参考实施例1(1)3′，5′-O-(1，1，3，3-四异丙基二硅氧烷-1，3-二基)腺苷将腺苷(4.61g，17.3mmol)与无水吡啶一起进行共沸蒸馏。向剩余物中加入无水吡啶(43ml)和1，1，3，3-四异丙基-1，3-二氯二硅氧烷(5.70ml，1.72mmol)，生成的混合物在室温下搅拌5小时。然后，向混合物中加入二氯甲烷(30ml)和吡啶与水的混合物(1∶1.vol/vol，20ml)。有机层用二氯甲烷萃取三次(30ml×3)。将萃取物合并，并在减压下放置去除溶剂。向剩余物中加入甲苯，将所得溶液进行共沸蒸馏，除去吡啶。将剩余溶液置于硅胶柱中，用0.5%吡啶-甲醇/二氯甲烷(1/50)洗脱，得到目的化合物(8.30g，94%)。
(2)2′-O-四氢吡喃基-3′，5′-O-(1，1，3，3-四异丙基二硅氧烷-1，3-二基)腺苷将3′，5′-O-(1，1，3，3-四异丙基二硅氧烷-1，3-二基)腺苷(8.30g，16.29mmol)溶于二氯甲烷(65ml)中，向所得溶液中加入二氢吡喃(31.5ml，0.33mol)。然后逐渐滴加TFA(三氟乙酸，1.88ml，32.58mmol)。将所得混合物放置1天，然后向混合物中加入吡啶以终止混合物中进行的反应。接着将混合物置于减压下以除去溶剂和TFA，然后用二氯甲烷-水萃取。分出有机层，浓缩，置于硅胶柱上，用0.5%吡啶-甲醇/二氯甲烷(1/100)洗脱得到目的化合物(8.80g，91%)。
(3)2′-O-四氢吡喃基-N6-(N，N-二甲基氨基亚甲基)腺苷令2′-O-四氢吡喃基-3′，5′-O-(1，1，3，3-四异丙基二硅氧烷-1，3-二基)腺苷(2.97g，5mmol)与无水吡啶一起进行共沸蒸馏以脱去水。然后将脱了水的产物溶于DMF(16ml)。向该溶液中加入大量过量的N，N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛(9.97ml，75mmol)，并将所得混合物在室温下搅拌20小时。反应完成后，蒸出溶剂，剩余物溶于二氯甲烷中，用水充分洗涤，并用无水硫酸镁干燥。然后蒸除溶剂，剩余物溶于乙腈(50ml)中。向所得溶液中加入氟化钾(1.74g，30mmol)，溴化四乙铵(6.30g，30mmol)，和水(0.5ml，30mmol)。混合物在50℃下搅拌1小时。反应完全后，将混合物冷却至室温，除去不溶性物。然后蒸出溶剂，将剩余物溶于二氯甲烷，将少量吡啶加入二氯甲烷溶液中，并用水洗涤该溶液。用二氯甲烷萃取水层5次，将有机萃取物合并，用无水硫酸镁干燥。蒸除溶剂，剩余物用硅胶柱色谱提纯，甲醇/二氯甲烷(1/50)洗脱，得到目的化合物(2.01g，99%)。
1H NMR(CDCl3)δppm1.20-1.85(m，6H)，3.17(d，J＝4.0Hz，6H)，5.67(dd，J＝7.0Hz，3.0Hz，1H)，7.77(s，1H)，8.37(s，1H)，8.80(s，1H)。
参考实施例2(1)2′-O-四氢吡喃基-3′，5′-O-(1，1，3，3-四异丙基二硅氧烷-1，3-二基)-N6-苯甲酰基腺苷将按照参考实施例1-(2)同样方法制备的2′-O-四氢吡喃基-3′，5′-O-(1，1，3，3-四异丙基二硅氧烷-1，3-二基)腺苷(2.47g，4.16mmol)与无水吡啶一起进行共沸蒸馏。向剩余物中加入无水吡啶(12ml)，并将混合物进行充分搅拌。向混合物中加入苯甲酰氯(0.73ml，6.24mmol)将所得混合物置于室温下进行反应。3小时后，向反应混合物中加入冰以终止反应。反应混合物用二氯甲烷和10%NaHCO3水溶液的混合物萃取。分出有机层，浓缩，然后与甲苯一起进行共沸蒸馏以除去吡啶。将剩余物置于硅胶柱中，用0.5%吡啶-CH2Cl2洗脱，得到目的化合物(2.44g，84%)。
元素分析C34H51N5O7Si2·H2O计算值(%)C，57.04;H，7.46;N，9.78实验值(%)C，56.80;H，7.58;N，9.13。
(2)2′-O-四氢吡喃基-N6-苯甲酰基腺苷将2′-O-四氢吡喃基-3′，5′-O-(1，1，3，3-四异丙基二硅氧烷-1，3-二基)-N6-苯甲酰基腺苷(1.86g，2.67mmol)溶于乙腈(53ml)中。向所得溶液中加入溴化四乙铵(3.37g，16.0mmol)，氟化钾(0.90g，16.0mmol)和水(0.8ml)。然后将混合物在50℃下温热5小时以进行反应。将反应混合物过滤除去生成的盐。滤液置于减压下蒸除溶剂，将剩余物置于硅胶柱中，用0.5%吡啶和2%甲醇-CH2Cl2洗脱，得到目的化合物(1.19g，98%)。
元素分析C22H25N5O6
计算值(%)C，58.02;H，5.53;N，15.38实验值(%)C，57.65;H，5.49;N，15.52实施例12′-O-四氢吡喃基-3′，5′-O-二(9-苯基占吨基)-N6-(N，N-二甲基氨基亚甲基)腺苷将2′-O-四氢吡喃基-N6-(N，N-二甲氨基亚甲基)腺苷(3.66g，9mmol)与无水吡啶一起进行几次共沸蒸馏。然后将剩余物溶于无水吡啶(90ml)中。向该溶液中加入9-苯基占吨基氯化物(6.6g，22.5mmol)，并将所得混合物在室温下搅拌12小时。反应完全后，向反应混合物中加入少量水以终止反应。然后蒸除溶剂，将剩余物溶于二氯甲烷中，用三份5%的碳酸氢钠水溶液洗涤，并用无水硫酸镁干燥。然后蒸除溶剂，剩余物用硅胶柱色谱提纯，0.5%三乙胺-二氯甲烷/正己烷(6/4)洗脱，得到目的化合物，是一油状物(5.31g，64%)MS(FAB)919[M+1]1H NMR(CDCl3)δppm1.15-1.69(m，6H);3.14(d，J＝6.0Hz，6H)，6.18(d，J＝6.0Hz，1H)，6.55-7.45(m，26H)，7.80(s，1H)，8.28(s，1H)，8.70(s，1H)。
实施例22′-O-四氢吡喃基-3′，5′-O-二(9-苯基占吨基)腺苷将2′-O-四氢吡喃基-3′，5′-O-二(9-苯基占吨基)-N6-(N，N-二甲氨基亚甲基)腺苷(5.31g，5.8mmol)溶于吡啶(100ml)。向所得溶液中加入浓氨水(60ml)，并将所得混合物在室温下搅拌5小时。反应完全后，蒸除溶剂，将剩余物溶于二氯甲烷，用水洗涤，并用无水硫酸镁干燥。然后蒸除溶剂，剩余物用硅胶柱色谱提纯，0.5%三乙胺-二氯甲烷/正己烷(7/3)洗脱，得到目的化合物(4.77g，96%)。
MS(FAB)864[M+1]1H NMR(CDCl3)δppm1.05-1.72(m，6H);5.71-5.95(m，1H)，6.02-6.26(m，2H)，6.55-7.50(m，20H)，7.70(s，1H)，8.10(s，1H)。
实施例32′-O-四氢吡喃基-3′，5′-O-二[9-(4-甲氧基苯基)占吨基]-N6-(N，N-二甲基氨基亚甲基)腺苷将2′-O-四氢吡喃基-N6-(N，N-二甲氨基亚甲基)腺苷(1.66g，4.01mmol)与无水吡啶一起进行共沸蒸馏。然后将剩余物溶于无水吡啶(40ml)。向该溶液中加入9-(4-甲氧基苯基)呫吨基氯化物(3.95g，12mmol)，并将所得混合物在室温下搅拌12小时。反应完全后，向反应混合物中加入少量水以终止反应。然后蒸除溶剂，剩余物溶于二氯甲烷中，用3份5%的碳酸氢钠水溶液洗涤，并用无水硫酸镁干燥。然后蒸除溶剂，剩余物用硅胶柱色谱提纯，1%三乙胺-二氯甲烷/正己烷(7/3)洗脱，得到目的化合物(3.1g，80%)。
1H NMR(CDCl3)δppm1.00-1.80(m，6H);3.15(d，J＝4.2Hz，6H)，3.70(d，J＝4.2Hz，6H)，6.18(d，J＝6.0Hz，1H)，6.50-7.45(m，12H)，7.86(s，1H)，8.33(s，1H)，8.75(s，1H)。
实施例42′-O-四氢吡喃基-3′，5′-O-二[9-(4-甲氧基苯基)占吨基]腺苷将2′-O-四氢吡喃基-3′，5′-O-二[9-(4-甲氧基苯基)占吨基]-N6-(N，N-二甲氨基亚甲基)腺苷(3.03g，3.1mmol)溶于吡啶(100ml)。向所得溶液中加入浓氨水(60ml)，并将混合物在室温下搅拌16小时。反应完全后，蒸除溶剂，将剩余物溶于二氯甲烷，用水洗涤，无水硫酸镁干燥。然后蒸除溶剂，剩余物用硅胶柱色谱提纯，1%三乙胺-二氯甲烷/正己烷(8/2)洗脱，得到目的化合物(2.85g，定量)。
实施例52′-O-四氢吡喃基-3′，5′-O-二[9-(4-甲氧基苯基)占吨基]-N3-(4-甲氧基苯甲酰基)尿苷将2′-O-四氢吡喃基-N3-(4-甲氧基苯甲酰基)尿苷(3.36g，7.3mmol)与无水吡啶一起进行共沸蒸馏。然后将剩余物溶于无水吡啶(70ml)。向该溶液中加入过量的9-(4-甲氧基苯基)占吨基氯化物，并将所得混合物搅拌4小时。反应完全后，向反应混合物中加入少量水以终止反应。然后蒸除溶剂，将剩余物溶于二氯甲烷，用三份5%的碳酸氢钠水溶液洗涤，并用无水硫酸镁干燥。然后蒸除溶剂，剩余物用硅胶柱色谱提纯，1%三乙胺-二氯甲烷/正己烷(7/3)洗脱，得到目的化合物。
实施例62′-O-四氢吡喃基-3′，5′-O-二[9-苯基占吨基]-N6-苯甲酰基腺苷将2′-O-四氢吡喃基-N6-苯甲酰基腺苷(2.91g，6.41mmol)与无水吡啶一起进行共沸蒸馏。然后将剩余物溶于无水吡啶(100ml)。向该溶液中加入过量的9-苯基占吨基氯化物，并将所得混合物搅拌4小时。反应完全后，向反应混合物中加入少量水以终止反应。然后蒸除溶剂，将剩余物溶于二氯甲烷，用3份5%的碳酸氢钠水溶液洗涤，并用无水硫酸镁干燥。然后蒸除溶剂，剩余物用硅胶柱色谱提纯，0.5%三乙胺-二氯甲烷/正己烷(6/4)-二氯甲烷/甲醇(50/1)洗脱，得到目的化合物。
制剂实施例1片剂将下述成份在一含水聚乙烯吡咯烷酮溶液中粒化，向颗粒中加入硬脂酸镁并压成片状。
(1)核苷衍生物 250mg/片(2)乳糖B.P. 120(3)聚乙烯吡咯烷酮B.P. 15(4)甘醇酸酯化淀粉钠 20(5)硬脂酸镁 5总量500mg/片制剂实施例2胶囊将下述成份混合，并装入硬明胶胶囊中，得到胶囊剂。
(1)核苷衍生物 250mg/胶囊(2)乳糖B.P. 143(3)甘醇酸酯化淀粉钠 25(4)硬脂酸镁 2总量420mg/胶囊制剂实施例3肠胃外给药溶液(1)核苷衍生物 0.20g(2)苯甲醇 0.10(3)甘糠醛(Glycofurol) 1.45(4)注射用水稀释至3.00ml。
依次将核苷衍生物和苯甲醇溶于甘糠醛(Glycofurol)中，向该溶液中加水调整体积至3.00ml。所得溶液用消了毒的微孔滤器过滤，并密封在消了毒的棕色瓶中。
权利要求
1.式(1-1)或(1-2)的核苷衍生物或其药学上可接受的盐。 其中A是通过其氮原子连接的含氮杂环；B是氢原子、卤素原子、叠氮基、C1-7烷基、C5-19芳烷基、C2-15烷氧基烷基、C1-7烷氧基、C1-7卤代烷氧基、C5-19芳烷氧基、C4-10芳氧基、C3-7环烷氧基、或具有4至6个碳原子和1或2个选自氧、氮和硫的杂原子的环烷氧基；每个R1和R4分别是氢原子、C1-7烷基、C3-7环烷基、C5-19芳烷基、或C4-10芳基，其中的每个芳烷基和芳基可以带有1或多个选自卤素原子、C1-7烷基、C1-7烷氧基、C1-7卤代烷基、C2-15烷氧基烷基和C1-7卤代烷氧基的取代基；每个R2、R3、R5和R6分别是氢原子、卤素原子、羟基、C1-7烷基、C1-7烷氧基、C1-7卤代烷基、C2-15烷氧基烷基、C1-7卤代烷氧基、C5-19芳烷基或C4-10芳基；X1和X2分别是氧原子、硫原子、亚甲基或羰基。
2.根据权利要求1的核苷衍生物或其药学上可接受的盐，其中式(1-1)和(1-2)中的R4、R5和R6分别与式(1-1)和(1-2)中的R1、R2和R3相同。
3.根据权利要求1的核苷衍生物或其药学上可接受的盐，其中式(1-1)和(1-2)中的A是下列式(5-1)至(5-4)之一的基团 其中Q1是氢原子、卤素原子、-NQ7Q8基团，-N＝CQ8Q10基团，或-OQ7基团，其中的每个Q7和Q8分别是氢原子、C1-7烷基、C1-7卤代烷基、C5-19芳烷基、C4-10芳基、C1-10酰基、烯丙基，式(6)的基团 其中的R1是氢原子、C1-7烷基、C3-7环烷基、C5-19芳烷基，或C4-10芳基，其中的芳烷基和芳基可以带有1或多个选自卤素原子、C1-7烷基、C1-7烷氧基、C1-7卤代烷基和C1-7卤代烷氧基的取代基;每个R2和R3分别是氢原子、卤素原子、羟基、C1-7烷基、C1-7烷氧基、C1-7卤代烷基、C1-7卤代烷氧基、C5-19芳烷基，或C4-10芳基;X1是氧原子、硫原子、亚甲基，或羰基，Q9和Q10分别是氢原子、C1-7烷基、C1-7烷氧基、C1-7卤代烷基、C5-19芳烷基、C4-10芳基、烯丙基，或-NQ7Q8基团，其中的每个Q7和Q8定义如上;Q3是氢原子、C1-7烷基、C1-7卤代烷基、C5-19芳烷基、C1-10酰基、C4-10芳基，或烯丙基;Q5是氢原子，卤素原子、C1-7烷基、C1-7卤代烷基、C5-19芳烷基、C4-10芳基，或烯丙基;Q6是氢原子、卤素原子硫基，或硒基，其中的硫基和硒基可带有一个选自C1-7烷基、C1-7卤代烷基、C5-19芳烷基、C4-10芳基，或烯丙基的取代基;每个Y1和Y2分别是氧原子或硫原子。
4.根据权利要求1的核苷衍生物或其药学上可接受的盐，其中式(1-1)和(1-2)中的A是下列式(7-1)至(7-13)之一的基团 其中每个Q1，Q3，Y1和Y2定义如权利要求3，Q2定义如Q1，Q4定义如Q3，Y3是氢原子，卤素原子，或羟基。
5.根据权利要求1的核苷衍生物或其药学上可接受的盐，其中式(1-1)和(1-2)中的A是下列式(8-1)至(8-27)之一的基团
6.根据权利要求1的核苷衍生物或其药学上可接受的盐，其中式(1-1)和(1-2)中的B是氢、甲氧基，乙氧基，苯氧基，三氟甲氧基，苄氧基，氟，氯，溴，叠氮基，或下列式(9-1)至(9-6)之一
7.根据权利要求1的核苷衍生物或其药学上可接受的盐，其中式(1-1)和(1-2)中的每个式(10-1)和(10-2)基团 是下列基团之一
8.制备如权利要求1定义的，其中的R1和R4相同，R2和R5相同，R3和R6相同的核苷衍生物的方法，其包括使式(2-1)或(2-2)的核苷衍生物 其中每个A和B定义如权利要求1，与式(3)化合物进行缩合反应 其中每个R1，R2，R3和X1定义如权利要求1，Z是卤素原子或磺酰氧基。
9.一种抗疱疹组合物，包括权利要求1定义的核苷衍生物或其药学上可接受的盐和药学上可接受的添加剂。
全文摘要
本发明公开了一种具有抗病毒活性，例如抗疱疹活性和抗HIV活性的新的核苷衍生物。该核苷衍生物具有式(1-1)或(1-2)的结构。其中A是通过其氮原子连接的含氮杂环；B是氢原子，卤素原子，叠氮基，烷基等等。
文档编号C07H19/16GK1101350SQ9410482
公开日1995年4月12日 申请日期1994年3月18日 优先权日1993年3月18日
发明者畑辻明, 石川正英, 真崎光夫, 松崎胜宽 申请人:日本化学医药株式会社