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胚胎玻璃化冷冻和解冻一体式操作皿的制作方法

时间:2022-02-10 阅读: 作者:专利查询

胚胎玻璃化冷冻和解冻一体式操作皿的制作方法

1.本实用新型属于胚胎玻璃化冻融技术领域,具体涉及一种胚胎玻璃化冷冻和解冻一体式操作皿。


背景技术:

2.研究已证实玻璃化冻融技术的应用可以提高胚胎种植率和临床妊娠率,并能有效预防卵巢过度刺激综合征的发生,因此该技术作为一种便捷有效的方法已经广泛应用于人类胚胎的冷冻保存。玻璃化冻融技术包括玻璃化冷冻和玻璃化解冻,目前使用较广泛的玻璃化冻融试剂是kitazato的玻璃化冷冻/解冻液,该试剂要求玻璃化冷冻时将胚胎依次移入室温(约25℃)下平衡过的不同浓度梯度冷冻液,最后装入载体迅速投入液氮保存;而玻璃化解冻时将胚胎从液氮取出后迅速放入37℃下平衡过的第一步解冻液,而后依次移入室温(约25℃)下平衡过的其他不同浓度梯度解冻液,最后移入培养液皿中用于移植。胚胎玻璃化冷冻及解冻需要使用到的耗材主要包括拉制的巴斯德吸管、冷冻载体和冷冻/解冻皿。
3.目前大多数人类辅助生殖中心实验室均未使用专用的玻璃化冷冻/解冻皿,因此冷冻和解冻时会有诸多不便,而且可能会影响胚胎的冻融效果:比如部分实验室使用3002培养皿,将冷冻液做成微滴状进行胚胎冷冻,由于微滴会随着时间延长逐渐塌陷,因此不便于提前准备冷冻液微滴,只能随用随做,即一边冷冻操作一边制作微滴,这大大增加了冷冻操作的繁琐性。而且,相同体积液体微滴的表面积体积比较大,而冷冻操作较长,会导致冷冻液渗透压产生较大改变,进而可能影响冻融效果;部分实验室则使用四孔皿,但由于四孔皿孔径较大,需要消耗较多的冷冻试剂,且孔较深,也给操作带来不便。解冻时,实验室需准备两个皿,第一个皿准备37℃的第一步解冻液,在37℃热台上操作,另一个皿准备25℃的后续不同浓度梯度解冻液,在室温下操作,因此解冻操作需要在不同温度热台和不同解冻皿之间切换,特别是当解冻多个患者的多个胚胎时,不仅增加工作量,降低工作效率,还会增加发生差错的风险;且解冻第一步使用3037培养皿,也需要消耗较多的冷冻试剂。
4.目前,市面上存在一款专用的玻璃化冷冻/解冻板,但其设计存在诸多不合理之处:(1)第一个解冻槽底部悬空不接触热台,无法保证该槽解冻液37℃的要求,影响解冻复苏效果;(2)槽过少,一个板不便于同时进行多管(3管以上)胚胎的冷冻或解冻,冷冻/解冻较多胚胎时,需准备多个冷冻/解冻板;(3)装胚平台在板的最右侧,冷冻装胚时须挪动板才能进入合适的装胚视野,增加操作时间,而解冻最后一步将胚胎转移至培养皿时需跨过装胚平台,操作距离过长;(4)没有较好的标记患者信息的位置,不便于患者信息的核对。综上所述,目前大多数人类辅助生殖中心实验室均未使用专用的玻璃化冷冻或解冻皿,而现有的玻璃化冷冻/解冻板又存在诸多不合理之处,从而不能很好的保证胚胎玻璃化冻融技术简便、高效、安全、稳定的实施。


技术实现要素:

5.本实用新型针对现有技术的不足,提供了一种集胚胎玻璃化冷冻和解冻于一体的
操作皿,该操作皿的方形通槽底部与皿底齐平接触热台,确保该槽解冻液37℃;一个操作皿可同时进行3管以上的胚胎的冷冻或解冻;解冻最后一步将胚胎转移至培养皿时无需跨过装胚平台、操作距离和操作时间短,设有用于标记患者信息的标记区,实用方便。
6.为了实现上述目的,本实用新型的技术方案如下:
7.一种胚胎玻璃化冷冻和解冻一体式操作皿,包括皿盘和与皿盘相匹配的皿盖;所述的皿盘底部平整;所述的皿盘的中间设有将皿盘分成左右两部分的隔断墙;位于隔断墙一侧的皿盘的表面上部设有横截面为倒梯形的方形通槽,表面下部设有用于标记患者信息的标记区;位于隔断墙另一侧的皿盘的表面上部均布圆槽,表面下部设有冷冻装胚槽;位于隔断墙另一侧的皿盘底部的三个侧面分别设有通风口。
8.作为进一步技术改进,所述的皿盘上边沿设有用于连接皿盖的卡槽。
9.作为进一步技术改进,所述的皿盘的长为5.0-7.0cm,宽为4.0-5.0cm,高为0.8-1.2cm。增加皿盘宽度,用以进一步解决现有的冷冻或解冻板整体过于狭长,皿盖不便于放置较多的待冷冻载体,且拿皿时的手握感欠缺的难题。
10.作为进一步技术改进,所述的通风口的长为3.0-4.0cm,高为0.25-0.5cm。
11.作为进一步技术改进,所述的卡槽的高为0.3-0.5cm,深0.1-0.3cm。
12.作为进一步技术改进,所述的方形通槽顶部开口的长为1.0-2.0cm,宽为1.5-2.5cm,方形通槽底部开口的长为0.5-0.8cm,宽为1.0-1.3cm。
13.作为进一步技术改进,所述的圆槽的直径为0.6-0.9cm,深为0.5-0.65cm。
14.作为进一步技术改进,所述的圆槽设有3排3列。
15.作为进一步技术改进,所述的皿盘的边角处采用圆弧过度。
16.本实用新型的使用方法:
17.胚胎冷冻前提前准备操作皿,圆槽内分别加入不同梯度的冷冻液,盖上皿盖置于室温下平衡30分钟以上。冷冻时,从培养皿取出胚胎并按时间顺序依次对应转移至各装有冷冻液的圆槽内,最后在圆槽下方的冷冻装胚槽上将胚胎装入载体并迅速投入液氮,完成胚胎玻璃化冷冻;
18.胚胎解冻前提前准备操作皿,倒梯形的方形通槽及圆槽内分别加入不同梯度的解冻液,盖上皿盖置于37℃中平衡30分钟以上。解冻时,从液氮中取出载体并迅速插入方形通槽中,而后按时间顺序依次转移至各装有解冻液的圆槽内,最后转移至胚胎培养皿,完成胚胎解冻操作。
19.与现有技术相比,本实用新型具有的有益效果如下:
20.1.本实用新型操作皿集胚胎冷冻和胚胎解冻于一体,操作皿既能进行胚胎冷冻也能进行胚胎解冻的功能,有效减少了工作人员的工作量和操作时间,同时也不易发生差错,提升胚胎冻融效率。
21.2.本实用新型操作皿的方形通槽底部与皿盘底部齐平接触热台,有效保证该槽解冻液满足37℃的要求,提升胚胎解冻的复苏效果。
22.3.本实用新型位于隔断墙另一侧的皿盘底部的三个侧面分别设有通风口,在37℃热台上解冻操作时确保圆槽解冻液室温的要求,无需切换热台。
23.4.本实用新型将装胚平台设置在圆槽的下侧,冷冻装胚时无须挪动操作皿就能进入合适的装胚视野,减少操作时间,解冻最后一步将胚胎转移至培养皿时无需跨过装胚平
台,操作距离短,减少差错发生的风险。
24.5.本实用新型采用宽度更大的操作皿,皿盖方便放置较多的待冷冻载体,圆槽可制成3排3列,可同时进行多管(3管以上)胚胎的冷冻或解冻,有效减低人员工作量,同时能设置用于标记患者信息的标记区,便于患者信息的核对。
附图说明
25.图1为本皿盘俯视结构示意图。
26.图2为皿盘b-b剖面结构示意图。
27.图3为皿盘a-a剖面结构示意图。
28.图4为皿盘仰视结构示意图。
29.图5为本皿盖俯视结构示意图。
30.图6为本皿盖半剖结构示意图。
31.图7为现有玻璃化冷冻/解冻板的俯视结构示意图。
32.图8为现有玻璃化冷冻/解冻板的半剖结构示意图。
33.其中,上述各图标记及其对应的部件名称如下:
34.1-皿盘,2-方形通槽,3-圆槽,4-冷冻装胚槽,5-标记区,6-通风口,7-皿盖,8-卡槽。
具体实施方式
35.为使本实用新型的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂,下面结合附图和具体实施方式对本实用新型作进一步详细的说明。
36.实施例:
37.如附图1-6所示,本实施例的一种胚胎玻璃化冷冻和解冻一体式操作皿,包括皿盘1和与皿盘1相匹配的皿盖7;其特征在于:所述的皿盘1底部平整;所述的皿盘1的中间设有将皿盘1分成左右两部分的隔断墙;位于隔断墙一侧的皿盘1的表面上部设有横截面为倒梯形的方形通槽2,表面下部设有用于标记患者信息的标记区5;位于隔断墙另一侧的皿盘1的表面上部均布圆槽3,表面下部设有冷冻装胚槽4;位于隔断墙另一侧的皿盘1底部的三个侧面分别设有通风口6。
38.所述的皿盘1上边沿设有用于连接皿盖7的卡槽8。
39.所述的皿盘1的长为6.0cm,宽为4.5cm,高为0.8cm。
40.所述的通风口6的长为3.5cm,高为0.4cm。
41.所述的卡槽8的高为0.3cm,深0.1cm。
42.所述的方形通槽2顶部开口的长为1.5cm,宽为2.0cm,方形通槽2底部开口长为0.6cm,宽为1.2cm。
43.所述的圆槽3的直径为0.7cm,深为0.6cm。
44.所述的圆槽3设有3排3列。
45.所述的皿盘1的边角处采用圆弧过度。
46.本实施例的使用方法:
47.胚胎冷冻前提前准备操作皿,该操作皿的皿盘采用3排3列布置的圆槽,右边每一
竖列圆槽依次加入冷冻液ⅰ(es液)、冷冻液ⅰ(es液)、冷冻液ⅱ(vs液),一列一次可冷冻2管胚胎,一个操作皿一次可同时冷冻6管胚胎,圆槽加完冷冻液后盖上皿盖置于室温下平衡30分钟以上。冷冻时,将胚胎用吸管从培养皿吸出并按时间依次转移至装有不同冷冻液的圆槽,最后在圆槽下方的冷冻装胚槽上将胚胎装入载体并迅速投入液氮,完成胚胎玻璃化冷冻。最后一步装有冷冻液的圆槽和冷冻装胚槽可置于同一显微视野下,胚胎装载时无需挪操作皿。
48.胚胎解冻前提前准备操作皿,方形通槽加入解冻液ⅰ(ts液),每一横排的圆槽依次加入后续解冻液ⅱ(ds液)、解冻ⅲ(ws1)、解冻液ⅳ(ws2),一排一次可解冻1管胚胎,一个操作皿一次可同时解冻3管胚胎,加完解冻液后盖上皿盖置于37℃饱和湿度恒温箱平衡30分钟以上。解冻时,从液氮中取出载体并迅速插入装有解冻液ⅰ(ts液)的方形通槽中,而后按时间用吸管将胚胎依次转移至装有不同解冻液的圆槽内,最后转移至胚胎培养皿,完成胚胎解冻操作。解冻时可一直在37℃热台上操作,无需切换热台,亦能有效保证第一步装有解冻液的方形通槽37℃和后续不同浓度梯度解冻液的圆槽室温(约25℃)。
49.本实施例一个操作皿可同时有序支持6管胚胎的冷冻或3管胚胎的解冻。
50.以上所述仅是本实用新型的具体实施方式,使本领域技术人员能够理解或实现本实用新型。对这些实施例的多种修改对本领域的技术人员来说将是显而易见的,本文中所定义的一般原理可以在不脱离本实用新型的精神或范围的情况下,在其它实施例中实现。因此,本实用新型将不会被限制于本文所示的这些实施例,而是要符合与本文所申请的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。