本发明提供了一种高效生产GDP‑岩藻糖的大肠杆菌生产菌株,属于基因工程、微生物代谢工程技术领域。
本发明以葡萄糖为底物,通过组合调控代谢通路中的磷酸甘露糖变位酶(ManB)、GDP‑甘露糖焦磷酸化酶(ManC)、GDP‑甘露糖4,6‑脱水酶(Gmd)和GDP‑岩藻糖合成酶(WcaG)的表达从而缓解GDP‑岩藻糖合成通路的代谢压力。
本发明还通过CRISPR/Cas9基因编辑系统敲除大肠杆菌中分解GDP‑岩藻糖的基因UDP‑葡萄糖脂质载体转移酶(WcaJ)以及加强代谢通路中的辅因子的再生进一步提高胞内GDP‑岩藻糖的积累。
沐万孟 张文立 万李 朱莺莺 李雯
江南大学
214000 江苏省无锡市滨湖区蠡湖大道1800号
本发明提供了一种高效生产GDP‑岩藻糖的大肠杆菌生产菌株,属于基因工程、微生物代谢工程技术领域。
本发明以葡萄糖为底物,通过组合调控代谢通路中的磷酸甘露糖变位酶(ManB)、GDP‑甘露糖焦磷酸化酶(ManC)、GDP‑甘露糖4,6‑脱水酶(Gmd)和GDP‑岩藻糖合成酶(WcaG)的表达从而缓解GDP‑岩藻糖合成通路的代谢压力。
本发明还通过CRISPR/Cas9基因编辑系统敲除大肠杆菌中分解GDP‑岩藻糖的基因UDP‑葡萄糖脂质载体转移酶(WcaJ)以及加强代谢通路中的辅因子的再生进一步提高胞内GDP‑岩藻糖的积累。