1.本发明涉及植物栽培技术领域，更具体的说是涉及一种打破野生银莲花种子休眠的方法。


背景技术：

2.长毛银莲花(anemone narcissiflora var.crinita(juz.)tamura)和银莲花(anemone cathayensis kitag.)同为毛茛科银莲花属野生观赏植物，药用价值颇丰。但是受自然环境条件及人为条件限制，长毛银莲花和银莲花野生资源十分有限。
3.目前，对长毛银莲花的研究尚属空白，对银莲花的研究大多在其植物化学成分与药理研究，对于如何打破银莲花的种子休眠尚未见报道。发芽困难是制约长毛银莲花和银莲花大规模栽培的瓶颈问题，而依靠根茎繁殖速度较慢，无法迅速满足药用生产。
4.因此，寻找适宜的萌发条件是解决野生银莲花种质资源短缺的根本途径。


技术实现要素：

5.有鉴于此，本发明的目的在于提供一种打破野生银莲花种子休眠的方法，以解决现有技术中的不足。
6.为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
7.一种打破野生银莲花种子休眠的方法，具体包括以下步骤：
8.(1)将野生银莲花种子放入水中浸泡，然后放入酒精中浸泡，再用h2o2消毒，最后用水冲洗干净，得到消毒种子，备用；
9.(2)将沙子晒干，过筛，然后高温高压灭菌，自然冷却至室温后加水润湿，再与消毒种子搅拌混匀，最后分装到扎孔的灭菌袋中，备用；
10.(3)先在地窖内地表面平铺第一层沙子，然后将灭菌袋摆放整齐，再在灭菌袋上部加入第二层沙子并与沙面齐平剪断上口成敞口状，最后在所有灭菌袋上层覆盖第三层沙子；
11.(4)将灭菌袋在地窖内放置90-100天后，转至室温继续放置10-15天，然后取出灭菌袋，挑出萌发的种子进行培育，即得所述野生银莲花幼苗。
12.进一步，上述步骤(1)中，野生银莲花为长毛银莲花和/或银莲花。
13.采用上述进一步技术方案的有益效果在于，长毛银莲花和银莲花同为毛茛科银莲花属野生观赏植物，药用价值颇丰。
14.进一步，上述步骤(1)中，水中浸泡的温度为25℃，时间为48h。
15.采用上述进一步技术方案的有益效果在于，通过将野生银莲花种子放入水中浸泡(浸种)，能够显著缩短种子的萌发时间；并利用种子耐热力高于病菌耐热力的特点，用温水消灭种子内外的病原物，防治苗期病害。
16.进一步，上述步骤(1)中，酒精的质量分数为70％，酒精中浸泡的时间为30s。
17.采用上述进一步技术方案的有益效果在于，通过将野生银莲花种子放入酒精中浸
泡，能够显著提高种子的发芽率。因为酒精能起到杀毒杀菌的作用，所以浸泡种子时能把种子的一些病毒和细菌消灭，能起到暂时的消毒作用，对种子的发芽有帮助，所以能提高发芽率。
18.进一步，上述步骤(1)中，h2o2的质量分数为15％，h2o2消毒的时间为20min。
19.采用上述进一步技术方案的有益效果在于，通过将野生银莲花种子用h2o2消毒，不仅能够消灭种子上的病原菌，而且浸泡过h2o2的种子发芽的速度会更快，且能长得更加健康，幼苗不易倒伏。因为h2o2分解的时候会释放氧气，种子在发芽的时候，对氧气含量需求是比较高的，所以适当用h2o2溶液浸泡种子还能够提高发芽率。
20.进一步，上述步骤(2)中，高温高压灭菌的温度为121℃，时间为20min或，温度为135℃，时间为40min。
21.采用上述进一步技术方案的有益效果在于，通过将沙子进行高温高压灭菌，不仅可杀死一般的细菌、真菌等微生物，对芽胞、孢子也有杀灭效果。
22.进一步，上述步骤(2)中，沙子与消毒种子的体积比为3:1。
23.采用上述进一步技术方案的有益效果在于，通过将沙子与消毒种子混合，能够使种粒完全被湿沙包裹，增加种皮透性，加速种子内部代谢，加速种子完成生理后熟，促进萌发。
24.进一步，上述步骤(3)中，第一层沙子的厚度为10-15cm，优选为10cm；第二层沙子的厚度为5-8cm，优选为5cm；第三层沙子的厚度为10-15cm，优选为10cm。
25.采用上述进一步技术方案的有益效果在于，第一层地面沙子能够使灭菌袋底部温度和湿度与周围环境保持一致；第二层敞口袋上边覆沙，能够减少袋内水分蒸发并保证取菌袋时种粒完好不受损；第三层包括周围全部覆盖沙子能够保证所有灭菌袋周围环境一致。
26.经由上述的技术方案可知，与现有技术相比，本发明的有益效果如下：
27.1、本发明通过地窖层积处理，发现长毛银莲花和银莲花种子的最适宜萌发条件为地窖层积100d+室温15d处理，发芽率分别为34.44％和45.78％。
28.2、本发明方法极大地促进了长毛银莲花和银莲花种子的萌发，且处理条件较为简单，便于实现，对保护与开发植物资源提供了技术支持。
具体实施方式
29.下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
30.以下实施例中，分别选择饱满、完整且颜色一致的长毛银莲花和银莲花种子自然干燥，贮藏于4℃冰箱中备用。其中，长毛银莲花种子采自塞罕坝机械林场，银莲花种子采自雾灵山自然保护区。
31.实施例1
32.打破野生银莲花种子休眠的方法，具体包括以下步骤：
33.(1)2021年1月初，取长毛银莲花种子1000粒，先放入25℃蒸馏水中浸泡48h，然后
放入质量分数为70％的酒精中浸泡30s，再用质量分数为15％的h2o2消毒20min，最后用蒸馏水冲洗干净，得到消毒种子，备用；
34.(2)先将沙子晒干，过筛去除沙子里边的石子，然后121℃高温高压灭菌20min，自然冷却至室温后加入蒸馏水润湿，沙子湿度以握紧成团松开即散为适，再与消毒种子以3:1的体积比搅拌混匀，最后分装到扎孔的灭菌袋中并记好标签，备用；
35.(3)先在地窖内地表面覆盖第一层10cm厚的沙子，然后将灭菌袋分别摆放整齐，保证每个袋子之间保持同等距离，再在灭菌袋上部加入第二层5cm厚的沙子并与沙面齐平剪断上口成敞口状，最后在所有灭菌袋上层覆盖第三层10cm厚的沙子，保持每个灭菌袋四周都充满沙子；
36.(4)将灭菌袋在地窖内放置100天后，转至室温继续放置15天，然后取出灭菌袋，挑出萌发的种子进行培育，即得长毛银莲花幼苗。
37.实施例2
38.打破野生银莲花种子休眠的方法，具体包括以下步骤：
39.(1)2021年1月初，取银莲花种子1000粒，先放入25℃蒸馏水中浸泡48h，然后放入质量分数为70％的酒精中浸泡30s，再用质量分数为15％的h2o2消毒20min，最后用蒸馏水冲洗干净，得到消毒种子，备用；
40.(2)先将沙子晒干，过筛去除沙子里边的石子，然后135℃高温高压灭菌40min，自然冷却至室温后加入蒸馏水润湿，沙子湿度以握紧成团松开即散为适，再与消毒种子以3:1的体积比搅拌混匀，最后分装到扎孔的灭菌袋中并记好标签，备用；
41.(3)先在地窖内地表面覆盖第一层15cm厚的沙子，然后将灭菌袋分别摆放整齐，保证每个袋子之间保持同等距离，再在灭菌袋上部加入第二层8cm厚的沙子并与沙面齐平剪断上口成敞口状，最后在所有灭菌袋上层覆盖第三层15cm厚的沙子，保持每个灭菌袋四周都充满沙子；
42.(4)将灭菌袋在地窖内放置100天后，转至室温继续放置15天，然后取出灭菌袋，挑出种子进行萌发，培育，即得银莲花幼苗。
43.对比例1
44.与实施例1的区别仅在于，将灭菌袋在地窖内放置100天后，即取出灭菌袋。
45.对比例2
46.与实施例2的区别仅在于，将灭菌袋在地窖内放置100天后，即取出灭菌袋。
47.对比例3
48.与实施例1的区别仅在于，将长毛银莲花种子放于4℃恒温冰箱冷藏100天后，先放入25℃蒸馏水中浸泡48h，然后放入质量分数为70％的酒精中浸泡30s，再用质量分数为15％的h2o2消毒20min，最后用蒸馏水冲洗干净，得到消毒种子，然后种于育苗基质(进口草炭)中，放于温室内进行正常养护管理，即得长毛银莲花幼苗。
49.对比例4
50.与实施例2的区别仅在于，将银莲花种子放于4℃恒温冰箱冷藏100天后，先放入25℃蒸馏水中浸泡48h，然后放入质量分数为70％的酒精中浸泡30s，再用质量分数为15％的h2o2消毒20min，最后用蒸馏水冲洗干净，得到消毒种子，然后种于育苗基质(进口草炭)中，放于温室内进行正常养护管理，即得银莲花幼苗。
51.性能测试
52.各取实施例1-2和对比例1-4放置处理后的种子，分别将种子倒至干净的桌面上用镊子挑出发芽种子并记录。结果如表1所示。
53.表1实施例1-2和对比例1-2得到的种子发芽率
[0054][0055]
由表1可知，与地窖层积100d和4℃恒温冷藏100d相比，地窖层积100d+室温15d能够显著提高长毛银莲花种子和银莲花种子的发芽率。
[0056]
以上试验说明，本发明方法极大地促进了长毛银莲花和银莲花种子的萌发，且处理条件较为简单，便于实现，对保护与开发植物资源提供了技术支持。
[0057]
对所公开的实施例的上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。