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一种生长育肥猪用复方中草药及其应用与饲养方法与流程

时间:2022-02-02 阅读: 作者:专利查询

一种生长育肥猪用复方中草药及其应用与饲养方法与流程

1.本发明涉及饲料添加剂技术领域,具体是一种生长育肥猪用复方中草药及其应用与饲养方法。


背景技术:

2.近年来,随着我国养猪业的迅速发展,集约化程度的提高,国内外畜禽贸易的日益频繁,疾病传播机会增加,传染病频繁流行,多种类型病原混合感染,免疫抑制性疾病危害加大,造成疫苗免疫效果不佳,严重影响了养猪业的发展。同时由于高密度的养殖及管理的不善,常会引发养殖动物的应激反应,导致机体的免疫系统受到抑制,造成疾病频发,给养殖户带来了巨大的经济损失。目前,在养猪户普遍采用添加有抗生素、激素、化学合成药物等添加剂的饲料来防治,确保猪的健康,长期使用这些饲料,不仅易引起病原微生物产生耐药性、猪的免疫力下降和产品品质下降等问题,并可造成猪产品及环境中的有害残留增加,严重威胁着人类健康,且现有的用于饲料的添加剂只能防治疾病,并不能提供营养成分以保障猪的机体的健康状态。


技术实现要素:

3.本发明的目的在于克服现有技术的不足,提供一种生长育肥猪用复方中草药,以至少达到在养殖生长育肥猪的过程中预防疾病的同时,也能提供营养成分和活性成分,改善生长育肥猪的血液生化指标、免疫力、抗氧化性能,获得品质较高的生长育肥猪,降低养殖污染的目的。
4.本发明的目的是通过以下技术方案来实现的:一种生长育肥猪用复方中草药,所述复方中草药包含以下中药:白头翁,海蚌含珠,山楂,地锦,蒲公英,女贞子,叶下珠,黄芩,黄莲,绞骨蓝,甘草,黄柏,海金沙。
5.进一步的,所述复方中草药由白头翁,海蚌含珠,山楂,地锦,蒲公英,女贞子,叶下珠,黄芩,黄莲,绞骨蓝,甘草,黄柏,海金沙组成,组成所述复方中草药的中药的重量比为白头翁:海蚌含珠:山楂:地锦:蒲公英:女贞子:叶下珠:黄芩:黄莲:绞骨蓝:甘草:黄柏:海金沙=5:5:5:4:4:4:3:5:4:5:3:4:4。
6.进一步的,所述复方中草药用于添加在饲料中喂养生长育肥猪来提升生长育肥猪的肉质和健康状态。
7.进一步的,所述生长育肥猪品种为杜洛克或长白或大约克。
8.一种添加复方中草药的饲料,所述饲料包含以下组分:所述饲料包含以下组分:权利要求2所述的生长育肥猪用复方中草药与基础饲料,所述中草药的加量为所述基础饲料重量的1%或2%,所述基础饲料按质量分数计包含以下重量份的原料:77.16%玉米、15.50%大豆粕、2.76%麦麸、2.56%豆油、1.13%磷酸氢钙、0.53%石粉、0.36%盐。
9.一种添加复方中草药的饲料,其制备方法包括以下步骤:
10.s1:按权利要求1的复方中草药的配方分别准备中草药;
11.s2:将步骤s1准备的中草药分别粉碎成粉末状,其后将粉末过40目筛,其后分别将过筛后的粉末在50℃下烘干;
12.s3:将得到的筛分烘干后的各种中草药按权利要求2所述配比混合均匀,其后将得到的复方中草药分装备用;
13.s4:将步骤s3得到的复方中草药加水混匀成稀泥状,与权利要求3所述的基础饲料混合均匀,所述中草药的加量为所述饲料重量的1%或2%。
14.一种添加复方中草药的饲料饲养生长育肥猪的方法,包括以下步骤:随机选取多只体重为60kg、日龄为90d的生长育肥猪;其后每天分别于上午6:20、中午12:00和下午6:00进行自由进食方式的饲喂。
15.进一步的,饲养过程中保持猪舍内平均温度为24.87-29.13℃,同时按常规免疫程序进行免疫。
16.本发明的有益效果是:本发明中的中药分别具有以下效用,白头翁:具有清热解毒,凉血止痢之功效,常用于热毒血痢;海蚌含珠:清热解毒,利湿,收敛止血,用于肠炎,痢疾,吐血、衄血、便血、尿血,崩漏;外治痈疖疮疡,皮炎湿疹;山楂:健脾开胃、消食化滞、活血化痰;地锦:祛风止痛,活血通络;蒲公英:富含维生素a、维生素c及钾,也含有铁、钙、维生素b2、维生素b1、镁、维生素b6、叶酸及铜,同时也含有蒲公英醇、蒲公英素、胆碱、有机酸、菊糖等多种健康营养成分,具有抗菌、利胆等作用;女贞子:主补中,安五脏,养精神,除百疾,久服肥健,轻身不老;叶下珠:有解毒、消炎、清热止泻、利尿之效;黄芩:有清热燥湿、泻火解毒、止血等功效。主治温热病、上呼吸道感染、肺热咳嗽、湿热黄胆、肺炎、痢疾、咳血、目赤、痈肿疖疮等症,而且不产生抗药性;黄莲:有清热燥湿,泻火解毒之功效;绞骨蓝:消炎解毒,止咳祛痰、滋补强体;甘草:有抗炎、抗过敏和调和某些药物的烈性的作用;黄柏:有清热燥湿,泻火除蒸,解毒疗疮的功效;海金沙:清利湿热,通淋止痛;所有中草药在配伍后能达到以下效果:
17.(1)本发明涉及的复方中草药能显著降低生长育肥猪在生长过程中的腹泻率;能显著提高igg、igm和iga含量,从而提高生长育肥猪的免疫力。
18.(2)能正常维护肾脏代谢功能,同时显著降低血清中的ast、chol、tg和alt含量,极显著提高了hdl-c含量,促进生长育肥猪的肝脏代谢水平,即所述复方中草药能在一定程度上促进机体对胆固醇的代谢和蛋白质的利用,从而改善生长育肥猪健康状况。
19.(3)所述复方中草药能显著提高不同时间段血清中cat含量,同时在一定程度上能降低血清中mda含量,提高血清中gsh-px活性,表明复方中草药具有提高生长育肥猪抗氧化能力,改善机体健康状况。
20.(4)所述复方中草药能显著增加肉ph值,显著提高猪肉嫩度,在一定程度上改善猪的肉品质,同时提高生长育肥猪猪肉中的肌肉蛋白质含量、肌内脂肪含量和肌肉脂肪含量,对生长育肥猪鲜肉的营养物质具有明显的提升作用,表明复方中草药能显著提高猪肉营养物质成分。
21.(5)中草药中富含皂苷类、有机酚、有机酸和多糖等成分,这些成分通过促进肠道微生物的代谢来刺激动物肠道蠕动,同时抑制有害微生物的增殖和代谢,提高动物免疫力,减少疾病发生。
附图说明
22.图1为稀释曲线图;
23.图2为各样本间outs的维恩图;
24.图3为不同组猪肠道菌群pcoa分析图;
25.图4为猪肠道菌群的门水平分布(各组水平)图;
26.图5为猪肠道菌群的属水平分布(各组水平)图。
具体实施方式
27.下面进一步详细描述本发明的技术方案,但本发明的保护范围不局限于以下所述。
28.一种生长育肥猪用复方中草药,所述复方中草药包含以下重量比的中药:白头翁:海蚌含珠:山楂:地锦:蒲公英:女贞子:叶下珠:黄芩:黄莲:绞骨蓝:甘草:黄柏:海金沙=5:5:5:4:4:4:3:5:4:5:3:4:4。
29.一种添加复方中草药的饲料,其制备方法包括以下步骤:
30.s1:按复方中草药的配方(白头翁,海蚌含珠,山楂,地锦,蒲公英,女贞子,叶下珠,黄芩,黄莲,绞骨蓝,甘草,黄柏,海金沙)分别准备中草药;
31.s2:将步骤s1准备的中草药分别粉碎成粉末状,然后将粉末过40目筛,再分别将过筛后的粉末在50℃下烘干;
32.s3:将得到的筛分烘干后,将各种中草药按重量比(白头翁:海蚌含珠:山楂:地锦:蒲公英:女贞子:叶下珠:黄芩:黄莲:绞骨蓝:甘草:黄柏:海金沙=5:5:5:4:4:4:3:5:4:5:3:4:4)混合均匀,其后分装备用;
33.s4:将步骤s3得到的复方中草药加水混匀成稀泥状,与组成如表1所示的基础饲料混合均匀,所述复方中草药的加量为所述基础饲料重量的1%或2%。
34.实施例1:
35.一种生长育肥猪用复方中草药饲养生长育肥猪的方法,具体应用方法如下:
36.s1:随机选取27只体重为60kg、日龄为90d的杜洛克生长育肥猪;
37.s2:其后用所述饲料(所述复方中草药的加量为日常基础饲料重量的1%)每天分别于上午6:20、中午12:00和下午6:00饲喂,且每日8:00、14:00及18:00时测定猪舍温度,取平均值为当天猪舍平均温度,保持猪舍内平均温度为24.87-29.13℃,同时按常规免疫程序进行免疫。
38.实施例2:
39.一种生长育肥猪用复方中草药饲养生长育肥猪的方法,具体应用方法如下:
40.s1:随机选取27只体重为60kg、日龄为90d的杜洛克生长育肥猪;
41.s2:其后用所述饲料(所述复方中草药的加量为日常基础饲料重量的2%)每天分别于上午6:20、中午12:00和下午6:00饲喂,且每日8:00、14:00及18:00时测定猪舍温度,取平均值为当天猪舍平均温度,保持猪舍内平均温度为24.87-29.13℃,同时按常规免疫程序进行免疫。
42.对比例:
43.一种生长育肥猪用复方中草药饲养生长育肥猪的方法,具体应用方法如下:
44.s1:随机选取26只体重为60kg、日龄为90d的杜洛克生长育肥猪;
45.s2:其后用日常基础饲料饲养生长育肥猪,每天分别于上午6:20、中午12:00和下午6:00饲喂,且每日8:00、14:00及18:00时测定猪舍温度,取平均值为当天猪舍平均温度,保持猪舍内平均温度为24.87-29.13℃,同时按常规免疫程序进行免疫。
46.表1:基础饲粮组分和营养成分表
[0047][0048][0049]
注:每公斤基础饲粮含铁100.0mg,锌100mg,锰10.0g,铜10.0mg,硒0.3mg,碘0.5mg,维生素a12000iu,维生素d32000iu,维生素e 20iu,维生素k3 0.5mg,生物素0.05mg,叶酸0.30mg,泛酸20.0mg,维生素b 2.0mg,维生素b6 1.0mg,维生素b12 0.01mg氯化胆碱1.0g,抗氧化剂200.0mg;试验在湖南省邵阳市市郊红李种养合作社进行;中草药均购自长沙老百姓大药房。
[0050]
对实施例及对比例饲养的生长育肥猪及饲养过程中的各项指标进行检测,分析本发明涉及的复方中草药对生长育肥猪的影响,检测结果按平均值
±
标准差表示。
[0051]
(1)屠宰及样品的采集
[0052]
加本发明的复方中草药的前一周为试验期,其后进入正试期,从正试期开始的第0d、30d和60d的实施例和对比例中随机抽出8头生长育肥猪进行采血,分别标记好后放入离心机3500r
·
min-1
离心10min,其后放入-20℃冰箱中保存,用于测定血清免疫性能、血清生化及抗氧化功能。正试期结束后,在实施例和对比例中随机挑选一头体重接近的公猪,然后停水、停食,空腹24h后,将猪击晕后进行放血屠宰;取左侧背最长肌样品200g用于测定滴水损失、ph值及嫩度;取胸腰结合处眼肌用于测定肉色中l值、a值和b值;并在收集样品后从左侧胴体分离骨骼肌的背最长肌中部组织样400g,在-20℃条件下保存备用。
[0053]
(2)指标的测定与方法
[0054]
(2.1)生长性能的测试
[0055]
正试期期间,记录每个重复的采食量;于正试期正式开始直至出栏,每个月(30d)对生长育肥猪进行称重(仪器:tcs系列300kg电子秤),计算日均重、日采食量、料肉比;试验期间记录各试验组的腹泻头数和腹泻次数,测试结果见表2。
[0056]
具体计算方法如下:
[0057]
日均增重=(试验猪试验末重-猪试验初重)
÷
试验天数
[0058]
日均采食量=猪试验期间采食量
÷
试验天数
×
试验猪数
[0059]
料肉比=日均采食量
÷
日均增重
[0060]
腹泻率=(腹泻头数
×
腹泻天数)
÷
(试验头数
×
试验天数)
×
100%
[0061]
表2:生长性能的测试表
[0062][0063]
注:实施例1、实施例2和对比例之间的同一检测指标对应的检测数据上标注的字母含义为:相同字母或不标字母表示差异不显著(p>0.05),不同小写字母表示差异显著(0.01<p<0.05),不同大写字母表示差异极显著(p<0.01),下表同。
[0064]
由表2可知:本发明涉及的复方中草药对生长育肥猪的生产性能无不良影响。
[0065]
(2.2)对生长肥育猪腹泻率的影响
[0066]
记录正试期实施例和对比例中生长育肥猪的腹泻率,具体结果如表3所示。
[0067]
表3:腹泻率记录表
[0068]
组别样本数腹泻率(%)对比例263.45
±
0.06a实施例1271.97
±
0.06c实施例2272.29
±
0.01b[0069]
由表3可知:本发明涉及的复方中草药能显著降低生长育肥猪的腹泻率。
[0070]
(2.3)对猪血清中免疫功能的检测
[0071]
从饲喂试验正式开始的第0d、30d、60d,在上午饲喂前对生长育肥猪进行采血工作,实施例及对比例中随机抽出8头空腹生长育肥猪,用一次性兽用注射器(10ml)对生长育肥猪进行前腔静脉采血10ml于采血管中(非抗凝管)标记好,随后静置30min,放入离心机3500r
·
min-1
离心10min,吸取血清,所得血清分装于0.5ml离心管中,放入-20℃冰箱中保存备用,用于测定生长育肥猪的免疫性能、血液生化及抗氧化功能,具体的检测方法如表4、表5所示,具体检测结果如表6、表7所示。
[0072]
表4:血液生化指标的测定方法
[0073]
项目检测方法丙氨酸氨基转移酶(alt)酶学速率法肌酐(crea)胆固醇氧化酶-过氧化物酶偶联法胆固醇(chol)酶学速率法碱性磷酸酶(alp)对硝基酚磷酸盐连续监测法总蛋白(tp)双缩脲法高密度脂蛋白胆固醇(hdl-c)清除法天门冬氨酸氨基转移酶(ast)酶学速率法血清尿素(urea)肌氧酸氧化酶法甘油三脂(tg)磷酸甘油氧化酶-过氧化物酶偶联法白蛋白(alb)清除法低密度脂蛋白胆固醇(ldl-c)溴甲酚绿法免疫球蛋白a(iga)免疫透射比浊法免疫球蛋白g(igg)免疫透射比浊法免疫球蛋白m(igm)免疫透射比浊法
[0074]
表5:检测血清抗氧化指标及方法
[0075][0076]
表6:生长育肥猪血清生化指标测试结果
[0077]
[0078][0079]
表7:生长育肥猪血清中抗氧化功能测试结果
[0080][0081]
由表6可知:crea含量方面:在60d时,实施例的含量较对比例有降低的趋势,且实施例2较对比例差异显著(p<0.05);在alt含量方面:在60d时,实施例1组的含量较对比例显著降低(p<0.05),且实施例2的含量较对比例极显著降低(p<0.01);在ast含量方面:在30d时,实施例1和实施例2中的含量均有低于对比例的趋势,且实施例1相比于对比例差异显著(p<0.05);在60d时,实施例1和实施例2的含量均有低于对比例的趋势,且实施例2的含量与对比例差异显著(p<0.05);在chol含量方面:在30d时,实施例1较对比例显著降低(p<0.05);在60d时,实施例1和实施例2的含量均极显著低于对比例(p<0.01),实施例1和实施例2之间差异显著(p<0.05)。在hdl-c含量方面:在60d时,实施例1和实施例2的含量均极显著低于对比例(p<0.01);各组其他生化指标(alb、alp、tp、urea和ldl_c)在各时间段均无显著差异。
[0082]
由表7可知:在cat含量方面,在30d时实施例1极显著高于对比例(p<0.01),实施例2显著高于对比例(p<0.05);在60d时,实施例1显著高于对比例(p<0.05);在mda含量方面,0d时,对比例的含量显著高于实施例2(p<0.05);在30d时,与对比例相比,实施例2降低了18.72%,但差异不显著(p>0.05);在60d时,实施例1和实施例2的含量均有低于对比例的趋势,但差异不显著(p>0.05);在gsh-px含量方面,在30d时,实施例1和实施例2的含量均有高于对比例的趋势,但差异不显著(p>0.05)。各组其他抗氧化指标(no和t-aoc)在各时间段均无显著差异。
[0083]
综上所述:本发明涉及的复方中草药能一定程度上促进机体对胆固醇的代谢和蛋白质的利用,从而改善生长育肥猪健康状况;能显著提高igg、igm和iga含量,提高生长育肥猪的免疫力;提高生长育肥猪抗氧化能力,改善机体健康状况。
[0084]
(2.4)对生长育肥猪肉品质及营养物质的测试
[0085]
具体测试方法如下,测试结果如表8、表9所示。
[0086]
(2.4.1)ph值测定
[0087]
根据gb/t9695.5-2008《肉与肉制品ph测定》中的测定规定,通过型号为testo 205的数字式ph测定仪测定猪肉样品的ph值,测定背最长肌屠宰后45min时的ph值和屠宰后24h时肉ph值。
[0088]
测定时,先校正ph计,随后将己校正电极插入50g肉样中,使得电机完全包埋在肉样里,按下按钮,记录数据,每个肉样测定三次,每次取肉样的不同位置,取其算术平均值
±
标准差作为结果。
[0089]
(2.4.2)肉色测定
[0090]
在相同光照和通风的条件下,用cr-400型肉色测定仪分别测定屠宰后45min的l*(亮度)、a*(红度)和b*(黄度),每个样品取三个不同部位测定;肉色测定仪用前经校正板标准化,由于肉面颜色随位置而异,故在肉面约10cm2内重复3次改变位置度量,最后取平均数
±
标准差作为检测结果。
[0091]
(2.4.3)滴水损失
[0092]
选取背最长肌样品,用型号为jj200a的电子天平称取20g,剔除样品外周肌膜,顺肌纤维走向,修成约5
×3×
2.5cm的肉条3根;用型号为jj200a的电子天平称量每根肉条的重量,为失水前重量,并编号记录,放置于一次性塑料杯中,用铁丝穿过一次性塑料杯壁将肉样固定后倒挂,保持肉样垂直向下,不能接触杯壁,在4℃下保存24h,再称其重量,为失水后重量。滴水损失计算公式如下:
[0093]
滴水损失=(失水前重量-失水后重量)/失水前重量
×
100%
[0094]
(2.3.4)嫩度测定
[0095]
取样背最长肌样品,用c-lm3b型数显式肌肉嫩度仪测量其嫩度。背最长肌在-4℃下经过72h的储存熟化后取出,切取3块4cm厚度的背最长肌,分别置于高压灭菌袋中(与水隔绝),在肉样中心插入温度计,其后放入75℃的水浴锅中加热15min,待肉样中心温度达到70℃时,持续5min,取出冷却至室温,背最长肌沿肌纤维方向切取3条1
×
1cm
×
2.5cm的肉样(无肌键、肌膜、脂肪);用肌肉嫩度仪(c-lm3b),沿肌纤维垂直方向测定剪切力,以n为单位表示,测定多次,去除最大值和最小值,计算其余剪切力平均值,以平均值
±
标准差作为检测结果。
[0096]
(2.3.5)粗脂肪含量测定
[0097]
仪器:石墨消解仪(型号:sh220f)、恒温干燥培养箱(型号:dhg-9030a)
[0098]
(2.3.5.1)样本前处理
[0099]
取新鲜猪肉100g,放于-80℃的冰箱中冻存,其后切碎,再用冷冻干燥机处理8小时,然后研磨成粉状保存于4℃的冰箱中,测试称取3g粉末试样置于100℃的烘箱中烘干至试样恒重。
[0100]
(2.3.5.2)脂肪抽提
[0101]
准确称量烘干后的粉末试样2g(精确至0.0001g),将试样同滤纸包一并放入滤纸架中,塞入适量脱脂棉;干燥抽提杯至恒重,记录抽提杯质量,在抽提杯内倒入无水乙醚50ml并放于加热板上,使滤纸套内的试样完全浸入乙醚中,打开仪器电源和冷凝水开关,设置温度为70℃、抽提时间为4h;浸提半小时后,将滤纸筒升至高位,进行抽提;经过沸腾、淋洗、回收和干燥四步后抽提结束,取出抽提杯置于80℃下的烘干箱中烘干30min,除去水分和多余溶剂,待冷却后进行称重。
[0102]
(2.3.5.3)计算
[0103]
粗脂肪%=(抽提后瓶重-抽提前瓶重)/样本烘干后重量
×
100%
[0104]
(2.3.6)粗蛋白含量测定
[0105]
仪器:自动凯氏定氮仪(型号:k9840)
[0106]
(2.3.6.1)样本前处理
[0107]
取新鲜猪肉20g,放于-80℃下的冰箱中冻存,其后切碎,然后用冷冻干燥机处理8小时再研磨成粉状保存于4℃冰箱;称取2g粉末试样,将样品加入消解管中(确保样品不会接触到管壁),向消解管中依次加入0.2g硫酸铜、3g硫酸钾及10ml硫酸。
[0108]
(2.3.6.2)消解
[0109]
将消解管放在石墨消解仪上,仪器温度依次设置为200℃、220℃、240℃、260℃、280℃、320℃、350℃、420℃,其后加热;液体沸腾后将消解管放置旁侧,并将石墨消解仪上温度设为低于前沸腾温度10℃;待消解仪温度降到设置温度时,将样品放于消解仪上按设置温度梯度继续消化30min;待样品全部炭化,泡沫完全停止后,加大火力,保持液面轻度沸腾,当溶液呈透明蓝绿色时,接着加热0.5h;其后取下消解管冷却至40℃,其后向消解管内缓慢加入10ml水,摇匀后冷却至室温。
[0110]
(2.3.6.3)蒸馏
[0111]
其后将消解管放入全自动凯氏定氮仪中,全自动凯氏定氮仪参数设置为:蒸馏水10.0ml,硼酸吸收液25.0ml,氢氧化钠溶液55.0ml,蒸馏时间5min;关上安全门后启动仪器进行蒸馏,在蒸馏过程中用锥形瓶收集馏分;同时做空白试验。
[0112]
(2.3.6.4)滴定
[0113]
在由锥形瓶收集的蒸馏液中加入2滴溴甲酚绿-甲基红混合指示剂,以盐酸标准滴定溶液(0.1mol/l)滴定至样液转变为粉红色且30s内不褪色即为滴定终点,同时做空白试验。
[0114]
计算公式如下:
[0115]
粗蛋白含量cp%=(v1-v2)
×c×
0.0140
×f÷m[0116]
其中:
[0117]
v1:滴定样液时盐酸标准滴定溶液的消耗体积,ml;
[0118]
v2:空白试验时盐酸标准滴定溶液的消耗体积,ml;
[0119]
c:盐酸标准滴定溶液的摩尔浓度,mol/l;
[0120]
0.0140:1.0ml盐酸标准滴定溶液相当的氮的质量,g;
[0121]
m:试样的质量,g;
[0122]
f:氮换算为蛋白质的系数。畜禽肉及其制品的蛋白质系数为6.25(即f=6.25)。
[0123]
表8:生长育肥猪肉品质测试结果
[0124][0125]
表9:生长育肥猪鲜肉营养物质测试结果
[0126][0127][0128]
由表8可知:在屠宰后24h肉ph方面,实施例1和实施例2较对比例有显著提高(p<0.05);在肉色方面,实施例1和实施例2的l值较对比例有极显著提高(p<0.05);且实施例1的l值较实施例2有极显著提高(p<0.01);实施例1的a值和b值较对比例极显著升高(p<0.05),且其他肉品质指标均无显著差异。
[0129]
由表9可知:在粗蛋白质方面,实施例2较对比例有极显著提高(p<0.01);在肌内脂肪方面,实施例1和实施例2较对比例显著提高(p<0.05)。
[0130]
综上:本发明涉及的复方中草药对生长育肥猪鲜肉的营养物质及猪肉品质具有明显的提升作用。
[0131]
(2.3.6)猪肠道微生物的测定
[0132]
将实施例和对比例生长育肥猪屠宰后取出盲肠,取适量盲肠内容物样品放于经灭菌处理的5ml离心管中,每组取三管样品,-80℃保存,标记对比例样本命名为cont.1、cont.2、cont.3,实施例1样本命名为exp.1.1、exp.1.2、exp.1.3,实施例2样本命名为exp.2.1、exp.2.2、exp.2.3送于嘉禾致源公司测定,测定结果如图1-图5所示。
[0133]
(2.3.6.1)生物测序质量分析
[0134]
稀释曲线主要是体现出样品测序量是否合格。若曲线趋于平缓也就可以认为测序己经基本覆盖到样品中所有的物种。如图1所示,本试验中检测的盲肠内容物样品的chao指数稀释曲线趋于平缓,说明测序深度己基本覆盖样本中的所有物种,样品的测序量以及样本质量是合格的。
[0135]
(2.3.6.2)各组分otu的venn图结果分析
[0136]
将对照组(cont.)、试验ⅰ组(exp.1)、试验ⅱ组(exp.2)进行聚类分析,如图2所示,所有样本中一共检测到2095个otus,观察发现有796个otus在总丰度中是共有的。样本对照
组、试验ⅰ组和试验ⅱ组中分别获得1607、1731和1037个otus。分别占总样本库的76.71%、82.63%、49.50%。其中,对照组样本和试验ⅰ组样本共有1334个otus;试验ⅰ组样本和试验ⅱ组样本共有946个otus;对照组样本和试验ⅱ组样本共有870个otus。
[0137]
(2.3.6.3)肠道菌群alpha多样性分析
[0138]
alpha分析可以体现一个样本中的菌群多样性和菌群相对丰度水平。shannon指数和simpson指数可以用来衡量微生物的多样性,值越大,反映群落多样性越高。chao 1指数是可评估样本群落中otu数目的指数。ace丰富度估计指数用来估计群落中实际存在的物种数,ace指数越大,表明群落的丰富度越高。
[0139]
根据表10所得,实施例2与对比例相比,极显著显著下调了ace指数、chao1指数和simpson指数(p《0.01),显著显著下调了shannon指数(p《0.05),降低了盲肠物种丰度和多样性,实施例1与对比例相比,均明显上调了盲肠菌群丰度和多样性。以上结果表明,实施例1较其他组,能较好的维护肠道健康发育。
[0140]
表10:猪肠道菌群alpha多样性分析:
[0141][0142]
(2.3.6.4)肠道菌群beta多样性分析
[0143]
通过pcoa来对肠道菌群进行beta多样性分析分析,进行作图展示。pcoa样本的距离越接近,表示不同组的组成结构越相似,群落结构相似样本则聚集在一起。由图3可得,pc2贡献值为24.64%,pc1贡献值为58.86%,且实施例与对比例相比距离明显分散。以上结果表明,实施例与对比例组间样本相距较分散,说明在基础日粮中添加复方中草药显著改变了育肥猪肠道菌群。
[0144]
(2.3.6.5)猪肠道菌群的群落结构
[0145]
肠道菌群在门水平上的结构分析
[0146]
从门水平柱状图(见图4)可以得知:厚壁菌门(firmicutes)和拟杆菌门(bacteroidetes)、螺旋菌门(spirochaetae)、变形菌门(proteobacteria)相对丰度较高且为主要微生物。实施例2厚壁菌门(firmicutes)的丰度与对比例相比明显增加,实施例1厚壁菌门(firmicutes)的丰度与对比例相比降低;而实施例1和实施例2拟杆菌门(bacteroidetes)和螺旋体门(spirochaetes)的丰度与对比例相比显著增加(p《0.05);实施例1变形菌门(proteobacteria)的丰度与对比例相比无明显变化,实施例2变形菌门(proteobacteria)的丰度较对比例明显降低。
[0147]
肠道菌群在属水平上的结构分析
[0148]
从属水平柱状图(见图5)可以得知:实施例1破伤风梭菌属(clostridium)明显降低,实施例2与对比例相比梭菌属(clostridium)显著升高(p《0.05);密螺旋体属中,实施例1和实施例2密螺旋体属(treponema)的丰度与对比例相比明显升高;实施例1和实施例2链
球菌属(streptococcus)的丰度与对比例相比明显降低;实施例1terrisporobacter属的丰度与对比例相比明显降低,实施例2terrisporobacter属的丰度与对比例相比明显增加。
[0149]
以上所述仅是本发明的优选实施方式,应当理解本发明并非局限于本文所披露的形式,不应看作是对其他实施例的排除,而可用于各种其他组合、修改和环境,并能够在本文所述构想范围内,通过上述教导或相关领域的技术或知识进行改动。而本领域人员所进行的改动和变化不脱离本发明的精神和范围,则都应在本发明所附权利要求的保护范围内。