1.本发明属于烟草工业应用领域，具体涉及一种多糖脂质体的制备方法及其在卷烟中的应用。
背景技术：
2.多糖在自然界中蕴藏非常丰富，且种类繁多，主要有植物多糖、动物多糖和微生物多糖等，因其具有分子量大、水溶性好的特点，且具备良好的生物学功能，因此多糖化合物长期被深入研究并在很多行业被应用。
3.卷烟的保润性能对卷烟产品的吸食品质有很大的影响，性能优良的保润剂在卷烟提高保润性、降低刺激性和柔和烟气方面效果非常显著，目前多元醇、糖类、有机酸盐、植物萃取物和仿生保护剂被广泛研究，不同类型的保润剂在卷烟保润效果上表现出不同的特点，同时在不同程度上对卷烟的感官品质产生影响。但是从实际情况看，卷烟产品仍然存在主流烟气水分偏低、刺激性偏大和干燥感明显的问题。
4.脂质体是由双亲性脂质双分子层包裹某些活性物质后自组装形成的具有双层膜结构的微型泡囊，脂质体可以将被包裹的物质在一定的时间段内缓慢释放，提高生物利用度。脂质体在多糖的制剂研究中应用频繁，其研究成果主要用在医药领域，还未有过将多糖脂质体用于卷烟行业的报道，如果通过制备适用于卷烟产品的多糖脂质体，并将其应用于烟草领域，利用脂质体的缓释作用，将多糖进行缓释，有效提高卷烟的保润性能。
5.因此，开发一种多糖脂质体，并将其应用于提高卷烟品质就显得非常必要。
6.为了解决以上问题，提出本发明。
技术实现要素：
7.本发明提供一种多糖脂质体的制备，其包括以下步骤：
8.(1)分别选取氢化卵磷脂、吐温80和胆固醇，加入一定量的氯仿，将上述混合物放入超声容器内溶解，进行第一次超声，得到第一混合物；
9.(2)将步骤(1)中得到的第一混合物放置到旋蒸蒸发仪上减压蒸发，除去氯仿，直至表面形成薄膜；
10.(3)在磷酸盐缓冲盐溶液中加入一定量的多糖，同时加入乙醚，采用超声处理混合溶液，进行第二次超声，得到第二混合物，将第二混合物置于步骤(2)中旋蒸蒸发仪内的混合物中，继续进行减压蒸发，直至混合物逐渐变成凝胶状态物质；
11.(4)向步骤(3)得到的凝胶状态物质中加入磷酸盐缓冲溶液，为使体系均匀分散，然后进行第三次超声处理；
12.(5)使用微孔滤膜对步骤(4)超声处理后的混合物进行过滤，得到多糖脂质体，4℃保存。
13.优选地，步骤(1)中，氢化卵磷脂、吐温80和胆固醇质量比应在7-10：1-2：1-3；氯仿的量控制为：氢化卵磷脂用100mg，氯仿需要10-30ml；第一次超声处理的条件为：超声功率
300w-380w，超声时间0.5-1h。
14.优选地，步骤(2)中，减压蒸发条件为：旋转蒸发仪的温度控制在55-65℃之间。
15.优选地，步骤(3)中，磷酸盐缓冲溶液pbs的离子强度选择在0.01～0.07mol/l；加入乙醚的量为50-80ml；氢化卵磷脂和多糖质量比应在15-25：1-3，旋转蒸发仪的温度控制在55-65℃之间；第二次超声处理的条件为：超声功率300w-380w，超声时间0.5-1h；所述多糖包括植物多糖提取物、多糖混合物或者多糖衍生物。
16.优选地，步骤(4)中，第三次超声处理的条件为：超声功率300w-400w，超声时间1-2h以上。
17.优选地，步骤(5)中，微孔滤膜为0.45μm的水膜；得到的多糖脂质体需要在4℃保存。
18.本发明第二方面提供一种本发明第一方面所述的制备方法制备的多糖脂质体用于卷烟中的应用。
19.优选地，将本发明第一方面所述的制备方法制备的多糖脂质体按照2％-6％的比例添加在卷烟滤嘴材料中。
20.优选地，对添加本发明第一方面所述的制备方法制备的多糖脂质体应用于卷烟进行评价的方法为：
21.取添加本发明第一方面所述的制备方法制备的多糖脂质体应用于卷烟的样品，置于温度22
±
1℃、相对湿度50
±
2％的恒温恒湿箱中平衡12h；
22.并进行以下四个方面的评价：
23.(1)测定多糖脂质体的粒径；
24.空白缓冲液稀释适当倍数，测其在室温下的平均粒径大小；
25.(2)测定多糖脂质体的包封率；
26.将制备的脂质体密封好置于室温条件下，测定其包封率；
27.包封率(％)＝a包/a总
×
100％
28.a包为脂质体包裹多糖的含量，a总为多糖总含量；
29.(3)测定卷烟样品的总粒相物中水分，采用gb/t 23203.1
─
2008方法；
30.(4)对卷烟样品进行感官评价，主要考察香气、烟气和口感特性三个方面，包含香气质、香气量、杂气、浓度、劲头、细腻程度、刺激性、干燥感、干净程度和回甜10个指标；所述10个质量检测指标的打分值分别为：香气质0-10分、香气量0-10分、杂气0-10分、浓度0-10分、劲头0-10分、细腻程度0-10分、刺激性0-10分、干燥感0-10分、干净程度0-10分、回甜0-10分。
31.本发明相对于现有技术，具有以下有益效果：
32.1、本发明通过适宜的技术手段，采用合理的超声处理，制备出粒径分布均匀、大小合适的多糖脂质体。
33.2、本发明将多糖物质通过脂质体的方式进行包裹，并将其应用于烟草领域，利用脂质体的缓释作用，实现了多糖物质在卷烟产品中的缓慢释放，显著提高了多糖的利用率，卷烟总粒相物中水分检测结果表明，多糖脂质体在卷烟中的应用，明显提高了卷烟主流烟气水分。
34.3、本发明将将具有保润性能的多糖物质缓释于卷烟中，达到了保润剂的缓释目
的，明显提升了卷烟的保润性，感官评吸结果表明本发明的应用起到了提高保润性、降低刺激感和柔和烟气的效果。
附图说明
35.无
具体实施方式
36.为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
37.实施例
38.(1)分别选取氢化卵磷脂、吐温80和胆固醇，加入一定量的氯仿，将上述几种物质放入超声容器内溶解，进行第一次超声，氢化卵磷脂、吐温80和胆固醇质量比应在8：1：1。氢化卵磷脂用100mg，氯仿需要20ml；第一次超声处理的条件为：超声功率350w，超声时间0.5h。
39.(2)将完全溶解的(1)放置到旋转蒸发仪上减压蒸发，除去氯仿，并形成一层薄膜，旋转蒸发仪的温度控制在55℃。
40.(3)在磷酸盐缓冲盐溶液中加入一定量的海藻多糖，同时加入11ml乙醚，采用超声处理混合溶液，进行第二次超声，超声功率350w，超声时间0.7h。将混合均匀的液体置于旋蒸蒸发仪中，氢化卵磷脂和多糖质量比应在20：1。磷酸盐缓冲溶液pbs的离子强度选择在0.03mol/l；加入乙醚的量为50ml；旋转蒸发仪的温度控制在60℃。
41.(4)随着溶剂和水分的散失，混合溶液逐渐变成凝胶状态物质，此时加入磷酸盐缓冲溶液，为使体系均匀分散，然后进行第三次超声处理，超声功率400w，超声时间1h以上。
42.(5)使用0.45μm的水膜微孔滤膜对(4)进行过滤，既得多糖脂质体，4℃保存。
43.本发明第二方面提供一种本发明第一方面所述的多糖脂质体在卷烟中的应用，将所制备的多糖脂质体以6％的比例添加在卷烟滤嘴材料中，测定脂质体的粒径及包封率，对添加了多糖脂质体的卷烟滤嘴所制成的卷烟进行感官评吸，同时测定样品中的总粒相物中水分。结果见表1、表2和表3。
44.对比例1
45.为对比本发明，采用实施例按照6％的比例直接将海藻多糖添加在卷烟滤嘴材料中。
46.对比例2
47.为对比本发明，采用与实施例相同的步骤制备多糖脂质体，区别在于步骤1、步骤3、步骤4采用的超声处理时间分别为0.2h、0.2h、0.5h。
48.对比例3
49.为对比本发明，采用与实施例相同的步骤制备多糖脂质体，区别在于步骤1、步骤3、步骤4采用的超声处理时间分别为0.7h、1.5h、3h。
50.对比例4
51.为对比本发明，采用与实施例相同的步骤制备多糖脂质体，区别在于步骤1、步骤
3、步骤4不采用超声处理。
52.表1多糖脂质体的粒径及包封率
[0053] 实施例对比例2对比例3对比例4粒径nm100
±
10195
±
30210
±
25300
±
2540包封率(％)85.4173.2171.5952.17
[0054]
表2不同烟丝样品总粒相物中水分分析结果
[0055][0056]
表3样品感官评价结果
[0057][0058]
从表1可以看出，实施例与对比例相比可以看出，超声的时间会影响多糖脂质体的粒径及包封率，其中实施例条件制备的多糖脂质体粒径约在100
±
10nm左右，相较于对比例其粒径更小，且均匀性更高。其次其包封率显著高于对比例。
[0059]
从表2可以明显地看到，实施例和对比例相比，主流烟气水分含量显著提高，说明本发明的应用显著提升了烟支的保润性。
[0060]
从表3可以看到，本发明的应用，可以将多糖物质缓释于卷烟中，达到了保润剂的缓释目的，明显提升了卷烟的保润性，感官评吸结果表明本发明的应用起到了提高保润性、刺激感降低和烟气柔和的效果。