1.本发明涉及中药制剂技术领域，具体是涉及工业大麻总萜烯的提取纯化方法及制剂。


背景技术：

2.工业大麻植物由各种化学品和化合物组成，其中大约200种属于芳香有机碳氢化合物，是工业大麻中发现的一组具有独特香气和风味的化合物，称为萜烯，或工业大麻总萜烯。目前，从工业大麻中分离鉴别了100多种萜烯类成分，其中包括
ɑ-蒎烯、月桂烯、柠檬烯、β-石竹烯、芳樟醇、蛇麻烯、罗勒烯、异松油烯等。近年来的研究发现，工业大麻萜烯具有多种药理活性，例如能促进放松和缓解压力、提高注意力和敏锐度、抗肿瘤、镇咳、祛痰、抑菌、局部麻醉、治疗结肠炎等，但无相关药品开发上市。
3.萜烯分离的过程并不困难，而且从工业大麻中提取萜烯的方法不止一种，每种方法各有优劣。例如蒸馏，该方法在分离萜烯方面是有效的，但是蒸馏的加热和氧气存在可能影响最终产物的形态，如果操作正确，并使用真空泵，温度保持足够低才可以避免损害所生成的化合物；其他方法如冷阱，利用真空泵将初始热量降低并保留，使用少量氮气和蒸馏水，这个过程相对简单直接，可以安全地把萜烯提取出来，但萜烯提取率和纯度也较低。
4.然而，由于工业大麻的化学组成十分复杂，主要由类脂物、黄酮类化合物、萜烯、碳氢化合物、非环形大苯酚、生物碱，柠檬酸银和环形工业大麻酚等构成，工业大麻总萜烯并非工业大麻的主要成分。因此，要满足药用条件，从工业大麻中提取出高纯度的工业大麻总萜烯存在较大难度。现有技术如蒸馏、冷阱存在损害最终提取物或是需要真空低温等苛刻条件，萜烯提取率和纯度较低。


技术实现要素：

5.本发明的目的是为了克服上述背景技术的不足，提供了一种工业大麻总萜烯的提取纯化方法及制剂，该方法工艺环保，提取率和纯度均高于传统的直接用水蒸气对药材进行蒸馏的方法，所得工业大麻总萜烯适宜制备成药用制剂。
6.为达到本发明的目的，本发明的工业大麻总萜烯的提取纯化方法包括以下步骤：
7.(1)将工业大麻药材粉末经5～10倍量的50％～95％乙醇室温搅拌提取，将提取液在50～70℃条件下减压浓缩，得浓缩液；
8.(2)将浓缩液加4～8倍量的热水分散后，冷却至室温，通过离心分层，分离得上层液；
9.(3)将上层液在80～95℃条件下保温后，进行分子蒸馏，收集轻组分，得工业大麻总萜烯粗提取物；
10.(4)取工业大麻总萜烯粗提取物，加入3～10倍的蒸馏水，进行水蒸气蒸馏，用轻组分收集器收集，室温静置，收集上层，即得工业大麻总萜烯提取物，其中总工业大麻萜烯含量≧95％，转移率≧99％。
11.进一步地，所述步骤(1)中工业大麻药材是以不经烘烤处理的工业大麻叶、工业大麻花、工业大麻根、工业大麻杆芯、工业大麻籽粕中的一种或两种以上任意比例组合所得。
12.进一步地，所述步骤(3)中分子蒸馏的条件为：压力：-0.01～-0.99pa，温度：70～95℃；转速：180～220rpm；冷凝温度：5～15℃；蒸发面和冷凝面的距离：5～25mm。
13.另一方面，本发明还提供了一种工业大麻总萜烯制剂，所述制剂中包含按前述工业大麻总萜烯的提取纯化方法所得工业大麻总萜烯提取物。
14.进一步地，所述制剂是将所得工业大麻总萜烯提取物包合制备成工业大麻总萜烯包合物，然后将其与药学上可接受的载体制成颗粒剂、胶囊剂、片剂。
15.进一步地，所述制备成工业大麻总萜烯包合物的方法包括：将工业大麻总萜烯提取物用95％乙醇溶解，于50～80℃滴加至包合辅料环糊精的饱和水溶液中，搅拌包合1～3h，放置室温后冷藏12～24h，过滤，35～45℃低温真空干燥8～12h，即得工业大麻总萜烯包合物。
16.进一步地，所述包合辅料为水溶解性较低或中等的低聚环糊精类物质，例如α、β、γ环糊精，或者c9、c10、c14环糊精。
17.进一步地，所述颗粒剂中按重量份数计包含工业大麻总萜烯包合物 8～12份、蔗糖480～520份、淀粉385～415份、打浆淀粉28～32份。
18.优选地，在本发明的一些实施例中，所述颗粒剂制备方法包括：称取处方量的工业大麻总萜烯包合物、蔗糖、淀粉，粉碎，过100目筛，并充分混合，将打浆淀粉制成10％的淀粉浆，放冷备用，搅拌下将淀粉浆加入到前述已混合的物料中，制成软材，过14目筛，得湿粒，干燥，整粒后分包。
19.进一步地，所述胶囊剂中按重量份数计包含工业大麻总萜烯包合物 14～16份、微晶纤维素24～26份、羧甲基淀粉钠24～26份、滑石粉0.9～1.1 份、聚维酮4.7～5.3份。
20.优选地，在本发明的一些实施例中，所述胶囊剂制备方法包括：按处方称取工业大麻总萜烯包合物，加入羧甲基淀粉钠和微晶纤维素，混合均匀，加入聚维酮溶液混合制成软材，过20目筛，得湿粒，干燥后用18目筛整粒，加入滑石粉，混合均匀，用胶囊灌装。
21.进一步地，所述片剂中按重量份数计包含工业大麻总萜烯包合物24～26 份、淀粉48～52份、微晶纤维素33～36份、羧甲基淀粉钠14～16份、硬脂酸镁0.75～0.85份，以及聚维酮k30溶液。
22.优选地，在本发明的一些实施例中，所述片剂制备方法包括：将淀粉、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、硬脂酸镁分别过80目筛；取聚维酮k30用无水乙醇制成3％的溶液，混均备用；按处方量称取工业大麻总萜烯包合物、淀粉、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠，混合均匀，加入3％聚维酮k30液制成软材，过20目筛，得湿粒；干燥后过18目筛，加入硬脂酸镁，混均后，压片。
23.与现有技术相比，本发明工业大麻总萜烯的提取纯化方法提取率/转移率高达99％，且可以获得总工业大麻萜烯含量≧95％的提取物，该提取物中不含其他挥发性的非萜烯类成分，减少了药用时其他成分的干扰，因此，以本发明所述方法提取的工业大麻总萜烯适于制备成药用制剂，且工艺环保，适合工业化扩大生产。
具体实施方式
24.为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本发明的实践了解到。应当理解，以下描述仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
25.本文中所用的术语“包含”、“包括”、“具有”、“含有”或其任何其它变形，意在覆盖非排它性的包括。例如，包含所列要素的组合物、步骤、方法、制品或装置不必仅限于那些要素，而是可以包括未明确列出的其它要素或此种组合物、步骤、方法、制品或装置所固有的要素。
26.当量、浓度、或者其它值或参数以范围、优选范围、或一系列上限优选值和下限优选值限定的范围表示时，这应当被理解为具体公开了由任何范围上限或优选值与任何范围下限或优选值的任一配对所形成的所有范围，而不论该范围是否单独公开了。例如，当公开了范围“1至5”时，所描述的范围应被解释为包括范围“1至4”、“1至3”、“1至2”、“1至2和4至 5”、“1至3和5”等。当数值范围在本文中被描述时，除非另外说明，否则该范围意图包括其端值和在该范围内的所有整数和分数。
27.本发明要素或组分前的不定冠词“一种”和“一个”对要素或组分的数量要求(即出现次数)无限制性。因此“一个”或“一种”应被解读为包括一个或至少一个，并且单数形式的要素或组分也包括复数形式，除非所述数量明显只指单数形式。
28.此外，下面所描述的术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不是必须针对相同的实施例或示例。而且，本发明各个实施方式中所涉及到的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互组合。
29.实施例1
30.一种工业大麻总萜烯的提取纯化方法，其包含以下步骤：
31.a)工业大麻药材粉末(不经烘烤处理的工业大麻叶、工业大麻花、工业大麻根、工业大麻杆芯、工业大麻籽粕中的一种或两种以上任意比例组合)100.00kg，加入8倍量的80％乙醇室温搅拌提取，提取液在60℃条件下减压浓缩得浓缩液；
32.b)将浓缩液加6倍量的热水分散后，冷却至室温后，通过离心分层，分离得上层液；
33.c)将上层液保温(温度90℃)后，进行分子蒸馏(压力：-0.1pa；温度：80℃；转速：200rpm；冷凝温度：10℃；蒸发面和冷凝面的距离： 20mm)，收集轻组分，得工业大麻萜烯粗提取物0.225kg；
34.d)取工业大麻萜烯粗提取物，加入8倍的蒸馏水，于100℃进行水蒸气蒸馏，用轻组分收集器收集，室温静置，收集上层，即得工业大麻总萜烯提取物0.053kg，所得总工业大麻萜烯含量99.24％，转移率99.90％。
35.实施例2
36.一种工业大麻总萜烯的提取纯化方法，其包含以下步骤：
37.a)工业大麻药材粉末(不经烘烤处理的工业大麻叶、工业大麻花、工业大麻根、工业大麻杆芯、工业大麻籽粕中的一种或两种以上任意比例组合)100.00kg，加入5倍量的
95％乙醇室温搅拌提取，提取液在50℃条件下减压浓缩得浓缩液；
38.b)将浓缩液加4倍量的热水分散后，冷却至室温后，通过离心分层，分离得上层液；
39.c)将上层液保温(温度80℃)后，进行分子蒸馏(压力：-0.01pa；温度：70℃；转速：180rpm；冷凝温度：5℃；蒸发面和冷凝面的距离： 5mm)，收集轻组分，得工业大麻萜烯粗提取物0.210kg；
40.d)取工业大麻萜烯粗提取物，加入3倍的蒸馏水，于100℃进行水蒸气蒸馏，用轻组分收集器收集，室温静置，收集上层，即得工业大麻总萜烯提取物0.052kg，所得总工业大麻萜烯含量98.90％，转移率99.56％。
41.实施例3
42.一种工业大麻总萜烯的提取纯化方法，其包含以下步骤：
43.a)工业大麻药材粉末(不经烘烤处理的工业大麻叶、工业大麻花、工业大麻根、工业大麻杆芯、工业大麻籽粕中的一种或两种以上任意比例组合)100.00kg，加入10倍量的50％乙醇室温搅拌提取，提取液在70℃条件下减压浓缩得浓缩液；
44.b)将浓缩液加8倍量的热水分散后，冷却至室温后，通过离心分层，分离得上层液；
45.c)将上层液保温(温度95℃)后，进行分子蒸馏(压力：-0.99pa；温度：95℃；转速：220rpm；冷凝温度：15℃；蒸发面和冷凝面的距离： 25mm)，收集轻组分，得工业大麻萜烯粗提取物0.238kg；
46.d)取工业大麻萜烯粗提取物，加入10倍的蒸馏水，于100℃进行水蒸气蒸馏，用轻组分收集器收集，室温静置，收集上层，即得工业大麻总萜烯提取物0.055kg，所得总工业大麻萜烯含量99.12％，转移率99.89％。
47.对比例1
48.选用实施例1步骤a中的相同重量的工业大麻药材，加入8倍量的蒸馏水，于100℃进行水蒸气蒸馏，用轻组分收集器收集，室温静置，收集上层，得工业大麻萜烯提取物。
49.分别检测实施例1～实施例3和对比例1所制备的工业大麻萜烯(工业大麻萜烯精油)的含量和转移率。检测结果如表1所示。
50.表1不同分离制备方法的效果对比
[0051][0052][0053]
由实施例1-3可以看出，在本发明技术方案的参数范围内变化提取纯化条件，均能够达到比较一致的技术效果；且通过与对比例1结果对比，该方法技术效果更好。
[0054]
实施例4
[0055]
工业大麻总萜烯包合物的制备，其包含以下步骤：
[0056]
(1)按实施例1的提取纯化方法获得总工业大麻萜烯含量≧95％的工业大麻总萜烯提取物；
[0057]
(2)将工业大麻总萜烯提取物用适量95％乙醇溶解，于60℃，滴加至α环糊精的饱和水溶液中，搅拌包合1.5h，放置室温后冷藏18h，过滤，40℃低温真空干燥10h，即得工业大麻总萜烯包合物。
[0058]
实施例5
[0059]
一种包含工业大麻总萜烯提取物的颗粒剂，制备方法为：按实施例4 所述包合技术制备工业大麻总萜烯包合物，然后将其与药学中可接受的载体制成颗粒剂，即称取工业大麻总萜烯包合物、蔗糖、淀粉，粉碎，过100 目筛，并充分混合30min；将打浆淀粉制成10％的淀粉浆，放冷备用，搅拌下将淀粉浆加入到已混合的物料中，制成软材，过14目筛，得湿粒，在40℃干燥6h，整粒后，分包成1000包。
[0060]
其中，所述1000包颗粒剂中包含：
[0061][0062]
实施例6
[0063]
一种包含工业大麻总萜烯提取物的胶囊剂，制备方法为：按实施例4 所述包合技术制备工业大麻总萜烯包合物，然后将其与药学中可接受的载体制成胶囊剂，即称取工业大麻总萜烯包合物，加入羧甲基淀粉钠和微晶纤维素，混合均匀，加入3.5％聚维酮溶液混合制成软材，过20目筛，得湿粒；于40℃干燥4h后，用18目筛整粒，加入滑石粉，混合均匀，用胶囊灌装得1000粒。
[0064]
其中，所述1000粒胶囊剂中包含：
[0065][0066]
实施例7
[0067]
一种包含工业大麻总萜烯提取物的片剂，制备方法为：按实施例4所述包合技术制备工业大麻总萜烯包合物，然后将其与药学中可接受的载体制成片剂，即取淀粉、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、硬脂酸镁分别过80目筛；取聚维酮k30用无水乙醇制成3％的溶液，混均备用；称取工业大麻总萜烯包合物、淀粉、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠，混合均匀，加入3％聚维酮k30液制成软材，过20目筛，得湿粒；于40℃干燥4h后，过18目筛，加入硬脂酸镁，混均后，用直径8mm浅弧冲压成1000片。
[0068]
其中，所述1000片片剂中包含：
[0069][0070][0071]
本领域的技术人员容易理解，以上所述仅为本发明的实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本
发明的保护范围之内。