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一种糖尿病合并无症状心肌缺血的诊断靶标的制作方法

时间:2022-02-06 阅读: 作者:专利查询

一种糖尿病合并无症状心肌缺血的诊断靶标的制作方法

1.本发明属于糖尿病技术领域,尤其涉及一种糖尿病合并无症状心肌缺血的诊断靶标。


背景技术:

2.糖尿病合并无症状心肌缺血是糖尿病并发症中的一种常见疾病,该疾病的发病率较高,患者在发病过程中会出现多处心血管功能性损伤,患者由于糖尿病发生心肌缺血的时候,会出现心律失常,心源性休克,严重时患者会出现休克。由于该病发病时,临床上没有明显的相关典型症状,因此容易发生漏诊的情况。因此,实现糖尿病合并无症状心肌缺血的早期诊断和早期治疗具有重要的意义。


技术实现要素:

3.本发明的目的在于提供一种可以有效诊断糖尿病合并无症状心肌缺血的诊断靶标。
4.为了有效的实现上述目的,本发明提供了如下技术方案:首先,本发明提供了一种用于检测rp11-690j15.1表达水平的试剂在制备糖尿病合并无症状心肌缺血诊断试剂盒中的应用。
5.优选地,所述试剂包括检测lncrp11-690j15.1表达水平的引物,所述引物的序列如序列表中的seq id no.2和seq id no.3所示。
6.优选地,所述试剂还包括检测检测gapdh表达水平的引物,所述引物的序列如序列表如seq id no.4和seq id no.5所示。
7.其次,本发明提供了用于检测lncrp11-690j15.1表达水平的试剂在制备糖尿病合并无症状心肌缺血患者的预后诊断试剂盒中的应用。
8.优选地,所述试剂包括检测lncrp11-690j15.1表达水平的引物,所述引物的序列如序列表中的seq id no.2和seq id no.3所示。
9.优选地,所述试剂还包括检测检测gapdh表达水平的引物,所述引物的序列如序列表如seq id no.4和seq id no.5所示。
10.其次,本发明提供了一种用于诊断糖尿病合并无症状心肌缺血的试剂盒,所述试剂盒包括检测lncrp11-690j15.1表达水平的引物,所述引物的序列如序列表中的seq id no.2和seq id no.3所示;所述lncrp11-690j15.1在糖尿病合并症状心肌缺血患者的外周血血浆中高表达。
11.最后,本发明提供了一种用于诊断糖尿病合并无症状心肌缺血患者预后水平的试剂盒,所述试剂盒包括检测lncrp11-690j15.1表达水平的引物,所述引物的序列如序列表中的seq id no.2和seq id no.3所示;所述lncrp11-690j15.1在预后好的糖尿病合并症状心肌缺血患者的外周血中低表达。
本发明的有益效果是:本发明提供了lncrp11-690j15.1在作为判断患者是否患有糖尿病合并无症状心肌缺血的诊断靶标的新用途。同时,本发明提供了lncrp11-690j15.1在作为判断糖尿病合并无症状心肌缺血患者预后效果中的新用途。使用本发明所提供的诊断靶标来进行诊断时,具有优异的诊断价值。
附图说明
12.图1 lncrp11-690j15.1在正常组,患者组和恢复组中的表达情况;图2 lncrp11-690j15.1作为标志物在判断患者是否患有糖尿病合并无症状心肌缺血时的roc曲线;图3 lncrp11-690j15.1作为标志物在判断糖尿病合并无症状心肌缺血患者预后效果时的roc曲线。
具体实施方式
13.为能清楚说明本方案的技术特点,下面通过具体实施方式,对本方案进行阐述。本发明所提供的每个实施例是用于解释本发明而非限制本发明。本领域技术人员在本发明基础上进行的修改和变化均不背离本发明的范围。
14.实施例1设计lncrp11-690j15.1和内参基因gapdh的引物(1)根据筛选出的lncrp11-690j15.1的序列(seq id no.1)设计引物,设计的引物序列如下:上游引物序列:accaatacaagacgcctgca(seq id no.2);下游引物序列:gcatgacaacagctgtgtgg,(seq id no.3);(2)设计内参基因gapdh的引物,设计的引物序列如下:上游引物序列:gatttggtcgtattgggcgc(seq id no.4);下游引物序列:cttcccgttctcagccatgt(seq id no.5);实施例2(1)提取外周血血浆:使用真空抗凝采血管采集晨起空腹静脉血,提取的血浆共分为三组,分别是正常组50例(正常人血浆样本),患者组50例(诊断为糖尿病合并无症状心肌缺血的患者),恢复组30例(患者经降糖和降压治疗后病情显著改善的患者);(2)根据invitrogen公司的trizol ls提取试剂的说明书提取各个样本的rna;(3)根据takara公司的逆转录试剂盒的说明书,将rna逆转录为cdna;(4)根据takara公司的sybr-green染料法定量pcr试剂盒的说明书,检测样本中的lncrp11-690j15.1的表达量,pcr程序设置为95℃ 5min 1个循环,95℃ 15s,60℃ 40s 40个循环;(5)采用2-δδct
相对定量法进行数据的处理,得到的实验结果被展示于图1中。
15.如图1所示,患者组的lncrp11-690j15.1的相对表达量为2.27
±
0.81,恢复组的相对表达量为1.40
±
0.39,患者组与正常组相比,lncrp11-690j15.1的相对表达量明显提高,而恢复组的lncrp11-690j15.1的相对表达量则相较于患者组发生显著降低;
上述结果表明可以,通过检测lncrp11-690j15.1的相对表达量可以诊断患者是否患有糖尿病合并无症状心肌缺血疾病,同时,在治疗糖尿病合并无症状心肌缺血患者后,可以通过检测lncrp11-690j15.1的相对表达量辅助检测患者的预后效果。
16.实施例2(1)绘制患者组和正常组的roc曲线,得到的曲线如图2所示;(2)绘制患者组和恢复组的roc曲线,得到的曲线如图3所示;如图2所示,当将lncrp11-690j15.1作为诊断标志物诊断患者是否患有糖尿病合并无症状心肌缺血疾病时,auc值为0.9160,具有优异的诊断价值。
17.如图3所示,当将lncrp11-690j15.1作为诊断标志物诊断患者的糖尿病合并无症状心肌缺血疾病预后效果时,auc值为0.8257,具有优异的诊断价值。


技术特征:
1.用于检测lncrp11-690j15.1表达水平的试剂在制备糖尿病合并无症状心肌缺血诊断试剂盒中的应用。2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述试剂包括检测lncrp11-690j15.1表达水平的引物,所述引物的序列如序列表中的seq id no.2和seq id no.3所示。3.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述试剂还包括检测gapdh表达水平的引物,所述引物的序列如序列表如seq id no.4和seq id no.5所示。4.用于检测lncrp11-690j15.1表达水平的试剂在制备糖尿病合并无症状心肌缺血患者的预后诊断试剂盒中的应用。5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述试剂包括检测lncrp11-690j15.1表达水平的引物,所述引物的序列如序列表中的seq id no.2和seq id no.3所示。6.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述试剂还包括检测检测gapdh表达水平的引物,所述引物的序列如序列表如seq id no.4和seq id no.5所示。7.一种用于诊断糖尿病合并无症状心肌缺血的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括检测lncrp11-690j15.1表达水平的引物,所述引物的序列如序列表中的seq id no.2和seq id no.3所示;所述lncrp11-690j15.1在糖尿病合并症状心肌缺血患者的外周血血浆中高表达。8.一种用于诊断糖尿病合并无症状心肌缺血患者预后水平的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括检测lncrp11-690j15.1表达水平的引物,所述引物的序列如序列表中的seq id no.2和seq id no.3所示;所述lncrp11-690j15.1在预后好的糖尿病合并症状心肌缺血患者的外周血中低表达。

技术总结
本发明提供了一种糖尿病合并无症状心肌缺血的诊断靶标,属于糖尿病技术领域。本发明所提供的诊断靶标在糖尿病合并无症状心肌缺血患者的外周血中高表达,因此通过检测其表达量可以有效的辅助诊断患者是否患有糖尿病合并无症状心肌缺血疾病,同时本发明所提供的诊断靶标可以用于辅助判断糖尿病合并无症状心肌缺血患者的预后效果。肌缺血患者的预后效果。肌缺血患者的预后效果。


技术研发人员:部帅 桑素珍 徐云生 陈守强 李璐 刘媛 李幸 赵振锋 徐亮 毕思玲
受保护的技术使用者:山东中医药大学第二附属医院
技术研发日:2021.12.02
技术公布日:2022/1/28