用于河道湖泊生物修复土著微生物的定向扩增方法及应用与流程

1.本发明涉及环境修复和污水处理技术领域，尤其是涉及用于河道湖泊生物修复土著微生物的定向扩增方法及应用。

背景技术：

2.目前，河道水质维护和修复方法主要有物理法、化学法和生物法，物理法包括河道曝气、打捞、投放吸附剂、底泥屏蔽、换水稀释等，投资大，运行费用高，难以持久；化学法主要是向河湖投放氧化剂、絮凝剂、固化剂等化学药剂，存在较大二次污染风险；生物修复就是向水体或底泥投放微生物制剂或微生物促生剂、酶制剂等，强化微生物对污染物降解，增强河湖自净能力，维持河道洁净好氧生态系统。生物修复是一种原位修复技术，不需要实施大型工程，投资小，效率高，环境友好，无二次污染，已成功应用于土壤、地下水、河道和近海洋面的污染治理。
3.生物修复技术主要包括生物强化技术和生物促生技术，前者强调直接投加微生物制剂，后者重视微生物促生剂、复合酶制剂，刺激土著微生物生长，强化对污染物降解，提高水质。实际工程应用中，往往将二者结合起来，既投放微生物，增加高效降解微生物生物量，又投加促生药剂，为微生物繁殖和降解创造有利环境条件，以加快生物修复过程。生物强化技术采用的微生物制剂多为外源筛选，甚至采用生物工程手段构建的微生物制剂，存在生物安全性问题，外源微生物投放到水中，往往竞争不过土著微生物，难以定植，虽然功能强大，效果难以持久。土著微生物在水环境治理中具有外源微生物不具备的独特优势，土著微生物源于需要治理河道、湖泊的底泥，是自然界长期选择的结果，其代谢活动直接影响水环境物质循环和生态平衡，已完全适应环境，一旦刺激其繁殖，或扩增至一定种群数量，就可以有效发挥水质净化功能，而外源微生物是实验室筛选、分离、扩增的商业产品，对自然环境适应性不如土著微生物，也难以定植到自然环境中；自然界物质转化是由多种功能土著微生物种群或群落协同作用，共同完成的，而外源微生物只是某种或几种微生物组成的功能微生物种群，按现有技术，目前生产的复合微生物产品最多也就由几十种菌种组成，相对于自然界庞大的微生物种群数量来说，几乎是可以忽略的，因此，外源微生物制剂在自然环境中难以发挥协作优势，还存在一定生物安全性问题和生态风险。而常规的土著微生物扩培方法往往是采用实验室筛选、分离、扩增程序，也只是针对某种功能微生物，难以选到特定的功能微生物菌群或群落，在生物修复工程中作用受到一定限制。专利cn10739981213b采用脱氮硫杆菌菌粉，复合芽孢杆菌菌粉，复合酵母菌粉等，制成复合微生物制剂，用于黑臭河道治理，能快速改善黑臭河流的水体质量与去除底泥黑臭，但实验室培养的外源微生物菌种，虽然复合微生物菌群比单个菌株效果好，但外源微生物难以适应自然河道，也难以定植到自然生态系统的功能种群或群落中，其水质净化效果难以持久；申请号为201911022181.7的专利公开了一种土著氮转化微生物富集培养的方法及其治理的应用，采集需要治理河道不同位置底泥，将其转移至氮转化微生物富集培养基中，制得一定量氮转化微生物，通过3-5次的转接培养获得转化基体，放入培养罐中进行扩增，
达到土著微生物制剂，通过河水测试处理效果。但该方案制得的土著氮转化微生物制剂主要针对氮的转化，而自然水体中氮转化实际上是一个复杂过程，至少设计到硝化和反硝化二大类微生物群落，而这二大类微生物群落选择方式和富集培养基完全不同，很难在一个选择培养系统里同时生产出这二类功能微生物群落(硝化细菌为自养菌，反硝化细菌为兼氧异养菌)，各个取样点分开筛选和培养，难以富集到所需的功能微生物菌群；申请号为201910101603.3的专利公开了一种培养土著微生物高效去除水体氨氮的方法，从目标河道中采集的底泥或已挂膜的填料溶解于目标水体后过筛，加入二次培养基分别原位曝气培养24～48h和24h，以使土著微生物富集，最后将培养得到的菌液投加至目标河道中，该技术方案主要是富集培养出除去氨氮的功能微生物种群和群落，但其培养基设计含有大量碳源，在此培养方案中，很难富集到自养硝化细菌群落，在实际工程中难以发挥作用。需要开发出一种用于河道湖泊生物修复的土著微生物定向扩增方法，根据河道湖泊生态修复中水质净化指标的要求，扩增出适合河道水体、底泥的不同土著功能微生物种群或群落。

技术实现要素：

4.针对外源微生物制剂环境适应性、生物安全、价格高、种群单一、效果持续性差等问题，以及土著微生物制剂生产过程往往是针对单一功能微生物，没有定向扩增和功能微生物种群或群落富集筛选，应用效率低等问题，本发明的目的是提供一种用于河道湖泊生物修复土著微生物的定向扩增方法及应用。本发明目标是针对河道湖泊水质净化指标，通过定向扩增，富集筛选出功能强大的硝化细菌菌群、好氧异养菌群，反硝化细菌菌群等三大土著微生物功能菌群，配合河道曝气、底泥生物修复等技术，应用于河道、湖泊水质净化和生态修复。
5.土著微生物制剂取自河道底泥，适应性强，可直接定植在河道湖泊生态系统功能微生物种群或群落中，实现高效水质净化和底泥修复，效果持续性好；无生物安全性问题，不存在生物入侵和生态风险等问题；生产价格低，可广泛应用于黑臭河道治理、城市河道水质提升，根据河道湖泊具体情况，配合河道曝气、底泥生物修复等技术，实现“一河一策”、“一河一菌”，提高河道治理效率。
6.本发明的技术构思如下：
7.与河道湖泊水质净化有关的微生物菌群主要为硝化细菌菌群，反硝化细菌菌群和好氧异养微生物菌群等三大功能微生物种群或群落。硝化细菌菌群主要用于除去水体中氨氮；反硝化细菌菌群主要用于河道底泥厌氧层反硝化除去底泥和底泥间歇水中有机物，一般和硝酸钙配合使用；好氧异养微生物菌群主要用于除去水体或底泥有机物，以氧气作为电子受体，因此和曝气、过氧化钙等增氧措施配合使用。针对硝化细菌菌群，反硝化细菌菌群和好氧异养微生物菌群等三大功能微生物种群或群落，设计功能性土著微生物菌群富集培养基，以需要治理的河道湖泊底泥作为土著微生物种源，在曝气(硝化细菌菌群和好氧异养微生物菌群)或搅拌(反硝化细菌菌群)条件下，富集和筛选所需的功能微生物菌群，将培养出的土著微生物菌群投放到采集的治理河道河水中进行测试，确定功能性土著微生物菌群水质净化能力，通过絮凝沉淀，浓缩功能微生物菌群，通过二级培养浓缩，培养，形成三大功能性土著微生物菌群原种。功能性土著微生物菌群原种加入到培养罐
中，添加相应的扩大培养基，对土著氮转化微生物进行大规模的培养，最终形成三大功能性土著微生物菌群产品，液体产品可直接用于河道湖泊水质改善，如果需要用于底泥修复，可加入固体负载剂和粘结剂，压片造粒，制成底泥修复微生物制剂产品。
8.本发明是采用功能性土著微生物菌群富集培养基，以需要治理的河道湖泊底泥作为土著微生物种源，在曝气(硝化细菌菌群和好氧异养微生物菌群)或搅拌(反硝化细菌菌群)条件下，富集和筛选所需硝化细菌菌群，反硝化细菌菌群和好氧异养微生物菌群等三大功能微生物种群或群落，通过絮凝沉淀，浓缩功能微生物菌群，通过二级浓缩，培养，形成三大功能性土著微生物菌群原种。功能性土著微生物菌群原种加入到培养罐中，添加相应的扩大培养基，对功能性土著微生物菌群进行大规模的培养，最终形成三大功能性土著微生物菌群产品，液体产品可直接用于河道湖泊水质改善；如果需要用于底泥修复，可加入固体负载剂、配重剂和粘结剂，压片造粒，制成底泥修复微生物制剂产品。
9.本发明的目的可以通过以下技术方案来实现：
10.本发明的目的是提供一种用于河道湖泊生物修复的土著微生物定向扩增方法，包括以下步骤：
11.(1)底泥采集及清理：从河道湖泊采集底泥，清理除去底泥中垃圾和砂；
12.(2)富集培养：将步骤(1)得到的清理后的底泥通过富集培养基一次培养，得到土著微生物第一原种，每种土著微生物第一原种筛选2-3组；
13.(3)二次培养：将步骤(2)筛选出的土著微生物第一原种作为菌种，再次加入富集培养基二次培养，得到土著微生物第二原种；
14.(4)扩大培养：将步骤(3)得到的土著微生物第二原种作为菌种，添加到扩大培养基中，然后利用培养罐培养，最终形成功能性土著微生物菌群产品。
15.在本发明的一个实施方式中，所述用于河道湖泊生物修复的土著微生物包括硝化细菌菌群、反硝化细菌菌群、好氧异养细菌菌群。
16.在本发明的一个实施方式中，步骤(1)中，采集泥水界面以下20-40mm的底泥，所述底泥颗粒物小于25μm。
17.在本发明的一个实施方式中，步骤(2)中，硝化细菌菌群富集培养基各组分、配比及培养方式如下：
[0018][0019]
[0020]
培养方式：曝气至溶氧保持4mg/l以上，加碳酸钙使ph保持7-8；培养3-7 天。
[0021]
在本发明的一个实施方式中，步骤(2)中，反硝化细菌菌群富集培养基各组分、配比及培养方式如下：
[0022][0023]
培养方式：搅拌培养15天左右，直至ph降到3-4。
[0024]
在本发明的一个实施方式中，步骤(2)中，好氧异养细菌菌群富集培养基各组分、配比及培养方式如下：
[0025][0026]
培养方式：曝气至溶氧保持4mg/l以上，加碳酸钙使ph保持7-7.3，培养3-5 天。
[0027]
在本发明的一个实施方式中，步骤(2)中，所述筛选为高效微生物菌群的筛选，即，
[0028]
利用河水，加入葡萄糖、磷酸氢二钾，使河水cod为200-300mg/l，tp为 3-7mg/l，采用曝气处理，以此筛选高效好氧异养菌菌群；
[0029]
用硫酸铵替代葡萄糖，使其氨氮为30-50mg/l，采用曝气处理，以此筛选出高效功能性硝化细菌菌群；
[0030]
河水加入硝酸钠替代硫酸铵，使其硝态氮浓度为30-50mg/l，同时加入葡萄糖，使其cod达到100-200mg/l，以此采用搅拌处理，以此筛选出反硝化细菌菌群。
[0031]
以三种筛选出的功能土著微生物菌群为菌种，再次加入上述相应的浓缩培养基，进行二次培养。
[0032]
在本发明的一个实施方式中，步骤(2)中，底泥中硝化细菌菌群经富集培养基一次培养后，还进行絮凝沉淀浓缩，即加入pam絮凝剂，沉淀浓缩硝化细菌菌群，得到浓缩液；
并将此浓缩液作为硝化细菌菌群第一原种；
[0033]
步骤(3)中，硝化细菌菌群第一原种经富集培养基二次培养后，还进行絮凝沉淀浓缩，即加入絮凝剂，沉淀浓缩硝化细菌菌群，得到浓缩液；并将此浓缩液作为硝化细菌菌群第二原种。
[0034]
在本发明的一个实施方式中，步骤(4)中，硝化细菌菌群扩大培养基各组分、配比及培养方式如下：
[0035][0036]
培养方式：曝气至溶氧保持4mg/l以上，加碳酸钙使ph保持7-8，培养3-7 天。
[0037]
在本发明的一个实施方式中，步骤(4)中，反硝化细菌菌群扩大培养基各组分、配比及培养方式如下：
[0038][0039][0040]
培养方式：搅拌培养10-20天。
[0041]
在本发明的一个实施方式中，步骤(4)中，好氧异养细菌菌群扩大培养基各组分、配比及培养方式如下：
[0042][0043]
培养方式：曝气至溶氧保持4mg/l以上，调节ph至7-7.3，培养3-10天。
[0044]
本发明的另一个目的是提供一种用于河道湖泊生物修复的土著微生物菌群产品的应用，所述土著微生物菌群产品用于河道水体水质该善，或用于河道底泥修复。
[0045]
在本发明的一个实施方式中，所制成的三大功能性土著微生物菌群产品可直接用于河道水体水质该善，也可用于河道底泥修复。
[0046]
用于底泥修复时，硝化细菌土著微生物菌群产品中，加入80％沸石粉，0.5％壳聚糖冰醋酸溶液，20％硅藻土，混合均匀，压制成直径10mm，高4mm片剂，用于河道底泥泥水界面表层底泥修复；好氧异养细菌土著微生物菌群产品中，加入 80％沸石粉，0.5％壳聚糖冰醋酸溶液，20％硅藻土，混合均匀，压制成直径10mm，高4mm片剂，用于河道底泥泥水界面表层底泥修复；反硝化细菌土著微生物菌群产品中，加入40％沸石粉，0.5％壳聚糖冰醋酸溶液，60％砂粒，混合均匀，压制成直径20mm，高20mm片剂，用于河道底泥泥水界面底层底泥修复。
[0047]
在本发明的一个实施方式中，
[0048]
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
[0049]
(1)本发明中微生物种源来自于待处理河道湖泊的底泥，属于土著微生物，避免了外来菌种的引入，不存在生物安全性问题和生态风险。
[0050]
(2)土著微生物对治理河道湖泊具有较强适应性，可迅速定植于河湖生态系统中，净化水质，修复底泥，具有和高效性和可持续性。
[0051]
(3)通过富集培养基配方和微生物培养工艺调整，实现土著微生物定向扩增，并针对性富集筛选出硝化细菌菌群、反硝化细菌菌群、好氧异养菌菌群等三大功能性土著微生物菌群产品，并将其应用河湖治理。
[0052]
(4)本发明通过对取自本土环境的土著微生物进行分阶段培养，先通过二级富集培养得到浓缩功能性土著微生物原种，然后，通过恒温培养罐扩培，保证菌液的浓度，提高菌液在实际应用于目标河湖时对水体的处理效果。
[0053]
(5)土著微生物以原生底泥25μm以下颗粒物为载体，载体比表面积大，其固定的微生物生物量高，因此对污染物的去除速率快、去除负荷高、效果维持时间长，能迅速改善目标河道的生态环境，提高自净能力。
[0054]
(6)制成的土著微生物产品可直接投放于河湖水体中，结合曝气增氧、生态护岸等措施，实现水质净化，也可和促生剂、配重剂、粘结剂等结合，制成底泥修复剂，用于河道底泥修复。
具体实施方式
[0055]
本发明提供一种用于河道湖泊生物修复的土著微生物定向扩增方法，包括以下步骤：
[0056]
(1)底泥采集及清理：从河道湖泊采集底泥，清理除去底泥中垃圾和砂；
[0057]
(2)富集培养：将步骤(1)得到的清理后的底泥通过富集培养基一次培养，得到土著微生物第一原种，每种土著微生物第一原种选择2-3组；
[0058]
(3)二次培养：将步骤(2)筛选出的土著微生物第一原种作为菌种，再次加入富集培养基二次培养，得到土著微生物第二原种；
[0059]
(4)扩大培养：将步骤(3)得到的土著微生物第二原种作为菌种，添加到扩大培养基中，然后利用培养罐培养，最终形成功能性土著微生物菌群产品。
[0060]
在本发明的一个实施方式中，所述用于河道湖泊生物修复的土著微生物包括硝化细菌菌群、反硝化细菌菌群、好氧异养细菌菌群。
[0061]
在本发明的一个实施方式中，步骤(1)中，采集泥水界面以下20-40mm的底泥，所述底泥颗粒物小于25μm。
[0062]
在本发明的一个实施方式中，步骤(2)中，硝化细菌菌群富集培养基各组分、配比及培养方式如下：
[0063][0064]
培养方式：曝气至溶氧保持4mg/l以上，加碳酸钙使ph保持7-8；培养3-7 天。
[0065]
在本发明的一个实施方式中，步骤(2)中，反硝化细菌菌群富集培养基各组分、配比及培养方式如下：
[0066][0067]
培养方式：搅拌培养15天左右，直至ph降到3-4。
[0068]
在本发明的一个实施方式中，步骤(2)中，好氧异养细菌菌群富集培养基各组分、配比及培养方式如下：
[0069][0070][0071]
培养方式：曝气至溶氧保持4mg/l以上，加碳酸钙使ph保持7-7.3，培养3-5 天。
[0072]
在本发明的一个实施方式中，步骤(2)中，所述筛选为高效微生物菌群的筛选，即利用河水，加入葡萄糖、磷酸氢二钾，使河水cod为200-300mg/l，tp为 3-7mg/l，采用曝气处理，以此筛选高效好氧异养菌菌群；用硫酸铵替代葡萄糖，使其氨氮为30-50mg/l，采用曝气处理，以此筛选出高效功能性硝化细菌菌群；
[0073]
河水加入硝酸钠替代硫酸铵，使其硝态氮浓度为30-50mg/l，同时加入葡萄糖，使其cod达到100-200mg/l，以此采用搅拌处理，以此筛选出反硝化细菌菌群。
[0074]
以三种筛选出的功能土著微生物菌群为菌种，再次加入上述相应的浓缩培养基，进行二次培养。
[0075]
在本发明的一个实施方式中，步骤(2)中，底泥中硝化细菌菌群经富集培养基一次培养后，还进行絮凝沉淀浓缩，即加入pam絮凝剂，沉淀浓缩硝化细菌菌群，得到浓缩液；并将此浓缩液作为硝化细菌菌群第一原种；
[0076]
步骤(3)中，硝化细菌菌群第一原种经富集培养基二次培养后，还进行絮凝沉淀浓缩，即加入pam絮凝剂，沉淀浓缩硝化细菌菌群，得到浓缩液；并将此浓缩液作为硝化细菌菌群第二原种。
[0077]
在本发明的一个实施方式中，步骤(4)中，硝化细菌菌群扩大培养基各组分、配比
及培养方式如下：
[0078][0079]
培养方式：曝气至溶氧保持4mg/l以上，加碳酸钙使ph保持7-8，培养3-7 天。
[0080]
在本发明的一个实施方式中，步骤(4)中，反硝化细菌菌群扩大培养基各组分、配比及培养方式如下：
[0081][0082]
培养方式：搅拌培养10-20天。
[0083]
在本发明的一个实施方式中，步骤(4)中，好氧异养细菌菌群扩大培养基各组分、配比及培养方式如下：
[0084]
[0085]
培养方式：曝气至溶氧保持4mg/l以上，调节ph至7-7.3，培养3-10天。
[0086]
本发明提供一种用于河道湖泊生物修复的土著微生物菌群产品的应用，所述土著微生物菌群产品用于河道水体水质该善，或用于河道底泥修复。
[0087]
在本发明的一个实施方式中，所制成的三大功能性土著微生物菌群产品可直接用于河道水体水质该善，也可用于河道底泥修复。
[0088]
用于底泥修复时，硝化细菌土著微生物菌群产品中，加入80％沸石粉，0.5％壳聚糖冰醋酸溶液，20％硅藻土，混合均匀，压制成直径10mm，高4mm片剂，用于河道底泥泥水界面表层底泥修复；好氧异养细菌土著微生物菌群产品中，加入 80％沸石粉，0.5％壳聚糖冰醋酸溶液，20％硅藻土，混合均匀，压制成直径10mm，高4mm片剂，用于河道底泥泥水界面表层底泥修复；反硝化细菌土著微生物菌群产品中，加入40％沸石粉，0.5％壳聚糖冰醋酸溶液，60％砂粒，混合均匀，压制成直径20mm，高20mm片剂，用于河道底泥泥水界面底层底泥修复。
[0089]
下面结合具体实施例对本发明进行详细说明。
[0090]
从广州某河道采集的泥水界面以下20-40mm底泥，利用2mm和25μm筛子过筛，分别除去底泥中垃圾和砂，沉淀24h，收集沉积物，得到土著微生物种源。
[0091]
实施例1
[0092]
本实施例提供一种土著硝化细菌菌群的定向扩增方法。
[0093]
(1)富集培养
[0094]
取河水10kg，加入1kg经过清理的河道湖泊底泥，加入硝化细菌菌群富集培养基，进行培养，
[0095]
硝化细菌菌群富集培养基：
[0096][0097]
10kg水中加入：曝气至溶氧保持4mg/l以上，加碳酸钙使ph保持7-8，培养 3-7d，待河水中氨氮下降到20mg/l以下，加入0.5mg/l絮凝剂，沉淀，收集沉淀物。
[0098]
(2)扩大培养
[0099]
土著硝化细菌菌群原种浓缩液按10％加入相应的扩大培养基加入到20kg培养罐中，添加相应的浓缩培养基，对功能性土著微生物菌群进行大规模的培养，最终形成功能性土著微生物菌群产品。
[0100]
硝化细菌菌群扩大培养基：
[0101]
20kg水中加入：
[0102][0103][0104]
曝气至溶氧保持4mg/l以上，加碳酸钙使ph保持7-8，培养3-7d，待河水中氨氮下降到20mg/l以下，加入0.5mg/l絮凝剂，沉淀，收集沉淀物。
[0105]
(3)河水处理试验
[0106]
取待处理河水20kg，加入一定量氯化铵，使其氨氮浓度达到10mg/l，调节为试验河水；加入100mg/l液体土著硝化细菌菌群浓缩液，曝气使河水溶氧达到4mg/l，以不投加硝化细菌试验河水为对照，每12h取样测试氨氮。
[0107]
表1河水处理实验结果
[0108] 012243648加土著微生物104.21.30.70.3对照109.18.78.98.5
[0109]
从表1可以看出，投加土著硝化细菌菌群能显著降低河水氨氮，24h河水氨氮由10mg/l降至1.3mg/l，达到地表4标准，48h内河水氨氮降至0.3mg/l以下。而未投加土著微生物河水随经过曝气，氨氮浓度基本不变，表明，按本发明生产的土著硝化细菌菌群能显著降低河道水体氨氮，
[0110]
实施例2
[0111]
本实施例提供一种土著反硝化细菌菌群的定向扩增方法。
[0112]
(1)富集培养
[0113]
取河水10kg，加入1kg经过清理的河道湖泊底泥，加入反硝化细菌菌群富集培养基，进行培养，
[0114]
反硝化细菌菌群富集培养基：10kg水中加入：
[0115]
[0116][0117]
搅拌，培养15d左右，至ph降到3-4，加入0.5mg/l絮凝剂，沉淀，收集沉淀物。
[0118]
将沉积物全部投入反硝化细菌菌群富集培养基，二次培养，不用浓缩得到反硝化细菌菌群原种。
[0119]
(2)扩大培养
[0120]
土著反硝化细菌菌群原种浓缩液按20％加入相应的扩大培养基加入到20kg培养罐中，添加相应的浓缩培养基，对功能性土著微生物菌群进行大规模的培养，最终形成功能性土著微生物菌群产品。
[0121]
反硝化细菌菌群扩大培养基：20kg水中加入：
[0122][0123]
搅拌，培养10-20d，待河水中ph下降到3-4时，得到反硝化细菌菌群产品。
[0124]
(3)河水处理试验
[0125]
取待处理河水20kg，加入一定量硝酸钙，使其硝态氮浓度达到20mg/l，加入一定量葡萄糖，使其cod达到100mg/l，调节为试验河水；加入100mg/l液体土著反硝化细菌菌群产品，搅拌，以不投加硝化细菌试验河水为对照，每6h取样测试 cod。
[0126]
表2河水处理实验结果
[0127] 06121824加土著微生物10067.241.521.715.3对照10093.187.288.783.4
[0128]
从表2可以看出，投加土著反硝化细菌菌群能有效利用硝态氮，除去水体中cod，18h河水cod由100mg/l降至21.7mg/l，达到地表4标准，24h内河水氨氮降至15.3mg/l以下。而未投加土著微生物河水，cod浓度基本不变，表明，按本发明生产的土著反硝化细菌菌群能显著激活河道反硝化反应，降低河道水体cod，能应用于黑臭河道治理和城市河道水质提升工程中。
[0129]
实施例3
[0130]
本实施例提供一种土著好氧异养细菌菌群的定向扩增方法。
[0131]
(1)富集培养
[0132]
取河水10kg，加入1kg经过清理的河道湖泊底泥，加入好氧异养细菌菌群富集培养基，进行富集培养，
[0133]
好氧异养细菌菌群富集培养基：10kg水中加入：
[0134][0135]
曝气至溶氧保持4mg/l以上，培养15d左右，调ph至7-7.3，加入0.5mg/l絮凝剂，沉淀，收集沉淀物。
[0136]
将沉积物全部投入好氧异养细菌菌群富集培养基，二次培养，不用浓缩得到好氧异养细菌菌群原种。
[0137]
(2)扩大培养
[0138]
好氧异养细菌菌群原种按20％加入相应的扩大培养基加入到20kg培养罐中，添加相应的浓缩培养基，对功能性土著微生物菌群进行大规模的培养，最终形成功能性土著微生物菌群产品
[0139]
好氧异养细菌菌群扩大培养基：20kg水中加入：曝气至溶氧保持4mg/l以上，调ph至7-7.3，培养3-10d。
[0140][0141][0142]
曝气至溶氧保持4mg/l以上，调ph至7-7.3，培养15d，得到好氧异养细菌菌群产品。
[0143]
(3)河水处理试验
[0144]
取待处理河水20kg，加入一定量葡萄糖，使其cod浓度达到100mg/l，调节为试验河水；加入100mg/l好氧异养细菌菌群产品，曝气使河水溶氧达到4mg/l，以不投加好氧异养细菌菌群产品试验河水为对照，每12h取样测试氨氮。
[0145]
表3河水处理实验结果
[0146] 012243648加土著微生物10058.341.727.321.7对照10079.568.359.348.5
[0147]
从表3可以看出，投加土著好氧异养细菌菌群产品能显著降低河水cod，36h 河水cod由100mg/l降至27.3mg/l，达到地表4标准，48h内河水cod降至21.7mg/l 以下。而未加土著微生物河水随经过曝气，cod浓度虽有降低，但降低幅度远小于实验组，表明，按本发明生产的好氧异养细菌菌群产品能显著降低河道水体 cod，提高河道水质。
[0148]
上述的对实施例的描述是为便于该技术领域的普通技术人员能理解和使用发明。熟悉本领域技术的人员显然可以容易地对这些实施例做出各种修改，并把在此说明的一般原理应用到其他实施例中而不必经过创造性的劳动。因此，本发明不限于上述实施例，本领域技术人员根据本发明的揭示，不脱离本发明范畴所做出的改进和修改都应该在本发明的保护范围之内。