2.0%,匀速搅拌15min后,接种到固体培养基中进行有氧发酵,菌液的用量为固体培养基重量的6-6.5%,发酵5h后,取发酵后的菌液再次接种在固体培养基中,进行无氧发酵,两次固体培养基的用量相同,发酵5h,之后将制得的发酵液低温烘干,粉碎,包装制得成品,即为酵母培养物。
13.进一步地:所述微量元素为硒、锌和锰按照1∶0.1-0.3∶0.5的重量比混合而成。
14.进一步地:所述复合维生素为维生素c和维生素e按照1∶1的重量比混合而成。
15.进一步地:所述中草药培养基包括如下步骤制成:
16.按重量份计,将10-15份黄芪、12-15份当归、3-5份党参、1-5份红枣、10-15份豆粕和10-20份米糠混合后研磨,过100目筛,制得混合粉,在50℃下烘干,之后加入去离子水中,依次加入15-30份蛋白胨和10-20份半胱氨酸,匀速搅拌后滴加质量分数10%氢氧化钠溶液调节ph,直至ph=7.2-7.5,之后升温至110℃灭菌处理4h,制得混合液,加入琼脂培养基中,制得中草药培养基,控制混合液和琼脂培养基的重量比为3-5∶5。
17.进一步地:步骤s12中所述补糖培养基为葡萄糖培养基。
18.本发明的有益效果:
19.本发明饲料添加剂以多种中草药作为基料,添加微量元素和酵母培养物等成分,能够促使奶牛子宫修复,进入下一步繁殖,提高免疫力,通过加入中药提取物,能够提高益生菌的代谢率,加入黄芪多糖等中药提取多糖既能更好的促进发酵,更能为益生菌“补气”,提高动物免疫,改善生产功能,后面加入酶制剂能够促进纤维素的分解,促进消化吸收,提高吸收利用率,而且加入的酶制剂、益生元,能够改善瘤胃内环境,而且通过本发明制备出一种酵母培养物,与传统酵母培养物相比,本发明不是简单的通过液体发酵和固体发酵进行制备,而是通过不同培养基进行多次发酵,将酵母培养物作为添加剂成分能够改善新产奶牛的消化道健康,减少腹泻,缓解生产后的炎症反应,提高免疫力,保障下一次的生产繁殖。
附图说明
20.为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案,下面将对实施例描述所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据这些附图获得其他的附图。
21.图1为本发明制备酵母培养物的流程图。
具体实施方式
22.下面将结合本发明实施例,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例,都属于本发明保护的范围。
23.实施例1
24.如图1所示,酵母培养物包括如下步骤制成:
25.步骤s11、将中草药培养基在100℃下消毒灭菌,之后将酵母菌种子接种到中草药
培养基中,控制接种量为中草药培养基重量的5%,依次转移至一级和二级摇瓶中,在30℃、250r/min下进行摇瓶培养,培养1天,培养结束后转移至种子罐中进行发酵,发酵过程中温度保持在27℃,以300r/min的转速匀速搅拌,发酵3天,制得发酵液;
26.步骤s12、将制得的发酵液转移至发酵罐中,之后加入葡萄糖培养基,发酵液的用量为葡萄糖培养基重量的6.5%,对发酵液进行有氧发酵,控制发酵温度为20℃,ph=4,发酵10h后再次加入葡萄糖培养基,两次葡萄糖培养基的加入量相同,进行低温无氧发酵,控制发酵温度为20℃,ph=4,发酵时长为10h,发酵结束后将酶制剂和益生元加入形成的菌液中,酶制剂的用量为菌液重量的1%,益生元的用量为菌液重量的1.8%,匀速搅拌15min后,接种到固体培养基中进行有氧发酵,菌液的用量为固体培养基重量的6%,发酵5h后,取发酵后的菌液再次接种在固体培养基中,进行无氧发酵,两次固体培养基的用量相同,发酵5h,之后将制得的发酵液低温烘干,粉碎,包装制得成品,即为酵母培养物。
27.所述固体培养基为添加了山楂、红枣和党参的lb固体培养基,其中山楂、红枣、党参和lb固体培养基的重量比为1∶0.5∶0.8∶10。
28.所述酶制剂为淀粉酶和纤维素酶按照1∶1的重量比混合而成。
29.中草药培养基包括如下步骤制成:
30.按重量份计,将10份黄芪、12份当归、3份党参、1份红枣、10份豆粕和10份米糠混合后研磨,过100目筛,制得混合粉,在50℃下烘干,之后加入去离子水中,依次加入15份蛋白胨和10份半胱氨酸,匀速搅拌后滴加质量分数10%氢氧化钠溶液调节ph,直至ph=7.2,之后升温至110℃灭菌处理4h,制得混合液,加入琼脂培养基中,制得中草药培养基,控制混合液和琼脂培养基的重量比为3∶5。
31.实施例2
32.如图1所示,酵母培养物包括如下步骤制成:
33.步骤s11、将中草药培养基在110℃下消毒灭菌,之后将酵母菌种子接种到中草药培养基中,控制接种量为中草药培养基重量的6%,依次转移至一级和二级摇瓶中,在30℃、250r/min下进行摇瓶培养,培养2天,培养结束后转移至种子罐中进行发酵,发酵过程中温度保持在27℃,以300r/min的转速匀速搅拌,发酵3天,制得发酵液;
34.步骤s12、将制得的发酵液转移至发酵罐中,之后加入葡萄糖培养基,发酵液的用量为葡萄糖培养基重量的6.6%,对发酵液进行有氧发酵,控制发酵温度为25℃,ph=4.4,发酵10h后再次加入葡萄糖培养基,两次葡萄糖培养基的加入量相同,进行低温无氧发酵,控制发酵温度为25℃,ph=4.4发酵时长为10h,发酵结束后将酶制剂和益生元加入形成的菌液中,酶制剂的用量为菌液重量的1.4%,益生元的用量为菌液重量的2.0%,匀速搅拌15min后,接种到固体培养基中进行有氧发酵,菌液的用量为固体培养基重量的6.4%,发酵5h后,取发酵后的菌液再次接种在固体培养基中,进行无氧发酵,两次固体培养基的用量相同,发酵5h,之后将制得的发酵液低温烘干,粉碎,包装制得成品,即为酵母培养物。
35.所述固体培养基为添加了山楂、红枣和党参的lb固体培养基,其中山楂、红枣、党参和lb固体培养基的重量比为1∶0.5∶1∶10。
36.所述酶制剂为淀粉酶和纤维素酶按照1∶1的重量比混合而成。
37.中草药培养基包括如下步骤制成:
38.按重量份计,将12份黄芪、13份当归、4份党参、3份红枣、12份豆粕和15份米糠混合
后研磨,过100目筛,制得混合粉,在50℃下烘干,之后加入去离子水中,依次加入20份蛋白胨和15份半胱氨酸,匀速搅拌后滴加质量分数10%氢氧化钠溶液调节ph,直至ph=7.4,之后升温至110℃灭菌处理4h,制得混合液,加入琼脂培养基中,制得中草药培养基,控制混合液和琼脂培养基的重量比为4∶5。
39.实施例3
40.如图1所示,酵母培养物包括如下步骤制成:
41.步骤s11、将中草药培养基在110℃下消毒灭菌,之后将酵母菌种子接种到中草药培养基中,控制接种量为中草药培养基重量的6.5%,依次转移至一级和二级摇瓶中,在30℃、250r/min下进行摇瓶培养,培养3天,培养结束后转移至种子罐中进行发酵,发酵过程中温度保持在27℃,以300r/min的转速匀速搅拌,发酵3天,制得发酵液;
42.步骤s12、将制得的发酵液转移至发酵罐中,之后加入葡萄糖培养基,发酵液的用量为葡萄糖培养基重量的6.8%,对发酵液进行有氧发酵,控制发酵温度为30℃,ph=4.5,发酵10h后再次加入葡萄糖培养基,两次葡萄糖培养基的加入量相同,进行低温无氧发酵,控制发酵温度为30℃,ph=4.5,发酵时长为10h,发酵结束后将酶制剂和益生元加入形成的菌液中,酶制剂的用量为菌液重量的1.5%,益生元的用量为菌液重量的2.0%,匀速搅拌15min后,接种到固体培养基中进行有氧发酵,菌液的用量为固体培养基重量的6.5%,发酵5h后,取发酵后的菌液再次接种在固体培养基中,进行无氧发酵,两次固体培养基的用量相同,发酵5h,之后将制得的发酵液低温烘干,粉碎,包装制得成品,即为酵母培养物。
43.所述固体培养基为添加了山楂、红枣和党参的lb固体培养基,其中山楂、红枣、党参和lb固体培养基的重量比为1∶0.5∶1∶10。
44.所述酶制剂为淀粉酶和纤维素酶按照1∶1的重量比混合而成。
45.中草药培养基包括如下步骤制成:
46.按重量份计,将15份黄芪、15份当归、5份党参、5份红枣、15份豆粕和20份米糠混合后研磨,过100目筛,制得混合粉,在50℃下烘干,之后加入去离子水中,依次加入30份蛋白胨和20份半胱氨酸,匀速搅拌后滴加质量分数10%氢氧化钠溶液调节ph,直至ph=7.5,之后升温至110℃灭菌处理4h,制得混合液,加入琼脂培养基中,制得中草药培养基,控制混合液和琼脂培养基的重量比为5∶5。
47.实施例4
48.一种新产奶牛专用中草药类饲料添加剂,包括如下重量份原料:40份黄芪多糖,20份党参,1份当归,1份复合维生素,0.1份微量元素,1份酵母培养物;
49.该饲料添加剂包括如下步骤制成:
50.步骤s1、将党参和当归混合粉碎,研磨、过60目筛,制得中药粉料,将中药粉料投入提取罐,加水提取两次,第一次加6倍水,煮沸提取2h,第二次加4倍水,煮沸提取2h,除去残渣,合并两次的提取液,转移至储存罐中,制得提取液,真空浓缩,制得相对密度为1.05的复合提取膏;
51.步骤s2、将复合提取膏和黄芪多糖混合搅拌10min,之后依次加入复合维生素、微量元素和酵母培养物,继续搅拌混合20min,干燥,研磨,制得中草药类饲料添加剂。
52.微量元素为硒、锌和锰按照1∶0.1∶0.5的重量比混合而成。
53.复合维生素为维生素c和维生素e按照1∶1的重量比混合而成。
54.实施例5
55.一种新产奶牛专用中草药类饲料添加剂,包括如下重量份原料:50份黄芪多糖,30份党参,2份当归,3份复合维生素,0.2份微量元素,3份酵母培养物;
56.该饲料添加剂包括如下步骤制成:
57.步骤s1、将党参和当归混合粉碎,研磨、过60目筛,制得中药粉料,将中药粉料投入提取罐,加水提取两次,第一次加6倍水,煮沸提取2h,第二次加4倍水,煮沸提取2h,除去残渣,合并两次的提取液,转移至储存罐中,制得提取液,真空浓缩,制得相对密度为1.06的复合提取膏;
58.步骤s2、将复合提取膏和黄芪多糖混合搅拌10min,之后依次加入复合维生素、微量元素和酵母培养物,继续搅拌混合20min,干燥,研磨,制得中草药类饲料添加剂。
59.微量元素为硒、锌和锰按照1∶0.2∶0.5的重量比混合而成。
60.复合维生素为维生素c和维生素e按照1∶1的重量比混合而成。
61.实施例6
62.一种新产奶牛专用中草药类饲料添加剂,包括如下重量份原料:60份黄芪多糖,40份党参,3份当归,5份复合维生素,0.3份微量元素,5份酵母培养物;
63.该饲料添加剂包括如下步骤制成:
64.步骤s1、将党参和当归混合粉碎,研磨、过60目筛,制得中药粉料,将中药粉料投入提取罐,加水提取两次,第一次加6倍水,煮沸提取2h,第二次加4倍水,煮沸提取2h,除去残渣,合并两次的提取液,转移至储存罐中,制得提取液,真空浓缩,制得相对密度为1.08的复合提取膏;
65.步骤s2、将复合提取膏和黄芪多糖混合搅拌10min,之后依次加入复合维生素、微量元素和酵母培养物,继续搅拌混合20min,干燥,研磨,制得中草药类饲料添加剂。
66.微量元素为硒、锌和锰按照1∶0.3∶0.5的重量比混合而成。
67.复合维生素为维生素c和维生素e按照1∶1的重量比混合而成。
68.对比例1
69.本对比例为市售治疗新产奶牛子宫炎的中药组合物。
70.对比例2
71.本对比例为市场某公司生产的饲料添加剂。
72.受试动物:
73.于2020年2月青海某奶牛场进行,奶牛存栏量为3000头,选择其产犊奶牛为研究对象,预产期前一周,将待产奶牛转入产房,产后两周内,产犊奶牛正常投喂,按照实施例4-6和对比例1-2分为五组,对应饲料里添加相应的添加剂,每日饲喂三次,自由采食,运动场自由饮水、运动,统计180天内的繁殖指标,结果如下表1所示;
74.表1
75.[0076][0077]
从上表1中能够看出实施例4-6分组的奶牛具有良好的繁殖性能,略低于药物组,但是本发明为食品添加剂,相对与其他食品添加剂具有良好的子宫修复性能。
[0078]
在说明书的描述中,参考术语“一个实施例”、“示例”、“具体示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中,对上述术语的示意性表述不一定指的是相同的实施例或示例。而且,描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任何的一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。
[0079]
以上内容仅仅是对本发明所作的举例和说明,所属本技术领域的技术人员对所描述的具体实施例做各种各样的修改或补充或采用类似的方式替代,只要不偏离发明或者超越本权利要求书所定义的范围,均应属于本发明的保护范围。