1.本发明属于胰腺癌治疗药品筛选技术领域，具体涉及非洛替尼(filgotinib)在抑制胰腺癌细胞和肿瘤组织增殖中的应用。
背景技术：
2.胰腺癌(pdac)是一种临床常见且预后极差的消化系统恶性肿瘤，是最具侵袭性的肿瘤之一，由于其特殊的解剖位置和肿瘤生物学行为，以及临床症状隐匿且不典型，导致临床诊断和治疗都十分困难，五年生存率在所有肿瘤中持续位列倒数第一，远低于其它肿瘤。现今，胰腺癌的治疗取得了显著进展，包括手术技术以及辅助和新辅助治疗等手段，且应用日益普遍。尽管取得了这些进展，也在一定程度上延长了患者的总生存期，但全球胰腺癌的发病率仍在上升，且治疗效果十分有限，仍然是一种致命的疾病。因此，迫切需要新的治疗方法。
3.近年来，随着分子靶向药物研究的不断深入，越来越多的靶向药物在肿瘤治疗过程中发挥着重要作用，并表现出良好的疗效，且耐受性好，毒性反应较轻，尽管分子靶向药物并不能取代传统的抗肿瘤药物，大多数为两者联合使用，但分子靶向药物在临床实践上确实取得了显著的疗效。因此发现和筛选有效抑制胰腺癌增殖的分子靶向药物，深入研究其作用的分子机制，对胰腺癌临床治疗及辅助治疗的研发具有重要意义，也具有极好的临床转化和应用前景。
技术实现要素：
4.本发明的目的是提供非洛替尼在抑制胰腺癌细胞和小鼠胰腺癌肿瘤增殖中的应用，即利用非洛替尼来抑制胰腺癌细胞和小鼠胰腺癌肿瘤增殖，从而弥补现有胰腺癌治疗方法的不足。
5.本发明首先提供了非洛替尼的一种新的用途，即在制备用于抑制胰腺癌细胞或小鼠胰腺癌肿瘤增殖的制品中的应用。
6.本发明再一个方面还提供一种用于抑制胰腺癌细胞或小鼠胰腺癌肿瘤增殖的制品，所述制品中包含有药理有效浓度的非洛替尼；
7.所述的有效药理浓度不低于12.5μmol/l；
8.所述的制品，为液体制品；
9.作为一种具体的液体制品，是将非洛替尼添加到用于培养胰腺癌细胞的培养基中；
10.其中在培养基中的非洛替尼的添加浓度为12.5-100μmol/l；
11.另一种制品，为添加有非洛替尼的dmso溶液，其中非洛替尼的添加浓度为4.7μmol/kg。
12.本发明发现非洛替尼能抑制胰腺癌细胞和小鼠胰腺癌肿瘤的增殖，可将非洛替尼用于抗胰腺癌治疗新药物的制备。
附图说明
13.图1：非洛替尼对胰腺癌细胞(mia paca-2)增殖的影响图，通过cck-8实验来测量胰腺癌细胞mia paca-2的细胞活力，细胞分别用非洛替尼(0、12.5、25、50和100μmol/l)处理24和48小时；在450nm处测量吸光度，数据表示为平均值
±
sd；*p≤0.05，#p≤0.05。
14.图2：非洛替尼对小鼠胰腺癌肿瘤增殖的影响图。
具体实施方式
15.申请人在研究中发现，使用非洛替尼处理胰腺癌细胞系mia paca-2后，mia paca-2的增殖能力被显著抑制；此外使用非洛替尼处理异种移植胰腺癌mia paca-2荧光素酶细胞的小鼠，胰腺癌肿瘤的增殖能力也被显著抑制，从而促成了本发明。
16.下面结合实施例对本发明进行详细的描述：
17.实施例1：非洛替尼能抑制胰腺癌细胞(mia paca-2)增殖
18.1、cck8实验
19.将mia paca-2细胞接种在96孔细胞培养板中，每孔100μl细胞悬液，细胞数约4000-5000个/孔，每个处理浓度做3个重复孔。37℃培养箱中培养，待细胞贴壁后，分别添加不同浓度的非洛替尼(0、12.5、25、50和100μmol/l)处理24和48小时后，加入10％cck8的无血清培养基以换液的形式加入到培养孔中，在37℃培养箱中培养2h，在波长450nm处，检测吸光度。
20.在非洛替尼处理mia paca-2细胞24小时后的检测结果如图1所示，结果表明12.5、25、50和100μmol/l浓度的非洛替尼对细胞增殖能力的抑制率约35.5％、39.6％、45.1％和60.6％。而在非洛替尼处理mia paca-2细胞48小时后，四个浓度的非洛替尼对细胞增殖能力的抑制率均超过70％。这说明非洛替尼能显著降低胰腺癌细胞的增殖能力。
21.实施例2：非洛替尼能抑制小鼠胰腺癌肿瘤增殖
22.1、异种移植小鼠模型
23.动物实验按照实验动物护理和使用的机构指南进行，其中6只4周龄雌性balb/c裸鼠获自中国科学院上海实验动物中心。通过在3％异氟醚麻醉下在小鼠腋下注射1
×
106荧光素酶标记的mia paca-2细胞(luc-mia paca-2)构建皮下异种移植小鼠模型。将小鼠分成两组，每组三只小鼠。治疗组小鼠每隔一天注射0.1ml非洛替尼(4.7μmol/kg体重)腹膜内注射治疗。对照组腹膜内注射0.1ml dmso。取出小鼠肿瘤称重。
24.结果如图2所示，非洛替尼治疗的小鼠肿瘤大小显著减少，说明非洛替尼能显著抑制小鼠胰腺癌的增殖。
技术特征：
1.非洛替尼的一种用途，其特征在于，所述的用途是非洛替尼在制备用于抑制胰腺癌细胞或小鼠胰腺癌肿瘤增殖的制品中的应用。2.一种用于抑制胰腺癌细胞或小鼠胰腺癌肿瘤增殖的制品，其特征在于，所述的制品中包含有药理有效浓度的非洛替尼。3.如权利要求2所述的制品，其特征在于，所述的非洛替尼的浓度不低于12.5μmol/l。4.如权利要求2或3所述的制品，其特征在于，所述的制品为液体制品。5.如权利要求4所述的制品，其特征在于，所述的液体制品是添加有非洛替尼的，用于培养胰腺癌细胞的培养基。6.如权利要求5所述的制品，其特征在于，所述的培养基中非洛替尼的添加浓度为12.5-100μmol/l。7.如权利要求4所述的制品，其特征在于，所述的液体制品是添加有非洛替尼的dmso溶液。8.如权利要求7所述的制品，其特征在于，所述的非洛替尼的添加浓度为4.7μmol/kg。
技术总结
本发明提供非洛替尼在抑制胰腺癌细胞和小鼠胰腺癌肿瘤增殖中的应用，即在制备用于抑制胰腺癌细胞或小鼠胰腺癌肿瘤增殖的制品中的应用。本发明再一个方面还提供一种用于抑制腺癌细胞或小鼠胰腺癌肿瘤增殖的制品，所述的制品中包含有药理有效浓度的非洛替尼；所述的有效药理浓度不低于12.5μmol/L；所述的制品，为液体制品。本发明发现非洛替尼能抑制胰腺癌细胞和小鼠胰腺癌肿瘤的增殖，可将非洛替尼用于抗胰腺癌治疗新药物的制备。于抗胰腺癌治疗新药物的制备。于抗胰腺癌治疗新药物的制备。
技术研发人员：曹利平 贾盛楠 赵冰冰 丁国平 章朝雷
受保护的技术使用者：浙江大学
技术研发日：2021.11.01
技术公布日：2022/2/15