专利名称：虎杖提取物虎杖鞣酸的提取方法
技术领域：
本发明涉及原药材虎杖提取物虎杖鞣酸的提取方法，属中草药化学提炼制备技术领域。
虎杖提取物中的鞣质或鞣酸，为糖尿病α-糖苷酶抑制活性，故可用作降血糖药物。
本发明的另一目的是提供一种虎杖提取物的制备工艺方法。
本发明的上述目的是通过以下技术方案来达到的。
本发明的一种虎杖提取物虎杖鞣酸的提取方法，其特征在于，该方法包括以下几个工艺步骤a.原药材虎杖经过粉碎后，用水、甲醇或含水醇在加热条件下提取，提取时间2-30小时，溶剂用量为原药材的3-10倍；b.过滤或离心分离，弃滤渣，取滤液或上层清液，将滤液或上层清液在温度50-100℃保温5-30分钟，冰箱放置过夜；c.放入离心分离机，在2000-5000rmp离心分离5-20分钟，取上层清液；d.将上层清液在分离漏斗中用石油醚脱脂2-5次；e.将脱脂后的提取液活性炭脱色，然后超滤去除低分子量杂质；f.将所得滤液上强酸性阳离子交换树脂，然后用蒸馏水洗脱，洗脱液调节其PH至中性后，在常压或减压下加热至60-100℃进行浓缩，然后用超滤膜进行超滤，经干燥后即可得到褐色固体粉末，其主要成分为虎杖鞣酸。
本发明的另一种虎杖提取物虎杖鞣酸的提取方法，其特征在于，该方法包括以下几个工艺步骤a.将原药材虎杖先用水，乙醇或含水醇浸泡，浸软后用捣碎机粉碎，在加热条件下，提取2-30小时，溶剂用量为原药材的3-10倍；b.过滤，弃滤渣，取滤液在常压或减压下加热至50-100℃，浓缩得浸膏；c.加水溶解，用氯仿加热回流，弃氯仿层，所得水层用乙酸乙酯萃取2-3次，取乙酸乙酯层，再用NaOH水溶液萃取2-3次，取NaOH水溶液，用HCl调PH值至2-6，加4-10％明胶水溶液，得沉淀物；d.沉淀用30-70％丙酮水溶液溶解，然后用离心机离心分离，弃沉淀，取丙酮溶液，将其减压蒸馏浓缩，并回收丙酮，得到胶状固体物；e.将所得胶状固体物用水溶解，再用乙酸乙酯萃取，将所得乙酸乙酯层减压浓缩，并回收乙酸乙酯，得到浓缩的胶状物；f.胶状物加适量水溶解，过滤，滤去沉淀不溶物，得到清液，将清液冷冻干燥得橙黄色粉末，其主要成分为虎杖鞣酸。
本发明方法所制得的虎杖鞣酸，具有α-糖苷酶抑制活性，其作用机制是虎杖鞣酸通过与消化道内的许多酶作用，特别是对α-糖苷酶的抑制活性，从而调控了机体对葡萄糖等营养成分的吸收，使得它具有了抗营养性，对于肥胖的糖尿病患者而言，虎杖鞣酸不仅可以有效地降低血糖，而且可以减少其对营养成分的吸收，因此虎杖鞣酸可作为糖苷酶抑制剂类药物、也可作为减肥茶的主要成分。
本发明方法的提取工艺，使用设备简单，分离提取容易操作，成本也较低。
本发明制备物虎杖鞣酸作为抑制剂可降低血浆血糖浓度。
以下试验为虎杖鞣酸抑制剂对动物小鼠的降血糖作用。
试验1，虎杖鞣酸抑制剂一次给药对正常小鼠血糖含量的影响小鼠45只，随机分为5组，分别灌胃生理盐水、拜糖苹(100mg/kg)、鞣酸抑制剂(50mg/kg、100mg/kg、150mg/kg)。禁食3h后断尾取血测定血浆血糖浓度。结果表明100，150mg/kg剂量均能明显降低正常小鼠血糖(见表1)。
表1抑制剂一次给药对正常小鼠血糖含量的影响

与生理盐水组比较1p＜0.005，2p＜0.001上述拜糖苹对照试剂为德国拜耳公司产品。
试验2，虎杖鞣酸抑制剂连续多次给药对正常小鼠血糖含量的影响小鼠30只，随机分为3组，分别灌胃生理盐水、拜糖苹(100mg/kg)、虎杖鞣酸抑制剂(100mg/kg)，连续八天。末次给药后禁食3h，测定血糖浓度。可见，小鼠多次给药同样引起小鼠血糖的降低(见表2)。
表2抑制剂连续多次给药对正常小鼠血糖含量的影响

与生理盐水组比较1p＜0.005，2p＜0.001上述拜糖苹对照试剂为德国拜耳公司产品。
试验3，抑制剂对四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖含量的影响四氧嘧啶糖尿病小鼠30只，分为3组(组间血糖值差异不超过0.5mmol/L)，分别灌胃生理盐水、拜糖苹(100mg/kg)、抑制剂(100mg/kg)，连续八天。末次给药后禁食3h，取血测血糖。结果表明该抑制剂能够显著降低四氧嘧啶糖尿病小鼠的血糖(见表3)。表3抑制剂对四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖含量的影响

与生理盐水组比较1p＜0.001上述拜糖苹对照试剂为德国拜耳公司产品。
实施例一取300g中药虎杖加1200ml蒸馏水，浸软后用捣碎机粉碎，于60℃保温24小时，然后用离心分离机分离，离心分离机转速为5000rpm，离心时间10分钟，弃滤渣，取上层清液。将上层清液加热到80℃保温10分钟，然后冰箱放置过夜。再放入离心机，在5000rpm转速下离心分离10分钟，取上层清液。将上层清液在分液漏斗中用石油醚(30-60bp)脱脂3-4次。将脱脂后的提取液过活性炭柱脱色。然后超滤去除低分子量杂质，将所得滤液上732强酸性阳离子交换树脂，然后用蒸馏水洗脱。将洗脱液调PH到中性后，在常压或减压下加热至60-100℃进行浓缩，然后用超滤膜(截留分子量5000dalton)进行超滤浓缩，除去低分子杂质，经干燥后可得褐色固体粉末，其主要成分为虎杖鞣酸。
实施例二将300g虎杖粗粉用1500ml95％乙醇冷浸24hr后，过滤，弃滤渣，取滤液，将滤液减压加热至80℃，浓缩得浸膏，浸膏加水溶解，用氯仿回流，弃氯仿层，所得水层用乙酸乙酯萃取2-3次，取乙酸乙酯层，再用NaOH萃取2-3次，取取NaOH水溶液，用HCl调PH值至4，加5％明胶水溶液，得沉淀物。沉淀物用50％丙酮水溶液溶解，然后用离心机离心分离，转速为5000rmp，分离10分钟，弃沉淀，取丙酮溶液，将其减压蒸馏浓缩，并回收丙酮，得到胶状固体物。将所得胶状固体物用水溶解，再用乙酸乙酯萃取，将所得乙酸乙酯层减压浓缩，并回收乙酸乙酯，得到浓缩的胶状物。所得胶状物加适量水溶解，过滤，滤去沉淀不溶物，得到清溶液，将清液冷冻干燥得橙黄色粉末，其主要成分为虎杖鞣酸。
权利要求
1.一种虎杖提取物虎杖鞣酸的提取方法，其特征在于，该方法包括以下几个工艺步骤a.原药材虎杖经过粉碎后，用水、甲醇或含水醇在加热条件下提取，提取时间2-30小时，溶剂用量为原药材的3-10倍；b.过滤或离心分离，弃滤渣，取滤液或上层清液，将滤液或上层清液在温度50-100℃保温5-30分钟，冰箱放置过夜；c.放入离心分离机，在2000-5000rmp离心分离5-20分钟，取上层清液；d.将上层清液在分离漏斗中用石油醚脱脂2-5次；e.将脱脂后的提取液活性炭脱色，然后超滤去除低分子量杂质；f.将所得滤液上强酸性阳离子交换树脂，然后用蒸馏水洗脱，洗脱液调节其PH至中性后，在常压或减压下加热至60-100℃进行浓缩，然后用超滤膜进行超滤，经干燥后即可得到褐色固体粉末，其主要成分为虎杖鞣酸。
2.一种虎杖提取物虎杖鞣酸的提取方法，其特征在于，该方法包括以下几个工艺步骤a.将原药材虎杖先用水，乙醇或含水醇浸泡，浸软后用捣碎机粉碎，在加热条件下，提取2-30小时，溶剂用量为原药材的3-10倍；b.过滤，弃滤渣，取滤液在常压或减压下加热至50-100℃，浓缩得浸膏；c.加水溶解，用氯仿加热回流，弃氯仿层，所得水层用乙酸乙酯萃取2-3次，取乙酸乙酯层，再用NaOH水溶液萃取2-3次，取NaOH水溶液，用HCl调PH值至2-6，加4-10％明胶水溶液，得沉淀物；d.沉淀用30-70％丙酮水溶液溶解，然后用离心机离心分离，弃沉淀，取丙酮溶液，将其减压蒸馏浓缩，并回收丙酮，得到胶状固体物；e.将所得胶状固体物用水溶解，再用乙酸乙酯萃取，将所得乙酸乙酯层减压浓缩，并回收乙酸乙酯，得到浓缩的胶状物；f.胶状物加适量水溶解，过滤，滤去沉淀不溶物，得到清液，将清液冷冻干燥得橙黄色粉末，其主要成分为虎杖鞣酸。
3.根据权利要求1或2所述的一种虎杖提取物虎杖鞣酸的提取方法所提取的鞣酸产物，由于具有α-糖苷酶抑制活性，可用于制造治疗糖尿病、肥胖症等的药物的原料。
全文摘要
本发明涉及原药材虎杖提取物虎杖鞣酸的提取方法。虎杖提取物中的主要成分虎杖鞣酸具有α－糖苷酶抑制活性，可用于制备降血糖药物的主要活性成分，也可用于制造治疗糖尿病、肥胖症等的药物的原料。本发明的一种虎杖提取物虎杖鞣酸的提取方法，其特征在于虎杖经过粉碎后，用水、甲醇或含水醇在加热条件下提取，然后过滤，滤液用石油醚脱脂、活性炭脱色，脱色后在常压或减压下浓缩，上离子交换树脂，洗脱液浓缩后，再经超滤，去除低分子量杂质后，经干燥后即可得到褐色固体粉末，其主要成分为虎杖鞣酸。
文档编号C07H15/18GK1450077SQ0311654
公开日2003年10月22日 申请日期2003年4月22日 优先权日2003年4月22日
发明者沈忠明, 殷建伟, 袁海波 申请人:上海大学