1.本发明属于天然产物提取和应用技术领域，涉及一种采用复合酶提高铁观音杀青物香气含量的制备方法及在卷烟中的应用，具体涉及一种铁观音杀青物香料的增香工艺及在卷烟中的应用。


背景技术：

2.卷烟具有其独特的香气风格和口味特征，并且经过多年的研究发展，香料香精技术愈加成熟地运用到香烟中，以协调香烟的杂气。天然烟叶本身存在一些刺激性不良气味，在卷烟制作过程中添加烟用香料，可以有效地改善卷烟的味道和吸食口感，提高卷烟整体品质。铁观音是闽南乌龙茶的典型代表，具有独特的花果香味。研究表明，不同的加工工序中，香气成分的种类和含量也会有较大的变化，其中杀青物含有的清香物质更多，含水量更低，更适宜用作香料的研究。将铁观音杀青物提取物添加到卷烟中，可以赋予卷烟铁观音独特的茶香花果香气，使烟气更加细腻协调，整体滋味更加丰富。且茶叶中的香气物质具有潜在的抗肿瘤和抑菌效果，具有极大的研究价值。
3.传统的香气提取工艺中，由于茶叶细胞壁难以破坏，香气物质较难全部提取出来，并且铁观音杀青物中的香气成分含量低微，组分复杂且易挥发等特点使其不易提取和分离，不同的提取方法会直接影响香气成分的定性定量分析。因而如何采用简便快捷的方法提高铁观音中杀青物中香气成分的提取率是亟待解决的问题。


技术实现要素：

4.针对现有存在的技术问题，本发明提供了一种利用酸解加外源酶提高铁观音杀青物香气的工艺路线，可以有效地提高铁观音杀青物香原料的提香得率，为卷烟提供一种纯正铁观音的茶香香韵，使烟气柔顺，味道明亮有甜感。
5.为此，在本发明的第一方面，本发明提供了一种制备铁观音杀青物提取物的方法，其包括：
6.(1)将铁观音杀青物与水混合，之后加入柠檬酸进行酸解处理；
7.(2)向步骤(1)获得的酸解处理产物中加入纤维素酶、果胶酶和β葡萄糖苷酶进行酶解处理；
8.(3)将步骤(2)获得的酶解处理产物进行水蒸气蒸馏提取处理，获得铁观音杀青物提取物。
9.在一些实施方案中，步骤(2)是通过如下方式进行的：向步骤(1)获得的酸解处理产物中同时加入纤维素酶、果胶酶和β葡萄糖苷酶进行酶解处理。
10.在一些实施方案中，所述酶解处理是在温度为50-55℃(如50℃、51℃、52℃、53℃、54℃或55℃)的条件下进行0.5-3h(例如0.5h、1h、1.5h、2h、2.5h或3h，优选2-3h)。
11.在一些实施方案中，所述酶解处理是在ph为4.5-5.5(如4.5、5.0或5.5)的条件下进行的。
25倍(如20倍、21倍、22倍、23倍、24倍或25倍)。
33.在一些实施方案中，步骤(1)中，所述铁观音杀青物预先经过粉碎处理。
34.在一些实施方案中，所述铁观音杀青物预先被粉碎成30-60目(如30目、40目、50目或60目)。
35.在一些实施方案中，步骤(3)中，所述水蒸气蒸馏提取处理中，蒸馏时间为2-3h。
36.在一些实施方案中，所述方法进一步包括：步骤(4)：将步骤(3)获得的水蒸气蒸馏提取液进行反渗透过滤处理。
37.在一些实施方案中，所述反渗透过滤处理是通过膜分离设备进行的。
38.在本发明的第二方面，本发明提供了一种铁观音杀青物提取物，其由前述的方法制备得到。
39.在本发明的第三方面，本发明提供了一种烟用组合物，其包含前述的铁观音杀青物提取物；任选地，还包含辅料。
40.在一些实施方案中，所述烟用组合物为烟用香料。
41.在本发明的第四方面，本发明提供了一种卷烟，其包含：
42.烟丝，和前述的铁观音杀青物提取物。
43.在一些实施方案中，所述铁观音杀青物提取物的重量是所述烟丝重量的0.5％-1.5％，优选1％。
44.在本发明的第五方面，本发明提供了一种制作卷烟的方法，其包括：将前述的铁观音杀青物提取物添加至烟丝中，获得卷烟。
45.在一些实施方案中，所述铁观音杀青物提取物的重量是所述烟丝重量的0.5％-1.5％，优选1％。
46.本发明中，如无特别说明，“铁观音杀青物”是指铁观音茶青经萎凋、做青、杀青处理后得到的物质。
47.本发明中，如无特别说明，“杀青处理”是采用一定温度，使鲜叶中的酶失去活性，或是将酶钝化的过程。杀青处理的方式包括：滚筒杀青、锅炒杀青、热风杀青、蒸汽杀青、微波杀青或蒸汽-热风混合式杀青等。“锅炒杀青”是指，就是在烧热的锅里不停地翻炒茶叶，把茶叶里的水分蒸干变软。
48.有益效果
49.1、本发明的方法采用酸解加复合酶酶解，可以有效地提高铁观音杀青物香气物质的提取率，经卷烟加香试验后，发现该香气成分能够为卷烟提供一种纯正铁观音香气香韵，对卷烟品质提升具有明显的改善作用。
50.2、本发明的方法成本较低、操作简便且具有一定应用价值，通过酸解和酶解增加了铁观音杀青物的香气成分，获得具有铁观音特征茶香、花果香的香料。将香原料加入卷烟中，能够明显赋予卷烟清香、花香和甜香，略有辛香、青滋香，香气更为丰富、谐调，能够明显掩盖杂气，烟气更为细腻柔和，能够明显提升卷烟整体品质。
附图说明
51.图1：酸解加复合酶酶解后香气物质含量。
52.图2：酸解加复合酶酶解后主要三种香气物质含量。
53.图3：酶解不同时间后香气物质含量
54.图4：分批酶解后香气物质含量。
55.图5：分批酶解后主要三种香气物质含量。
56.图6：酸解后香气物质含量。
57.图7：酸解后主要三种香气物质含量。
58.图8：酶解后香气物质含量。
59.图9：酶解后主要三种香气物质含量。
60.图10：木聚糖酶酶解后香气物质含量。
61.图11：添加提取物卷烟的香气风格感官评价结果。
62.图12：添加提取物卷烟的烟气特性感官评价结果。
具体实施方式
63.下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。
64.本发明提供一种以铁观音杀青物为原料，通过先酸解再添加纤维素酶、果胶酶和β-葡萄糖苷酶酶解，以增强铁观音香气的生产方法。本发明旨在提供一种成本较低、操作简便且具有一定应用价值的高效增香工艺，通过酸解和酶解增加了铁观音杀青物的香气成分，获得具有铁观音特征茶香、花果香的香料。将香原料加入卷烟中，能够明显赋予卷烟清香、花香和甜香，略有辛香、青滋香，香气更为丰富、谐调，能够明显掩盖杂气，烟气更为细腻柔和，能够明显提升卷烟整体品质。
65.为实现上述目的，在一些实施方案中，本发明是通过以下技术方案获得的：
66.(1)将铁观音茶叶杀青物粉碎：用粉碎机将铁观音茶叶杀青物粉碎后过30-60目筛。
67.(2)将步骤(1)中的铁观音杀青物加入纯净水，加水量为茶叶原料重量的20-25倍，加入柠檬酸调节ph值至3.0-4.0，温度为50℃，酸解1-2h。酸解过程进行搅拌，速度为20-80rpm。
68.(3)经步骤(2)中的酸解后，加入naoh，调节ph值至4.5-5.5，加入纤维素酶(0.01％-0.03％)于50-55℃酶解2-3h后灭酶，再加入果胶酶(0.01％-0.03％)于50-55℃酶解2-3h后灭酶，最后加入β-葡萄糖苷酶(0.01％-0.03％)50-55℃酶解2-3h后灭酶，酶解过程进行搅拌，速度为20-80rpm，或酸解完成后同时加入纤维素酶(0.01％-0.03％)、果胶酶(0.01％-0.03％)和β葡萄糖苷酶(0.01％-0.03％)，于50-55℃酶解2-3h后灭酶。
69.(4)经过步骤(3)酶解完成后，进行水蒸气蒸馏提取香气成分，蒸馏时间为2-3h。
70.(5)将步骤(4)中蒸馏出的馏出液经过冷凝管冷却后进入收集器中，进行检测。
71.(6)将步骤(5)中的馏出液经过膜分离设备进行反渗透过滤，得到铁观音杀青物香气物质。
72.(7)将步骤(6)中得到的香气物质，加入到卷烟中，使卷烟具有纯正的铁观音香气香韵。
73.在另一些实施方案中，本发明提供了一种铁观音杀青物提取物香料的增香制备方法，其包括如下步骤：
74.(1)将铁观音杀青物粉碎成30-60目后，加入纯净水，加水量为茶叶原料重量的20-25倍。加入柠檬酸，调节ph值为3.0-4.0，温度为50℃，酸解1-2h，酸解的搅拌速度为20-80rpm。酸解完成后，加入氢氧化钠，调节ph值至4.5-5.5，加入纤维素酶(0.01％-0.03％)于50-55℃酶解2-3h后灭酶，再加入果胶酶(0.01％-0.03％)于50-55℃酶解2-3h后灭酶，最后加入β-葡萄糖苷酶(0.01％-0.03％)50-55℃酶解2-3h后灭酶，酶解过程进行搅拌，速度为20-80rpm，或酸解完成后同时加入纤维素酶(0.01％-0.03％)、果胶酶(0.01％-0.03％)和β葡萄糖苷酶(0.01％-0.03％)，于50-55℃酶解2-3h后灭酶。
75.(2)酶解完成后，进行水蒸气蒸馏提取香气成分，蒸馏时间为2-3h。
76.(3)将蒸馏出的馏出液经过冷凝管冷却后进入收集器中，进行检测。
77.(4)将馏出液经过膜分离设备进行反渗透过滤，得到铁观音杀青物香原料。
78.在一些实施方案中，所述的复合酶中每种酶的加酶量占原料重量的0.01％-0.03％。
79.在一些实施方案中，所述原料为铁观音杀青物。
80.在一些实施方案中，所述铁观音杀青物香料提取物用于卷烟中。
81.在一些实施方案中，所述铁观音杀青物香料提取物的添加量按1％的比例均匀添加入参比卷烟中。
82.下面结合具体实施例对本发明进行进一步的解释说明。其中，以下实施例所使用的实验原料铁观音茶叶杀青物均为购买自福建安溪华祥的铁观音春茶杀青物。
83.实施例1：铁观音杀青物酸解加酶解的增香工艺
84.1、本发明提供的铁观音杀青物酸解加酶解的增香工艺流程包括：
85.(1)将铁观音茶叶杀青物粉碎：用粉碎机将铁观音茶叶杀青物粉碎后过50目筛。
86.(2)将步骤(1)中的铁观音杀青物加入纯净水，加水量为茶叶原料重量的20倍，加入柠檬酸调节ph值至3.5，温度为50℃，酸解1.5h。酸解过程进行搅拌，速度为50rpm。
87.(3)经步骤(2)中的酸解后，加入naoh，调节ph值至5.0，加入纤维素酶(0.03％)、果胶酶(0.03％)和β-葡萄糖苷酶(0.03％)，进行复合酶酶解，酶解温度为50℃，酶解时间为2h。酶解结束后100℃灭酶10min。酶解过程进行搅拌，速度为50rpm。
88.(4)经过步骤(3)酶解完成后，进行水蒸气蒸馏提取香气成分，蒸馏时间为2h。
89.(5)将步骤(4)中蒸馏出的馏出液经过冷凝管冷却后进入收集器中，进行检测。
90.(6)将步骤(5)中的馏出液经过膜分离设备进行反渗透过滤，得到铁观音杀青物香气物质。
91.2、空白对照的制备工艺流程如下：
92.(1)将铁观音茶叶杀青物粉碎：用粉碎机将铁观音茶叶杀青物粉碎后过50目筛。
93.(2)将步骤(1)中的铁观音杀青物加入纯净水，加水量为茶叶原料重量的20倍。
94.(3)经过步骤(2)后，进行水蒸气蒸馏提取香气成分，蒸馏时间为2h。
95.(4)将步骤(3)中蒸馏出的馏出液经过冷凝管冷却后进入收集器中，进行检测。
96.(5)将步骤(4)中的馏出液经过膜分离设备进行反渗透过滤，得到铁观音杀青物香气物质。
97.对工艺流程1步骤(5)得到的馏出物和空白对照步骤(4)得到的馏出物进行gc-ms定性定量检测：分别取工艺流程1步骤(5)得到的馏出物和空白对照步骤(4)得到的馏出物各6ml于顶空瓶中，加入10μl 2-辛醇(10mg/l)和2.0g氯化钠，密封。放入恒温加热磁力搅拌器(60℃)平衡15min后，插入已经老化的萃取针，顶空吸附45min，于气相色谱进样口处在250℃条件下解析5min，进行gc-ms分析。
98.检测结果表明，与空白对照相比，酸解加复合酶酶解明显能够提高铁观音中挥发性香气成分的提取量(图1)和主要三种香气物质的提取量(图2)。香气成分含量分析结果见表1。
99.实施例2：铁观音杀青物酸解加酶解的增香工艺
100.1、本发明提供的铁观音杀青物酸解加酶解的增香工艺流程包括：
101.(1)将铁观音茶叶杀青物粉碎：用粉碎机将铁观音茶叶杀青物粉碎后过30目筛。
102.(2)将步骤(1)中的铁观音杀青物加入纯净水，加水量为茶叶原料重量的25倍，加入柠檬酸调节ph值至3.0，温度为50℃，酸解1h。酸解过程进行搅拌，速度为30rpm。
103.(3)经步骤(2)中的酸解后，加入naoh，调节ph值至4.5，加入纤维素酶(0.01％)、果胶酶(0.01％)和β-葡萄糖苷酶(0.01％)，进行复合酶酶解，酶解温度为50℃，分别设置酶解时间为0.5h、1h、2h、3h、4h。酶解结束后100℃灭酶10min。酶解过程进行搅拌，速度为30rpm。
104.(4)经过步骤(3)酶解完成后，进行水蒸气蒸馏提取香气成分，蒸馏时间为3h。
105.(5)将步骤(4)中蒸馏出的馏出液经过冷凝管冷却后进入收集器中，进行检测。
106.(6)将步骤(5)中的馏出液经过膜分离设备进行反渗透过滤，得到铁观音杀青物香气物质。
107.2、空白对照的制备工艺流程如下：
108.(1)将铁观音茶叶杀青物粉碎：用粉碎机将铁观音茶叶杀青物粉碎后过30目筛。
109.(2)将步骤(1)中的铁观音杀青物加入纯净水，加水量为茶叶原料重量的25倍。
110.(3)经过步骤(2)后，进行水蒸气蒸馏提取香气成分，蒸馏时间为3h。
111.(4)将步骤(3)中蒸馏出的馏出液经过冷凝管冷却后进入收集器中，进行检测。
112.(5)将步骤(4)中的馏出液经过膜分离设备进行反渗透过滤，得到铁观音杀青物香气物质。
113.对工艺流程1步骤(5)得到的馏出物和空白对照步骤(4)得到的馏出物进行gc-ms定性定量检测：分别取工艺流程1步骤(5)得到的馏出物和空白对照步骤(4)得到的馏出物各6ml于顶空瓶中，加入10μl 2-辛醇(10mg/l)和2.0g氯化钠，密封。放入恒温加热磁力搅拌器(60℃)平衡15min后，插入已经老化的萃取针，顶空吸附45min，于气相色谱进样口处在250℃条件下解析5min，进行gc-ms分析。
114.检测结果表明，当纤维素酶、果胶酶和β-葡萄糖苷酶复合酶酶解时间为0.5h，得到的挥发性物质总量最高(图3)，酶解时间2h时醇类物质含量最高(图3)，当酶解时间达3h时挥发性物质含量不再增长，因此，三种酶同时加入的酶解时间控制在3h之内。
115.实施例3：铁观音杀青物酸解加酶解的增香工艺
116.1、本发明提供的铁观音杀青物分批加酶增香工艺流程包括：
117.(1)将铁观音茶叶杀青物粉碎：用粉碎机将铁观音茶叶杀青物粉碎后过40目筛。
118.(2)将步骤(1)中的铁观音杀青物加入纯净水，加水量为茶叶原料重量的20倍，加
入柠檬酸调节ph值至4.0，温度为50℃，酸解2h。酸解过程进行搅拌，速度为40rpm。
119.(3)经步骤(2)中的酸解后，加入naoh，调节ph值至5.5，加入纤维素酶(0.02％)进行酶解，温度为50℃，酶解2h。酶解过程进行搅拌，速度为40rpm。酶解结束后100℃灭酶10min，冷却。
120.(4)经过步骤(3)后，加入果胶酶(0.02％)进行酶解，温度为50℃，酶解2h。酶解过程进行搅拌，速度为40rpm。酶解结束后100℃灭酶10min，冷却。
121.(5)经过步骤(4)后，加入β-葡萄糖苷酶(0.02％)进行酶解，温度为50℃，酶解2h。酶解过程进行搅拌，速度为40rpm。酶解结束后100℃灭酶10min，冷却。
122.(6)经过步骤(5)酶解完成后，进行水蒸气蒸馏提取香气成分，蒸馏时间为2h。
123.(7)将步骤(6)中蒸馏出的馏出液经过冷凝管冷却后进入收集器中，进行检测。
124.2、空白对照的制备工艺流程如下：
125.(1)将铁观音茶叶杀青物粉碎：用粉碎机将铁观音茶叶杀青物粉碎后过40目筛。
126.(2)将步骤(1)中的铁观音杀青物加入纯净水，加水量为茶叶原料重量的20倍。
127.(3)经过步骤(2)后，进行水蒸气蒸馏提取香气成分，蒸馏时间为2h。
128.(4)将步骤(3)中蒸馏出的馏出液经过冷凝管冷却后进入收集器中，进行检测。
129.(5)将步骤(4)中的馏出液经过膜分离设备进行反渗透过滤，得到铁观音杀青物香气物质。
130.香气成分定性定量检测：取本实施例工艺流程1步骤(7)得到的馏出液、前述实施例1工艺流程1步骤(5)得到的馏出液和本实施例空白对照步骤(4)得到的馏出液各6ml于顶空瓶中，加入10μl 2-辛醇(10mg/l)和2.0g氯化钠，密封。放入恒温加热磁力搅拌器(60℃)平衡15min后，插入已经老化的萃取针，顶空吸附45min，于气相色谱进样口处在250℃条件下解析5min，进行gc-ms分析。
131.经过分析表明，分批加入纤维素酶、果胶酶和β-葡萄糖苷酶，增香效果明显优于同时加入这三种酶(图4、图5)。
132.对比例1：铁观音杀青物酸解增香工艺
133.1、铁观音杀青物加酸增香工艺流程包括：
134.(1)将铁观音茶叶杀青物粉碎：用粉碎机将铁观音茶叶杀青物粉碎后过50目筛。
135.(2)将步骤(1)中的铁观音杀青物加入纯净水，加水量为茶叶原料重量的20倍，加入柠檬酸调节ph值至3.5，温度为50℃，酸解1.5h。酸解过程进行搅拌，速度为50rpm。
136.(3)经过步骤(2)酸解完成后，进行水蒸气蒸馏提取香气成分，蒸馏时间为2h。
137.(4)将步骤(3)中蒸馏出的馏出液经过冷凝管冷却后进入收集器中，进行检测。
138.2、空白对照的制备工艺流程如下：
139.(1)将铁观音茶叶杀青物粉碎：用粉碎机将铁观音茶叶杀青物粉碎后过50目筛。
140.(2)将步骤(1)中的铁观音杀青物加入纯净水，加水量为茶叶原料重量的20倍。
141.(3)经过步骤(2)后，进行水蒸气蒸馏提取香气成分，蒸馏时间为2h。
142.(4)将步骤(3)中蒸馏出的馏出液经过冷凝管冷却后进入收集器中，进行检测。
143.(5)将步骤(4)中的馏出液经过膜分离设备进行反渗透过滤，得到铁观音杀青物香气物质。
144.香气成分定性定量检测：分别取工艺流程1步骤(4)得到的馏出液和空白对照步骤
(4)得到的馏出液各6ml于顶空瓶中，加入10μl2-辛醇(10mg/l)和2.0g氯化钠，密封。放入恒温加热磁力搅拌器(60℃)平衡15min后，插入已经老化的萃取针，顶空吸附45min，于气相色谱进样口处在250℃条件下解析5min，进行gc-ms分析。
145.经过分析表明，与空白对照相比，酸解能够提高铁观音中挥发性香气成分的提取总量(图6)和主要的三种醇类香气物质的提取量(图7)。
146.对比例2：铁观音杀青物酶解增香工艺
147.1、铁观音杀青物加酶增香工艺流程包括：
148.(1)将铁观音茶叶杀青物粉碎：用粉碎机将铁观音茶叶杀青物粉碎后过50目筛。
149.(2)将步骤(1)中的铁观音杀青物加入纯净水，加水量为茶叶原料重量的20倍，加入纤维素酶(0.03％)、果胶酶(0.03％)和β葡萄糖苷酶(0.03％)，温度为50℃，复合酶酶解2h。酶解结束后100℃灭酶10min。酶解过程进行搅拌，速度为50rpm。
150.(3)经过步骤(2)酶解完成后，进行水蒸气蒸馏提取香气成分，蒸馏时间为2h。
151.(4)将步骤(3)中蒸馏出的馏出液经过冷凝管冷却后进入收集器中，进行检测。
152.2、空白对照的制备工艺流程如下：
153.(1)将铁观音茶叶杀青物粉碎：用粉碎机将铁观音茶叶杀青物粉碎后过50目筛。
154.(2)将步骤(1)中的铁观音杀青物加入纯净水，加水量为茶叶原料重量的20倍。
155.(3)经过步骤(2)后，进行水蒸气蒸馏提取香气成分，蒸馏时间为2h。
156.(4)将步骤(3)中蒸馏出的馏出液经过冷凝管冷却后进入收集器中，进行检测。
157.(5)将步骤(4)中的馏出液经过膜分离设备进行反渗透过滤，得到铁观音杀青物香气物质。
158.香气成分定性定量检测：分别取工艺流程1步骤(4)得到的馏出液和空白对照步骤(4)得到的馏出液各6ml于顶空瓶中，加入10μl2-辛醇(10mg/l)和2.0g氯化钠，密封。放入恒温加热磁力搅拌器(60℃)平衡15min后，插入已经老化的萃取针，顶空吸附45min，于气相色谱进样口处在250℃条件下解析5min，进行gc-ms分析。
159.经过分析表明，与空白对照相比，酶解明显能够提高铁观音中挥发性香气成分的提取量(图8)和主要的三种香气物质的提取量(图9)。
160.对比例3
161.1、铁观音杀青物加酶增香工艺流程包括：
162.(1)将铁观音茶叶杀青物粉碎：用粉碎机将铁观音茶叶杀青物粉碎后过50目筛。
163.(2)将步骤(1)中的铁观音杀青物加入纯净水，加水量为茶叶原料重量的20倍，加入柠檬酸调节ph值至3.5，温度为50℃，酸解1h。酸解过程进行搅拌，速度为30rpm。
164.(3)经步骤(2)中的酸解后，加入naoh，调节ph值至5.0，加入纤维素酶(0.03％)、果胶酶(0.03％)和β葡萄糖苷酶(0.03％)，温度为50℃，复合酶酶解2h。酶解结束后100℃灭酶10min。酶解过程进行搅拌，速度为30rpm。
165.(4)经过步骤(2)酶解完成后，进行水蒸气蒸馏提取香气成分，蒸馏时间为2h。
166.(5)将步骤(3)中蒸馏出的馏出液经过冷凝管冷却后进入收集器中，进行检测。
167.同时，以空白样品和同样工艺流程制备的加入纤维素酶、果胶酶和木聚糖酶的铁观音杀青物样品的香气为对照样品(即除了将上述工艺流程中的β葡萄糖苷酶等量替换为木聚糖酶之外，其余步骤均完全相同)。
168.2、空白样品的制备工艺流程如下：
169.(1)将铁观音茶叶杀青物粉碎：用粉碎机将铁观音茶叶杀青物粉碎后过50目筛。
170.(2)将步骤(1)中的铁观音杀青物加入纯净水，加水量为茶叶原料重量的20倍。
171.(3)经过步骤(2)后，进行水蒸气蒸馏提取香气成分，蒸馏时间为2h。
172.(4)将步骤(3)中蒸馏出的馏出液经过冷凝管冷却后进入收集器中，进行检测。
173.(5)将步骤(4)中的馏出液经过膜分离设备进行反渗透过滤，得到铁观音杀青物香气物质。
174.3、对照样品的制备工艺流程如下：
175.除了将工艺流程1中的β葡萄糖苷酶等量替换为木聚糖酶之外，其余步骤均与工艺流程1完全相同。
176.香气成分定性定量检测：分别取工艺流程1步骤(5)得到的馏出液、对照样品步骤(5)得到的馏出液及空白样品步骤(4)得到的馏出液各6ml于顶空瓶中，加入10μl 2-辛醇(10mg/l)和2.0g氯化钠，密封。放入恒温加热磁力搅拌器(60℃)平衡15min后，插入已经老化的萃取针，顶空吸附45min，于气相色谱进样口处在250℃条件下解析5min，进行gc-ms分析。
177.经过分析表明，与加入木聚糖酶相比，加入β-葡萄糖苷酶效果更佳，更能明显提高铁观音中挥发性香气成分的提取量(图10)。
178.效果测试例
179.对实施例1、对比例1、对比例2中工艺流程1得到的样品进行感官评吸。用香精注射仪将实施例1、对比例1和对比例2中工艺流程1得到的铁观音杀青物提取物，按1％的比例均匀添加入参比卷烟中，同时将不添加铁观音杀青物提取物的参比卷烟作为原样，得到的4种烟支于(22
±
1)℃和rh(60
±
2)％环境中平衡48h，组织10名的专业评吸人员依据《yc/t 497-2014卷烟中式卷烟风格感官评价方法》对参比卷烟及添加铁观音杀青物提取物的卷烟进行对比评吸。评吸结果如图11、图12所示。
180.感官评价结果表明：在香气风格方面，本发明通过酸解处理、酶解处理及酸解酶解结合处理获得的提取物与原样相比，香韵风格保持一致，能够明显赋予卷烟清香、花香和甜香，略有辛香、青滋香，且效果方面酸解酶解结合处理》酶解处理》酸解处理》原样；在烟气特性方面，本发明通过酸解处理、酶解处理及酸解酶解结合处理获得的提取物与原样相比，对烟气特性的贡献保持一致，香气更为丰富、谐调，能够明显掩盖杂气，烟气更为细腻柔和，且效果方面与香气风格贡献相对一致，酸解酶解结合处理》酶解处理》酸解处理》原样。
181.表1：空白和酸解加酶解样品主要香气物质的相对含量表
182.183.184.185.[0186][0187]
虽然已经通过示例对本发明的一些特定实施例进行了详细说明，但是本领域的技术人员应该理解，以上示例仅是为了进行说明，而不是为了限制本发明的范围。本领域的技术人员应该理解，可在不脱离本发明的范围和精神的情况下，对以上实施例进行修改。本发明的范围由所附权利要求来限定。