本发明涉及药物，所述药物的摄入导致维生素B12的耗竭。
背景技术
在长期使用某些药物期间，血清维生素B12水平降低。这种药物的示例有二甲双胍。其他药物也已知会耗竭维生素B12。因此，如果患者之前具有低维生素B12水平，则建议医生(例如通过进行血液测试)监测治疗期间患者的维生素B12水平。
二甲双胍是作为速释制剂、缓释制剂以及还有固定剂量组合(fixed-dose combination,FDC)商购可得的。
组合产品的示例是XR。XR的每个膜包衣片剂都包含缓释盐酸二甲双胍片剂芯，所述片剂芯包衣有速释药物恩格列净(empagliflozin)。根据包装说明书，XR的一个可能的副作用是低维生素B12水平，或甚至维生素B12缺乏。
维生素B12的吸收低于正常可以通过增加维生素B12的摄入量来补偿。一些食物(例如肝脏和肾脏)包含相对较高量的维生素B12。然而，对于许多患者，尤其是对于素食者和严格素食者来说，增加对可食用内脏的食用不是一个选项。作为一个替代方案，可以服用维生素B12膳食补充剂。
尽管膳食补充剂是可容易获得的，但是已知当需要定期服用两片片剂而不是一片片剂时，患者的依从性众所周知很低。对于老年糖尿病患者来说尤其如此，因为糖尿病患者中往往存在进一步的联合用药。联合用药增加了所谓的“丸剂计数”(即要施用的片剂的数量)，并且因此增加了不良疗法依从性的风险。如果一个片剂包含处方药(Rx)，而第二片剂可在超市购买，则患者依从性会变得甚至更差。到目前为止，患者只是不习惯联合摄入来源于非常不同的供应渠道的片剂。此外，因维生素B12缺乏导致的症状发生得相当缓慢，并且可能与由慢性高血糖和糖尿病引起的症状无法区分。因此，省略一种或两种维生素B12补充剂将不会立即使患者的病症恶化。这也会不利地影响患者的依从性，因为在服药期间感觉不到多少缓解会影响患者中断治疗方案的决定。
需要一种更好的方式来处理由包含维生素B12耗竭药的口服剂型诱发的维生素B12耗竭。
技术实现要素：
为了减少丸剂计数并提高患者依从性，将维生素B12添加到包含维生素B12耗竭药的缓释片剂中。因此，(i)通过用缓释制剂代替速释制剂，和(ii)通过使制剂中包含维生素B12，使得维生素B12膳食补充剂的附加摄入变得多余，实现了丸剂计数减少。
构成本发明的基础的问题通过一种固体口服剂型得以解决，所述固体口服剂型包含用速释包衣包被的缓释片剂芯，其中所述芯包含至少一种维生素B12耗竭药，并且其中所述包衣包含维生素B12。
所述固体口服剂型将维生素B12从包衣释放到患者的胃中，而包含在片剂的缓释芯中的药物主要在患者的肠中释放。由于这种非常特殊的释放模式，患者的血液中的维生素B12水平以有意义的方式增加或维持。
维生素B12只有在胃中释放才能被吸收。为了吸收，维生素B12必须与内在因子形成复合物(B12-IF复合物)。所需的内在因子存在于胃中，但不存在于肠道中。如果在胃之后(即在肠道中)释放，则维生素B12不良地吸收或根本不被吸收。
为了在胃中释放，维生素B12应包含在本发明的剂型的速释包衣中。然而，为了防护光损伤，维生素B12最好应放置在包衣下面的芯中。因此，必须在两个同样非期望的替代方案之间做出艰难的选择。
添加过量的维生素B12和/或接受不利的短保质期将是一种解决这一困境的方式。然而，发明人已经发现了更复杂的技术解决方案来保护维生素B12免受光的影响，使得维生素B12可以包含在速释包衣中，而不管它的光敏感性。
在一个实施方式中，经喷雾干燥的维生素B12制剂包含在本发明的速释包衣中。与维生素B12晶体相比，经喷雾干燥的维生素B12制剂具有增加的光稳定性。因此，在一个优选实施方式中，本发明的固体口服剂型包含用速释包衣包被的缓释片剂芯，其中所述芯包含至少一种维生素B12耗竭药，并且其中所述包衣包含经喷雾干燥的维生素B12制剂。本发明还涉及经喷雾干燥的维生素B12制剂用于制造速释包衣的用途，其中所述速释包衣至少部分地覆盖包含至少一种维生素B12耗竭药的缓释片剂芯。
或者，可以在包含维生素B12的包衣之上添加第二保护层。这种附加保护层保护维生素B12免受光照，并且任选地包含至少一种光保护剂，例如二氧化钛(TiO2)。
在本发明的上下文中，维生素B12耗竭药优选为盐酸二甲双胍。盐酸二甲双胍是二甲双胍的药学上可接受的盐，并且主要用于治疗2型糖尿病。为了更有效地治疗2型糖尿病，盐酸二甲双胍可与第二抗糖尿病药(例如恩格列净)组合。
为了提高有效性和患者依从性，可以将两种通过不同机制发挥作用的药物在固定剂量组合(FDC)中组合。本发明的一个优选实施方式涉及盐酸二甲双胍和至少一种另外的抗糖尿病药(例如恩格列净)的FDC。因此，本发明的固体口服剂型优选包含用速释包衣包被的缓释片剂芯，
其中所述芯包含盐酸二甲双胍，并且
其中所述包衣包含维生素B12或其经喷雾干燥的制剂，以及至少一种另外的抗糖尿病药，所述至少一种另外的抗糖尿病药优选地为恩格列净。
为了甚至更有效地预防或治疗二甲双胍诱发的维生素B12缺乏，固体口服剂型的缓释芯中可以任选地包含至少一种离子钙源。离子钙是B12-IF复合物附着至回肠细胞表面受体所必需的。例如二甲双胍的药物与钙竞争粘膜细胞膜，并且因此诱发维生素B12吸收障碍。所述维生素B12吸收障碍是使用离子钙至少部分可逆的。
虽然维生素B12将在胃中释放(因此必须是剂型的速释包衣的一部分)，但是离子钙源可以位于剂型中的任何地方(例如包衣内和/或芯内)。然而，因为大多数离子钙源需要相当大量的空间，所以至少一种钙离子源优选包含在固体口服剂型的缓释芯中。因此，本发明的固体口服剂型优选包含用速释包衣包被的缓释片剂芯，
其中所述芯包含二甲双胍或其药学上可接受的盐和至少一种离子钙源，并且
其中所述包衣包含维生素B12。
作为离子钙源，可以使用任何药学上可接受的钙盐。然而，如果包含在缓释片剂芯中，则钙盐优选是柠檬酸的钙盐。到达患者的肠道的缓释片剂芯至少部分未溶解，并且因此片剂芯内的钙盐应充分可溶于肠液中。柠檬酸的钙盐在肠液中具有良好甚至优异的溶解性。因此，本发明的固体口服剂型优选包含用速释包衣包被的缓释片剂芯，
其中所述芯包含二甲双胍或其药学上可接受的盐和柠檬酸钙，并且
其中所述包衣包含维生素B12或其经喷雾干燥的制剂。
在一个甚至更优选的实施方式中，本发明的固体口服剂型优选包含用速释包衣包被的缓释片剂芯，
其中所述芯包含盐酸二甲双胍和柠檬酸钙，并且
其中所述包衣包含经喷雾干燥的维生素B12制剂和至少一种另外的抗糖尿病药，所述至少一种另外的抗糖尿病药优选为恩格列净。
本发明还涉及本文所述固体口服剂量作为药物例如用于治疗或预防二甲双胍诱发的维生素B12缺乏的用途。
最后，本发明还涉及一种制造固体口服剂型的方法，所述固体口服剂型包含缓释片剂芯和至少一种维生素B12耗竭药，其中所述缓释片剂芯具有包含维生素B12或其经喷雾干燥的制剂的速释包衣。
具体实施方式
本发明涉及一种固体口服剂型，所述固体口服剂型在胃中释放维生素B12，并在肠道中在延长的时间段内释放维生素B12耗竭药。维生素B12耗竭药优选为盐酸二甲双胍。
定义
术语“包括”(或包含)是开放性术语。因此，本文所述的固体口服剂型可包括多于一个包衣。例如，它可以包括两个包衣，其中内包衣包含维生素B12源，并且其中外包衣是保护内包衣的维生素B12免受光照的保护层。类似地，本文所述的固体口服剂量可以包含多于一种钙离子源。例如，它可以包含柠檬酸钙和无水磷酸二钙。后者在将盐酸二甲双胍造粒时是有用的，并且还可以增加正在用二甲双胍治疗的患者对维生素B12的吸收。因此，无水磷酸二钙可能具有双重功能性。
术语“固体口服药物剂型”是指诸如片剂、颗粒剂、胶囊剂和小袋的剂型。优选地，该术语是指包含用至少一种速释包衣包被的缓释芯的片剂或颗粒剂。颗粒剂可以装入空胶囊壳中或任何其他容器例如小袋中。最优选地，术语“固体口服药物剂型”是指包含用至少一种速释包衣包被的缓释片剂芯的片剂。
在本发明的上下文中，“包衣”优选是膜包衣。通常，本发明的速释包衣包含未溶解的粒子。所述粒子可以是维生素B12晶体或包含维生素B12的经喷雾干燥的粒子。因此，由于维生素B12的红色，本发明的包衣可能包含红点。
在本发明的上下文中，术语“缓释”涉及投配频率的降低。在本发明的上下文中，“缓释”是指维生素B12耗竭药，并且意为至少一种维生素B12耗竭药(例如盐酸二甲双胍)在延长的时间段内在体内缓慢释放，使得可以降低投配频率(并由此降低丸剂计数)。这种产品的一个示例是XR，其需要每天口服一次。用于相同的医疗适应症、也含有盐酸二甲双胍但不是缓释的其他产品(例如)需要每天服用三次或甚至四次。本发明的缓释片剂芯可以具有或不具有滞后时间。例如，至少一种维生素B12耗竭药的释放可以延迟直到片剂已经通过胃，然后在肠道中在延长的时间段内释放。然而，即使存在滞后时间，本发明的固体口服剂型通常也不是肠溶包衣的。
本发明的“速释包衣”包含维生素B12，以及任选的至少一种另外的活性药物成分(API)，例如恩格列净。因此，当包衣正在被溶解或以任何其他方式分解时，维生素B12和任何另外任选的API被释放到体内。在口服施用本发明的固体剂型后，包衣没有延迟地被胃液分解，使得大部分(如果不是全部的话)维生素B12和任何另外的任选API在所施用的固体口服剂型的残余物到达肠道之前被释放到胃中。在一个优选实施方式中，本发明的速释包衣使得能够将维生素B12和任选的恩格列净释放到胃中。
本发明的任选“保护包衣”至少部分地覆盖本发明的速释包衣(即，为外包衣)。在口服施用本发明的固体剂型后，保护包衣没有延迟的被胃液分解，使得胃液快速进入本发明的速释包衣(即，进入内包衣)。因此，本发明的保护包衣不是肠溶包衣。本发明的保护包衣的主要目的是保护内包衣的维生素B12免受光照。因此，保护包衣优选包含至少一种光保护剂。虽然不是优选的，但是它还可包含任何其他API，例如恩格列净。
本发明的固体药物剂型优选包含微晶纤维素(microcrystalline cellulose,MCC)。微晶纤维素是一种众所周知的通过纤维素的酸水解制备的赋形剂。在工业规模上，MCC是通过使用稀无机酸水解木材和/或棉花纤维素获得的。然后将经处理的浆状物进行冲洗，并在有或没有附加加工步骤(例如研磨)的情况下进行喷雾干燥。市场上有多种类型的微晶纤维素(MCC)是可得的。在本发明的上下文中，术语“微晶纤维素”包括由部分解聚的纤维素组成的任何类型的微晶纤维素，例如在T.Vehovec等人：“Influence of different types of commercially available microcrystalline cellulose on degradation of perindopril erbumine and enalapril maleate in binary mixtures”,Acta Pharm.62(2012)，第518页的表1中列出的赋形剂。还包括硅化微晶纤维素，例如SMCC。在本发明的上下文中，术语“硅化微晶纤维素”是指包含微晶纤维素(MCC)和二氧化硅例如胶体二氧化硅(colloidal silicon dioxide,CSD)的赋形剂。
维生素B12是众所周知的水溶性维生素。在本发明的上下文中，术语“维生素B12”是指维生素B12的任何同效维生素，并且包括维生素B12衍生物和/或维生素B12代谢物。然而，优选地，术语“维生素B12”是指氰钴胺。氰钴胺可以通过使用合适的微生物进行发酵来生产。
“结晶维生素B12”包含基于晶体的总重量至少98重量％的维生素B12。在一个实施方式中，本发明的固体口服剂型不包含任何结晶维生素B12。
本发明的固体口服剂型可以包含至少一种经喷雾干燥的维生素B12制剂。表述“经喷雾干燥的维生素B12制剂”是指通过将包含维生素B12和至少一种赋形剂的水溶液喷雾干燥能够获得的粉末，其中所述至少一种赋形剂优选选自由以下项组成的组：柠檬酸钠、柠檬酸三钠、柠檬酸、麦芽糖糊精柠檬酸和改性食物淀粉。在本发明的一个优选实施方式中，表述“经喷雾干燥的维生素B12制剂”是指通过将包含氰钴胺和至少一种赋形剂的水溶液喷雾干燥能够获得的粉末，其中所述至少一种赋形剂优选选自由以下项组成的组：柠檬酸钠、柠檬酸三钠、柠檬酸、麦芽糖糊精和改性食物淀粉。
基于晶体的总重量，维生素B12晶体的维生素B12含量为至少98重量％。由于至少一种赋形剂的存在，基于经喷雾干燥的制剂的总重量，经喷雾干燥的维生素B12制剂包含小于90重量％的维生素B12。经喷雾干燥的维生素B12制剂中的维生素B12的准确浓度取决于经喷雾干燥的制剂中的赋形剂的量。优选地，基于经喷雾干燥的制剂的总重量，本发明的经喷雾干燥的维生素B12制剂包含1重量％或更少的维生素B12。本领域技术人员应理解，不含维生素B12的经喷雾干燥的维生素B12制剂被排除。同样优选地，本发明的经喷雾干燥的维生素B12制剂是水溶性粉末或水分散性粉末，基于所述粉末的总重量，所述粉末包含1重量％或更少的氰钴胺。本领域技术人员应理解，不含维生素B12的粉末被排除。在本发明的最优选实施方式中，表述“经喷雾干燥的维生素B12制剂”是指通过将包含氰钴胺和至少一种赋形剂的水溶液喷雾干燥能够获得的粉末，其中所述赋形剂优选选自由以下项组成的组：柠檬酸钠、柠檬酸三钠、柠檬酸、麦芽糖糊精和改性食物淀粉，并且其中基于所述粉末的总重量，所述粉末包含1重量％或更少的氰钴胺。同样，本领域技术人员应理解，不含维生素B12的粉末被排除。
在本发明的上下文中，术语“二甲双胍”是指二甲双胍或其药学上可接受的盐。二甲双胍的可能最著名的药学上可接受的盐是盐酸二甲双胍。因此，在本发明的最优选实施方式中，术语“二甲双胍”是指盐酸二甲双胍。
盐酸二甲双胍具有不良的紧密性(compactibility)和流动性。因此，盐酸二甲双胍优选在压片之前造粒。在这种造粒过程期间，将二甲双胍转化为易于压缩的自由流动、基本上无尘的颗粒。在本发明的上下文中，术语“颗粒状二甲双胍”是指包含盐酸二甲双胍和至少一种药学上可接受的赋形剂的颗粒。对赋形剂没有特别限制。然而，当遵循EP 2 938 362的教导时，实现了良好品质的颗粒状二甲双胍，该专利据此以引用方式并入。
在本发明的上下文中，术语“钙盐”是指任何药学上可接受的钙盐。因此，该术语包括磷酸钙、碳酸钙和柠檬酸钙。碳酸钙是具有式CaCO3的化合物。术语“柠檬酸钙”包括柠檬酸一钙、柠檬酸二钙和柠檬酸三钙。已知的柠檬酸三钙盐包括无水柠檬酸钙(即，Ca3(C6H5O7)2)和二柠檬酸三钙四水合物(即[Ca3(C6H5O7)2(H2O)2]·2H2O)。术语“磷酸钙”包括无水磷酸钙和含水磷酸钙。已知的无水磷酸钙有无水磷酸一钙(Ca(H2PO4)2)、无水磷酸二钙(CaHPO4)或无水磷酸三钙(Ca3(PO4)2)。在本发明的最优选实施方式中，术语钙盐指无水磷酸二钙(CaHPO4)。
缓释芯
本发明的固体口服剂型包含缓释芯，所述缓释芯优选为缓释片剂芯。所述芯的目的是在延长的时间段内释放至少一种维生素B12耗竭药，使得可以减少维生素B12耗竭药的投配频率。
缓释芯可以通过任何已知的制造方法制造，只要它在延延长的时间段内在体内缓慢释放至少一种维生素B12耗竭药即可。因此，它可以通过例如造粒、挤出或压缩来制造。优选地，本发明的缓释芯是通过用压片机压制制造的缓释片剂芯。
本发明的缓释芯，特别是本发明的缓释片剂芯，优选包含至少一种维生素B12耗竭药和至少一种药学上可接受的赋形剂。更优选地，它包含二甲双胍或其药学上可接受的盐和至少一种药学上可接受的赋形剂。最优选地，它包含盐酸二甲双胍和至少一种药学上可接受的赋形剂。
优选的药学上可接受的赋形剂是控释剂(例如羟丙基甲基纤维素)、稀释剂(例如微晶纤维素和硅化微晶纤维素)、润滑剂(例如硬脂酸镁和山嵛酸甘油酯)和钙盐。特别优选的药学上可接受的赋形剂是DG，其已知为75重量％的微晶纤维素和25重量％的无水磷酸二钙的组合。
在本发明的一个优选实施方式中，本发明的缓释片剂芯是通过压缩包含颗粒状盐酸二甲双胍的混合物获得的。颗粒状盐酸二甲双胍可在Vistin Pharma(Oslo,Norway)商购获得，或者可使用如在EP 2 938 362 B1中公开的DG制造。
本发明的一个优选缓释片剂芯包含至少一种维生素B12耗竭药、至少一种控释剂、至少一种稀释剂、至少一种润滑剂和任选的至少一种钙离子源，并且其中所述钙离子源优选为钙盐，并且其中所述钙盐优选选自由以下项组成的组：磷酸钙、碳酸钙和柠檬酸钙，并且其中所述钙盐更优选选自由以下项组成的组：无水柠檬酸钙、二柠檬酸三钙四水合物、无水磷酸一钙、无水磷酸二钙、无水磷酸三钙和碳酸钙。
在至少一种维生素B12耗竭药是二甲双胍或其药学上可接受的盐的情况下，钙离子源优选为柠檬酸钙，更优选无水柠檬酸钙、二柠檬酸三钙四水合物、或它们的混合物。这并不排除除了柠檬酸钙之外还添加另一种钙离子源的可能性。举例来说，如果将盐酸二甲双胍用DG造粒，则本发明的缓释片剂芯包含盐酸二甲双胍、至少一种控释剂、至少一种润滑剂、至少一种稀释剂(优选为微晶纤维素)、无水二碱式磷酸钙和柠檬酸钙，其中所述柠檬酸钙优选为无水柠檬酸钙、二柠檬酸三钙四水合物、或它们的混合物。
在至少一种维生素B12耗竭药不是二甲双胍的情况下，本发明的缓释片剂芯可以但不需要包含钙离子源。尽管钙离子可推翻(override)二甲双胍诱发的维生素B12吸收障碍，但是钙离子可能或可能不会推翻由任何其他维生素B12耗竭药诱发的吸收障碍。然而，即使它们没有推翻吸收障碍，另一种维生素B12耗竭药也可能受益于用赋形剂例如DG造粒。因此，即使维生素B12耗竭药不是二甲双胍，本发明的缓释片剂芯也可以包含钙盐。
本发明的缓释片剂芯的释放速率由药学上可接受的赋形剂控制，特别是由控释剂控制，但令人惊讶的是，不是由柠檬酸钙控制。因此，柠檬酸钙是优选的钙离子源。
在一个优选实施方式中，在口服摄入本发明的固体口服剂型后，少于40重量％，更优选少于30重量％，甚至更优选少于20重量％，最优选少于10重量％的维生素B12耗竭药在处于禁食状况的患者的胃中释放。
在肠道中，二甲双胍与钙离子竞争粘膜细胞膜。因此，较高量的钙离子比较低量的钙离子更多地增加了维生素B12的吸收(除非达到饱和)。本发明的一个优选缓释片剂芯包含0.0001mol至0.012mol的Ca2+，优选0.0003mol至0.006mol的Ca2+，最优选0.0005mol至0.001mol的Ca2+。
构成本发明的基础的一个问题是提供了市售组合药物XR的改进版本。在最好的情况下，这种改进版本的包装说明书将不再需要警告长期治疗可能导致维生素B12缺乏。XR包含1000mg的盐酸二甲双胍。因此，本发明的一个优选缓释片剂芯包含1000mg盐酸二甲双胍和0.0001mol至0.012mol的Ca2+，优选0.0003mol至0.006mol的Ca2+，最优选0.0005mol至0.001mol的Ca2+。
本发明的固体口服剂型包含本发明的缓释芯，优选为本发明的缓释片剂芯。因此，本发明的一个优选实施方式涉及一种固体口服剂型，所述固体口服剂型包含用速释包衣包被的缓释片剂芯，
其中所述缓释片剂芯包含500mg至1000mg的盐酸二甲双胍、50mg至300mg的柠檬酸钙、至少一种控释剂、至少一种稀释剂和至少一种润滑剂，并且
其中所述柠檬酸钙优选为无水柠檬酸钙、二柠檬酸三钙四水合物或它们的混合物，并且
其中所述速释包衣包含维生素B12或其经喷雾干燥的制剂，并且
其中所述缓释片剂芯包含1000mg的盐酸二甲双胍。
包衣
本发明的固体口服剂型包含至少一个包衣。在它仅包含一个包衣的情况下，所述包衣是本文所述的速释包衣。为了将维生素B12释放到患者的胃中，一个速释包衣就足够了。然而，本发明的固体口服剂型可以包含本文所述的多个(例如两个或三个)速释包衣。在这种不太优选的实施方式中，速释包衣中的每个速释包衣将维生素B12释放到患者的胃中。
除了所述至少一种速释包衣之外，本发明的固体口服剂型任选地包含本文所述的保护包衣。尽管一个保护包衣足以保护包含在速释包衣中的维生素B12免受光照，但是本发明的固体口服剂型可以包含如本文所述的多个(例如，两个或三个)保护包衣。优选地，本发明的固体口服剂型包含一个保护包衣，所述保护包衣当口服施用所述固体口服剂型时与患者的唾液接触。
尽管有保护包衣，但是维生素B12还是迅速释放到胃中，使得在口服摄入固体口服剂型后，基于固体口服剂型中维生素B12的总重量，优选至少70重量％，更优选至少80重量％，甚至更优选至少85重量％，最优选至少90重量％的维生素B12在处于禁食状态的患者的胃中释放。因此，所示的重量％与B12同效维生素氰钴胺有关。因此，如果速释包衣包含经喷雾干燥的维生素B12制剂，则所示重量％与经喷雾干燥的维生素B12制剂中氰钴胺的总量有关。
优选地，本发明的固体口服剂型包含一个速释包衣和一个保护包衣，其中所述速释包衣包含维生素B12或其经喷雾干燥的制剂，并且其中所述保护包衣保护速释包衣的维生素B12免受光照。为此，保护包衣优选包含至少一种光保护剂，例如二氧化钛。
在速释包衣包含经喷雾干燥的维生素B12制剂的情况下，基于经喷雾干燥的维生素B12制剂的总重量，所述经喷雾干燥的维生素B12制剂优选包含0.01重量％至1重量％，更优选0.05重量％至0.5重量％，最优选0.1重量％的氰钴胺。
至于安全性，当证据充分时，设定维生素和矿物质的可耐受摄入量上限(称为UL)。在维生素B12的情况下，没有UL，因为没有关于高剂量导致副作用的人类数据。因此，对速释包衣中维生素B12的总量(或如果速释包衣中有多于一种物质)没有特别限制。然而，本发明的一个优选实施方式涉及一种固体口服剂型，所述固体口服剂型包含用速释包衣包被的缓释片剂芯，
其中所述缓释片剂芯包含至少一种维生素B12耗竭药，并且
其中所述速释包衣包含1μg至10μg氰钴胺，更优选1μg至6μg氰钴胺，最优选1μg至4μg氰钴胺。因此，所述氰钴胺可以作为结晶维生素B12、经喷雾干燥的维生素B12制剂或它们的混合物加入。
任选地，速释包衣和/或保护包衣可以包含至少一种另外的活性药物成分(API)。如果存在任选另外的API，则它优选包含在速释包衣中。
在所述至少一种维生素B12耗竭药是盐酸二甲双胍的情况下，所述任选另外的API优选为恩格列净或其药学上可接受的盐。本发明的一个优选实施方式涉及一种固体口服剂型，所述固体口服剂型包含用速释包衣包被的缓释片剂芯，
其中所述缓释片剂芯包含1000mg的盐酸二甲双胍、任选的至少一种钙离子源和至少一种药学上可接受的赋形剂，并且
其中所述速释包衣包含1μg至10μg氰钴胺，更优选1μg至6μg氰钴胺，最优选1μg至4μg氰钴胺，并且
其中所述速释包衣包含5mg至25mg的恩格列净，并且其中所述速释包衣包含5mg的恩格列净、或10mg的恩格列净、或12.5mg的恩格列净、或25mg的恩格列净，并且
其中所述速释包衣至少部分被保护包衣覆盖，并且
其中所述固体口服剂型的缓释片剂芯任选地包含至少一种钙盐，并且其中所述钙盐优选为柠檬酸钙，并且其中所述柠檬酸钙优选为无水柠檬酸钙或二柠檬酸三钙四水合物。
制造方法
本发明还涉及一种制造固体口服剂型的方法，所述固体口服剂型包含缓释芯和至少一种维生素B12耗竭药，其中所述缓释芯具有包含维生素B12或其经喷雾干燥的制剂的速释包衣。因此，所述缓释芯优选为缓释片剂芯。
在一个优选实施方式中，本发明的方法包括以下步骤：
a)提供缓释片剂芯，所述缓释片剂芯包含至少一种维生素B12耗竭药、任选的至少一种钙离子源和至少一种药学上可接受的赋形剂，以及
b)为步骤a)的缓释片剂芯提供包含维生素B12或其经喷雾干燥的制剂的速释包衣，
其中所述至少一种维生素B12耗竭药是二甲双胍或其药学上可接受的盐，并且其中所述至少一种维生素B12耗竭药更优选是盐酸二甲双胍，并且
其中所述至少一种钙离子源优选为钙盐，并且其中所述钙盐优选选自由以下项组成的组：磷酸钙、碳酸钙和柠檬酸钙，并且其中所述钙盐更优选选自由以下项组成的组：无水柠檬酸钙、二柠檬酸三钙四水合物、无水磷酸一钙、无水磷酸二钙、无水磷酸三钙和碳酸钙。
步骤a)优选包括将至少一种维生素B12耗竭药与至少一种钙盐和任选的微晶纤维素干法造粒的步骤，其中所述钙盐优选为磷酸钙，并且其中所述钙盐最优选为无水磷酸二钙。
步骤b)优选通过在步骤a)的缓释片剂芯上喷涂液体速释包衣来完成。所述液体速释包衣优选通过将维生素B12或其经喷雾干燥的制剂与溶剂(例如乙醇)和至少一种药学上可接受的粘合剂混合而获得。
经喷雾干燥的维生素B12制剂保护维生素B12免受光照。因此，经喷雾干燥的维生素B12制剂应保持完整/不溶于液体速释包衣中。这可以通过以合适的方式选择溶剂来实现。优选的溶剂是乙醇，因为维生素B12和市售的经喷雾干燥的维生素B12制剂都几乎不溶于乙醇或根本不溶于乙醇。由于维生素B12的红色，缓释片剂芯在用任选的保护包衣覆盖之前可能会有红点，可为肉眼可见的。
液体速释包衣还可以包含另一种活性药物成分，所述另一种活性药物成分优选地为恩格列净或其药学上可接受的盐。因此，本发明的方法优选包括以下步骤：
a)提供包含盐酸二甲双胍、至少一种钙盐和至少一种药学上可接受的赋形剂的缓释片剂芯，以及
b)为步骤a)的缓释片剂芯提供包含恩格列净和维生素B12或其经喷雾干燥的制剂的速释包衣，
其中所述钙盐优选为柠檬酸钙，并且其中所述柠檬酸钙优选为无水柠檬酸钙或二柠檬酸三钙四水合物。
本发明还涉及经喷雾干燥的维生素B12制剂用于制造速释包衣的用途，其中所述速释包衣至少部分地覆盖包含至少一种维生素B12耗竭药的缓释芯，并且其中所述缓释芯优选为缓释片剂芯。
固体口服剂型的用途
本发明还涉及本文所述的固体口服剂型，所述固体口服剂型用于用作药物。本文所述的固体口服剂型优选包含盐酸二甲双胍。因此，本发明的一个实施方式涉及一种固体口服剂型，所述固体口服剂型包含用速释包衣包被的缓释片剂芯，
其中所述缓释片剂芯包含盐酸二甲双胍、任选的至少一种钙离子源和至少一种药学上可接受的赋形剂，并且
其中所述速释包衣包含维生素B12或其经喷雾干燥的制剂，
所述固体药物剂型用于治疗需要二甲双胍的患者。
患有糖尿病的患者可能需要二甲双胍。因此，本发明还涉及本文所述的固体口服剂型，所述固体口服剂型用于治疗糖尿病。本发明的一个优选实施方式涉及一种固体口服剂型，所述固体口服剂型包含用速释包衣包被的缓释片剂芯，
其中所述缓释片剂芯包含盐酸二甲双胍、任选的至少一种钙离子源和至少一种药学上可接受的赋形剂，并且
其中所述速释包衣包含恩格列净和维生素B12或其经喷雾干燥的制剂。
所述固体口服剂型用于治疗糖尿病。
本发明还涉及治疗或预防药物诱发的维生素B12缺乏的方法，所述方法包括施用本文所述的固体口服剂型的步骤。在一个优选实施方式中，本发明涉及一种治疗或预防二甲双胍诱发的维生素B12缺乏的方法，所述方法包括施用本文所述的固体口服剂型的步骤。
长期使用二甲双胍治疗已经与血清维生素B12水平降低有关，这可能导致周围神经病变。因此，本发明还涉及一种预防二甲双胍诱发的周围神经病变的方法，所述方法包括施用本文的固体口服剂型的步骤。另一个实施方式涉及如本文所述的固体口服剂型，所述固体口服剂型用于预防二甲双胍诱发的周围神经病变。
附图
图1示出了含有盐酸二甲双胍的未包衣片剂芯在禁食状态模拟胃液(Fasted State Simulated Gastric Fluid,FaSSGF)中的溶出曲线。测试了两种芯：有和没有钙盐。表2a和表2b中给出了两种芯的组成。
图2示出了含有盐酸二甲双胍的未包衣片剂芯在禁食状态模拟肠液(Fasted State Simulated Intestinal Fluid,FaSSIF)中的溶出曲线。如在图1所示的实验中，测试了相同的两种类型的芯。
图3a、图3b和图3c涉及经包衣的片剂芯的溶出曲线。包衣包含维生素B12源。测试了两种维生素B12源：结晶维生素B12和经喷雾干燥的维生素B12制剂。因此，测试了两种经包衣的芯。表5a和表5b中给出了两种包衣的组成。
图3a示出了关于结晶维生素B12，二甲双胍和恩格列净在FaSSGF中的溶出曲线。图3b示出了关于经喷雾干燥的维生素B12制剂，二甲双胍和恩格列净在FaSSGF中的溶出曲线。图3c示出了两种包衣在FaSSGF中的恩格列净溶出度比较。
图4a、图4b和图4c涉及如图3a、图3b和图3c所示的类似实验。然而，对于这些实验，溶出曲线是在FaSSIF而不是FaSSGF中测量的。
图4a示出了关于结晶维生素B12，二甲双胍和恩格列净在FaSSIF中的溶出曲线。图4b示出了关于经喷雾干燥的维生素B12制剂，二甲双胍和恩格列净在FaSSIF中的溶出曲线。图4c示出了两种包衣在FaSSIF中的二甲双胍溶出度比较。
实施例
实施例1(优选离子钙源的选择)
在实施例1中，通过用电感耦合等离子体发射光谱法(inductively coupled plasma optical emission spectrometry,ICP-OES)测定Ca2+离子含量，分析了四种不同钙盐在模拟肠液中的溶解度。
所述钙盐是：
—碳酸钙(95MD，可在Particle Dynamics获得)，
—无水磷酸二钙(DiCafos A150，可在Budenheim获得)，
—二柠檬酸三钙四水合物(可在Merck获得)
—无水柠檬酸钙(可在Gadot获得)。
增溶介质是：
—SIF(模拟肠液，pH＝6.8，根据Ph.Eur.制备)
将溶出介质加热至37℃，并于此温度执行分析。在分析期间，将盐加入到增溶介质中，并保持混合24h。然后，将溶液过滤，并使用ATR-IR分析研究沉淀物以确认起始材料(例如相应的Ca盐)的存在。衰减全反射(attenuated total reflection,ATR)是一种与红外光谱结合使用的采样技术，其使样品能够在固态或液态下直接进行检查，而无需进一步准备。对经过滤的溶液进行Ca2+离子含量分析。所获得的溶解度结果显示在表1中。
表1
为了在体内吸收维生素B12，需要形成维生素B12-IF复合物，所述维生素B12-IF复合物然后与回肠中的肠细胞受体结合。对于这个过程，钙离子应该存在于患者的回肠中。
因为本发明的片剂芯是缓释片剂芯，所以它部分或完全不溶解地到达患者的肠道。如果芯包含钙盐，则所述钙盐也部分或完全不溶解地到达患者的肠道。在回肠中保持不溶解的钙盐不会显著增加维生素B12的吸收。因此，包含在缓释芯中的任何钙盐都应该很好地溶解在肠液中。
实施例1表明柠檬酸钙盐在肠液中很好地溶解。因此，柠檬酸钙盐例如二柠檬酸三钙四水合物和无水柠檬酸钙特别适合包含在本发明的缓释片剂芯中。
实施例2(含有和不含有钙盐的未包衣的缓释二甲双胍芯的制备)
对于二甲双胍芯的压片混合物，将表2a和表2b中列出的除硬脂酸镁和山嵛酸甘油酯(外部相)之外的单独组分倒入2.5L粉末玻璃瓶中，并使用Turbula 3D混合器/搅拌机(WAB plc.Muttenz,Switzerland)以32rpm共混16分钟。随后，使硬脂酸镁和山嵛酸甘油酯筛分通过500微米目大小的筛，并加入到之前的共混物中。在以32rpm额外共混4分钟后，将该最终压片混合物转移到来自Korsch plc.(Berlin,Germany)的XP1偏心压机中。
在片剂芯不含柠檬酸钙的情况下，组成的唯一区别是通过添加更多Prosolv SMCC 90(至20.4重量％，参见表2b)补偿(替代)了14.5重量％的柠檬酸钙。
表2a显示了为含有柠檬酸钙的片剂芯的情况下的组成。
对于所有芯，使用31.52±1.16kN的平均压缩力和每分钟10片片剂的压片速度。
表2a
表2b
所使用的冲头直径为20mm，具有两个圆形的平面侧面。目标片剂重量为1.50g，所得芯性质列于表3中。片剂重量是在来自Mettler Toledo ltd.(Greifensee,Switzerland)的PB 303-LDR变量程天平(PB 303-LDR Delta Range balance)上记录的。使用来自Erweka ltd.(Heusentamm,Germany)的片剂硬度测试仪TBH 220TD测量破碎力和片剂高度。根据USP<1216>(10片片剂，以25rpm进行100转)使用来自Erweka ltd.(Heusentamm,Germany)的TA 120易碎性测试仪进行易碎性测试。
表3
实施例3(含有和不含有钙盐的未包衣的缓释二甲双胍芯的溶出数据)
在实施例3中，测试了钙盐添加对盐酸二甲双胍释放的影响。
在来自Erweka ltd.(Heusenstamm,Germany)的USP 2设备DT600 HH上一式三份地执行溶出度测试。使用75rpm的桨速和37℃的温度。所得的溶解曲线如图1和图2所示。使用900ml禁食状态模拟胃液(FaSSGF)和禁食状态模拟肠液(FaSSIF)作为每个芯的溶出介质。
生物模拟介质FaSSIF和FaSSGF的制备；
表4中描述了所述组合物的详细概况。对于1升FaSSIF缓冲液，将0.420g氢氧化钠丸粒(Sigma-Aldrich Chemie plc.；Buchs,Switzerland)、3.954g无水磷酸二氢钠(Sigma-Aldrich Chemie plc.；Buchs,Switzerland)和6.186g氯化钠(Sigma-Aldrich Chemie plc.；Buchs,Switzerland)溶于1升纯净水中。用1M盐酸(Merck KGaA.；Darmstadt,Germany)调节pH值。最后，将2.240g的SIF粉末(Biorelevant.com ltd.；London United Kingdom)溶于总体积为1L的缓冲液中。在磁力搅拌板上搅拌2小时后，FaSSIF就是即用的了。
在1升用于生物相关介质FaSSGF的缓冲液中，将1.999g氯化钠(Sigma-Aldrich Chemie plc.；Buchs,Switzerland)溶于1升纯净水中。用1M盐酸(Merck KGaA.；Darmstadt,Germany)调节pH值。最后，将0.0597g的SIF粉末(Biorelevant.com ltd.；London United Kingdom)溶于总体积为1L的缓冲液中。将用于介质的纯净水用来自Satorius Lab Instruments GmbH&Co.KG(Germany)的arium Pro进行处理，并且在25℃下的电导率≤0.055μS/cm。
表4
在不同时间点采集2ml样品(参见图1和图2)，通过立即用2ml的FaSSGF或FaSSIF替换来使溶出容器中的体积保持恒定。将样品滤过来自infochroma plc.(Goldau Switzerland)的Titan PTFE注射器过滤器(17mm；0.45μm)，并立即密封在2ml棕色HPLC玻璃小瓶(Wicom Germany ltd.,Heppenheim,Germany)中。
HPLC分析：
在室温(room temperature,RT)下，在来自Agilent Technologies ltd.(Waldbronn,Germany)的HPLC 1200系列仪器上使用反相方法，使用UV检测器在277nm、1ml/min的流动速率和20μL的进样体积下一式三份地测量药物浓度。HPLC配备有来自Agilent Technologies的疏水C18柱(ZORBAX Eclipse Plus,5μm,2.1×150mm)。使用50％(v/v)的甲醇和50％(v/v)的磷酸盐缓冲液(pH 3.0)作为流动相。对于磷酸盐缓冲液，将6.8g磷酸钾溶于1升纯净水中，并用磷酸(85％)将pH调节至3.0。用于流动相的所有化学品均由Sigma-Aldrich Chemie plc.(Buchs,Switzerland)供应。
图1和图2示出了实施例3中获得的数据。
结论：
实施例3的数据涉及未包衣的片剂芯，而本发明的固体口服剂型包含用至少一个速释包衣覆盖的片剂芯。因此，在口服施用本发明的固体口服剂型后，首先需要溶解片剂芯的包衣。图1所示的数据(FaSSGF)涉及一旦包衣溶解就会发生的情况的模拟。如图1所示，在患者的胃中(即在胃液中)，只有有限量的二甲双胍将从片剂芯中释放出。图1还显示，柠檬酸钙的加入略微延迟了二甲双胍在胃液中的释放。这是可接受的，因为目标是提供二甲双胍的缓释制剂。
口服施用本发明的固体口服剂型约30-60分钟后，至少部分未溶解的片剂芯(没有包衣；包衣已经在胃中溶解)将通过幽门到达患者的十二指肠。芯从胃传递到肠所需的确切时间量取决于患者的状态(进食或禁食)。图2所示的数据(FaSSIF)涉及当至少部分未溶解的片剂芯到达患者的肠道时发生的情况的模拟。含钙和不含钙的二甲双胍片剂芯显示了缓释剂型的溶出曲线。在FaSSIF中8小时后，对于不含柠檬酸钙的芯，89±3.5％的二甲双胍被释放，并且对于含柠檬酸钙的芯，93±1.3％的二甲双胍被释放。
因此，添加柠檬酸钙不会显著影响二甲双胍在肠道中的释放。当寻求延长二甲双胍的现有批准的缓释制剂的产品线扩展时这是一个重要的方面，所述缓释制剂允许每天投配一次。预计柠檬酸钙可以添加到现有批准的制剂中，而不会改变二甲双胍的释放曲线。换句话说，当将柠檬酸钙添加到现有批准的制剂中时，有望获得生物等效性制剂。
实施例4(包含钙盐并使用两种不同来源的维生素B12的芯包衣)
在实施例4中，制备了根据本发明的一个优选实施方式的固体口服剂型。
首先，制造与实施例2的芯相同的芯。所述芯的组成与表2所示的组成相同，即芯包含盐酸二甲双胍和二柠檬酸三钙四水合物。然后包被如此获得的缓释芯。
使用来自Glatt(Pratteln,Switzerland)的实验室包衣机GC-1对缓释芯进行包衣。生产了两个不同批次的包衣片剂。在第一批次中，使用结晶维生素B12作为维生素B12源。在第二批次中，使用经喷雾干燥的维生素B12制剂(0.1％WS，可在DSM Nutritional Products,Switzerland商购获得)作为维生素B12源。
在这两种情况下，片剂芯都包被有两个包衣层。第一包衣层含有维生素B12(结晶维生素B12或经喷雾干燥的维生素B12制剂)和恩格列净。然后在第一包衣层之上添加第二包衣层作为保护层。
在第一批次中，在将结晶维生素B12用作维生素B12源的情况下，加入了相当厚的保护层，因为结晶维生素B12对光高度敏感。在第二批次中，在将经喷雾干燥的维生素B12制剂用作维生素B12源的情况下，加入了相当薄的保护层，因为经喷雾干燥的维生素B12制剂不如结晶维生素B12那么对光敏感。
表5a涉及使用结晶维生素B12作为维生素B12源(即第一批次)，并显示了两种包衣层的组成。
表5a
表5b涉及使用经喷雾干燥的维生素B12制剂作为维生素B12源(即第二批次)，并且还显示了两个包衣层的组成。
表5b
第一包衣层包含来自Evonik(Darmstadt,Germany)的Eudragit E PO Ready-Mix。它是一种即用型混合物，其包含碱性丁基化甲基丙烯酸酯共聚物、滑石和二氧化钛。将恩格列净(BOC Sciences,Shirley NY,USA)以足够的量添加以达到25mg/片剂的剂量。将所有固体成分称重并加入玻璃烧杯中。提供溶剂中约10％的固体含量，以获得可良好泵送的包衣悬浮液。向玻璃烧杯中的固体中加入总量2/3的纯EtOH，并以约200rpm的速度用IKA搅拌叶片(Staufen,Germany)持续搅拌约45min。然后加入剩下的纯EtOH，并混合5min以获得均匀的悬浮液。
所有包衣工艺都使用相同的工艺参数；所述工艺参数呈现在表6中。
表6
片剂批次中的每个片剂的增重和包衣时间在表7中呈现。对于使用结晶维生素B12作为维生素B12源的批次，增加第二包衣层的包衣时间以获得更厚的保护层。通过更高的增重证实了所靶向的厚度增加。
表7
测定分析的结果呈现在表8中。
表8
实施例5(实施例4中制造的两种不同类型的固体口服剂型的含量分析)
在实施例4中制造的固体口服剂型中测量了维生素B12、二甲双胍和恩格列净的含量。
维生素B12含量分析：
包衣片剂的维生素B12测定也采用HPLC方法进行。维生素B12是一组同效维生素的统称。用这种方法测定的所有同效维生素都是氰钴胺。样品制备如下：分析了四片独立的片剂。使用乙酸钠缓冲液从样品中提取单独的同效维生素，并在氰化钾的帮助下将所述同效维生素转化为同效维生素氰钴胺(R＝-CN)。为了纯化，使提取物的等分试样通过免疫亲和柱，所述免疫亲和柱含有选择性结合氰钴胺的特异性抗体。然后用甲醇从柱中洗脱出氰钴胺。检测是在361nm波长下进行的。
包衣片剂的经喷雾干燥的维生素B12制剂的平均维生素B12含量如表9所示。
表9
二甲双胍和恩格列净含量分析：
对每批次包衣片剂中的五片片剂(含有结晶维生素B12和含有维生素B12 0.1％WS滴定)进行二甲双胍和恩格列净的API含量分析。为此目的，将每片片剂分散在250ml的HPLC流动相中(50:50v/v的甲醇:磷酸盐缓冲液，pH 3.0)中，并在铝箔覆盖的瓶中以800rpm(磁力搅拌器)搅拌48小时。从各个片剂分散体中取出4个样品，病用HPLC流动相稀释至1:4以得到每升流动相的片剂的总浓度。在进行HPLC分析之前，将稀释的样品混合并用来自infochroma plc.(Goldau Switzerland)的Titan PTFE注射器过滤器(17mm；0.45μm)进行过滤。所得药物含量如表10a和表10b所示。
表10a涉及使用结晶维生素B12作为维生素B12源，并显示了二甲双胍和恩格列净的平均浓度。
表10a
表10b涉及使用经喷雾干燥的维生素B12制剂作为维生素B12源，并且还显示了二甲双胍和恩格列净的平均浓度。
表10b
实施例6(实施例4中提供的两种不同类型的固体口服剂型在胃液中的溶出测试)
在包衣后，以与实施例3中描述的未包衣片剂芯相同的方式，分析来自包衣片剂的二甲双胍、恩格列净和维生素B12在FaSSGF中的溶出曲线。
图3a、图3b和图3c示出了二甲双胍和恩格列净在FaSSGF中的溶出曲线。
图3a示出了含有结晶维生素B12的包衣片剂中二甲双胍和恩格列净在FaSSGF中的溶出曲线。图3b示出了含有经喷雾干燥的维生素B12制剂(0.1％WS)的包衣片剂中二甲双胍和恩格列净在FaSSGF中的溶出曲线。图3c示出了在含有维生素B12 0.1％WS和含有结晶维生素B12的速释包衣在FaSSGF中的恩格列净溶出度比较。
当在包衣中使用结晶维生素B12或经喷雾干燥的维生素B12制剂(WS 0.1％)时，两个批次之间的溶出度曲线没有显著差异。
在30分钟后，两个批次的速释包衣均完全溶解在FaSSGF中，并且在15分钟后，恩格列净已经溶解高达66.4±0.2％。
对于两个批次，在FaSSGF中溶出2小时(37℃和75rpm)后，少于30％的二甲双胍溶解，并且在1小时后仅约17％的二甲双胍溶解。预计在该时间量后，固体剂型的残余物将已经从胃(胃液)通过幽门进入十二指肠(肠液)。
实施例7(实施例4中提供的两种不同类型的固体口服剂型在肠液中的溶出测试)
以与实施例3中描述的未包衣片剂芯相同的方式，分析来自包衣片剂的二甲双胍、恩格列净和维生素B12在FaSSIF中的溶出曲线。
图4a、图4b和图4c示出了二甲双胍和恩格列净在FaSSIF中的溶出曲线。
图4a示出了含有结晶维生素B12的包衣片剂中二甲双胍和恩格列净在FaSSIF中的溶出曲线。
图4b描绘了含有经喷雾干燥的维生素B12制剂(0.1％WS)的包衣片剂中的二甲双胍和恩格列净在FaSSIF中的溶出曲线。
图4c示出了使用维生素B12 0.1％WS时和使用结晶维生素B12时二甲双胍在FaSSIF中的溶出度的比较。
在肠液中，在两个包衣层溶出后，两个批次的二甲双胍的延长释放是清晰可见的。在8小时后，大于80％的二甲双胍被释放。
即使在图4a、图4b和图4c中可以看到两个包衣层的效应(即滞后时间)，但是所述效应将不会在体内观察到。在口服施用本发明的剂型后，所述剂型首先到达胃，所述剂型在胃中暴露于胃液。在胃中的时候，两个保护层将被溶解。在剂型会将暴露于肠液的时候，这两个包衣层就将不见。