1.本发明属于护肤品技术领域，具体涉及一种含长白山野山参细胞水提取物的抗衰霜。


背景技术：

2.皮肤衰老主要分为自然衰老和光老化两种形式，自然衰老主要由遗传因素引起，明显特征为皱纹的出现和皮肤的松弛。而光老化指皮肤衰老过程紫外线损害的积累，是自然老化和紫外线辐射共同作用的结果。皮肤衰老主要表现为皮肤对机体的防护能力和调节能力减退，出现皮肤颜色、形态、色泽等外观变化。随着年龄的增长，皮肤暴露部位粗燥、弹性下降，皱纹加深加粗、不规则性色素沉着、血管扩张、表皮角化不良、真皮弹力纤维变性及降解产物蓄积等。
3.随着人们生活水平的提高，抗衰老已成为一个持久的主题，抗衰老护肤品市场也因此得以飞速发展。虽然现有市场上充斥的各种各种的抗衰老护肤品，仍无法满足社会不同类型人的需求，研制一种具有抗衰老的产品对市场具有较大的意义。
4.长白山野山参是自然孕育的天然瑰宝之一，它生长在海拔一千五百米到两千米的原始森林中，具有补五脏、安精神、定魂魄、止惊吓、除邪气、明目、开心、益智、久服延年益寿，野山参在我国应用有上千年的历史，目前越来越稀少，野生山参对生长环境要求比较高并且在深山里生长很慢，60～100年的山参，其根往往也只有几十克重。野山参比较难采，生长年限越久的，药效就越佳。因其产量稀少而滋补效果显著，在世界上享有极高的声誉，由于数量稀少，其使用受到限制，尤其是长白山百年野山参。基于每一种未分化的细胞潜在包含山参所有的成分，通过植物细胞培养技术对长白山野山参细胞进行扩大培养，获得一种含长白山野山参细胞水提取物的抗衰霜的相关研究还未见报道。


技术实现要素：

5.鉴于此，本发明的目的是提供了一种含长白山野山参细胞水提取物的抗衰霜及其制备方法。
6.本发明目的是通过以下方式实现：
7.本发明提供一种含长白山野山参细胞水提取物的抗衰霜，按重量份计算，包括如下组成部分：
8.纯水50～75份、保湿剂10～25份、增稠剂0.2～0.8份、螯合剂0.05～0.4份、润肤剂8～20份、乳化剂3-6份、皮肤调理剂1-10份、长白山野山参细胞水提取物 0.1～10份、香精0.02～0.4份和防腐剂0.1～0.8份。
9.优选地，所述保湿剂选自甘油、丙二醇、丁二醇、1,2-己二醇、聚谷氨酸、透明质酸钠、海藻糖、甜菜碱中的一种或两种以上的组合物。
10.优选地，所述增稠剂选自黄原胶、丙烯酸(酯)类/c10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物、丙烯酰二甲基牛磺酸铵/vp共聚物、鲸蜡硬脂醇中的一种或两种以上的组合物。
11.优选地，所述的螯合剂选自edta-2na、四羟丙基乙二胺中的一种或两种以上的组合物。
12.优选地，所述的润肤剂选自角鲨烷、霍霍巴籽油、辛酸/癸酸甘油三酯、聚二甲基硅氧烷、生育酚乙酸酯、环五聚二甲基硅氧烷中的一种或两种以上的组合物。
13.优选地，所述的乳化剂选自氢化卵磷脂、鲸蜡醇磷酸酯钾、peg-20甲基葡糖倍半硬脂酸酯、甲基葡糖倍半硬脂酸酯、聚山梨醇酯-20、聚甘油-3甲基葡糖二硬脂酸酯中的一种或两种以上的组合物。
14.优选地，所述的皮肤调理剂选自泛醇、烟酰胺、甘草酸二钾、尿囊素、羟乙基哌嗪乙烷磺酸中的一种或两种以上的组合物。
15.优选地，所述香精选自花香、果香、青香、木香中的一种或两种以上的组合物。
16.优选地，所述防腐剂选自尼泊金甲酯、尼泊金丙酯、苯氧乙醇、乙基己基甘油中的一种或两种以上的组合物。
17.优选地，所述抗衰霜包括如下重量百分数的组分：丙烯酸(酯)类/c10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物0.05～0.3％，丁二醇2％～6％，甘油2％～5％，黄原胶0.05％～0.3％，透明质酸钠0.01％～0.1％，聚谷氨酸钠0.01％～0.1％，edta-2na 0.03％～0.1％，尿囊素 0.05％～0.3％，甘草酸二钾0.01％～0.2％，甜菜碱1％～3％，海藻糖0.1％～1％，羟苯甲酯0.15％～0.3％，氢化卵磷脂0.01％～0.2％，peg-20甲基葡糖倍半硬脂酸酯1％～3％，甲基葡糖倍半硬脂酸酯1％～3％，辛酸/癸酸甘油三酯1％～4％，聚二甲基硅氧烷1％～5％，生育酚乙酸酯0.1％～0.5％，羟苯丙酯0.05％～0.5％，角鲨烷0.5％～3％，鲸蜡硬酯醇 0.5％～3％，霍霍巴籽油1％～3％，环五聚二甲基硅氧烷2％～10％，四羟丙基乙二胺 0.1％～0.5％，苯氧乙醇和乙基己基甘油混合液0.2％～1％，羟乙基哌嗪乙烷磺酸 1％～3％，烟酰胺1％～3％，泛醇0.1％～1％，香精0.01％～0.1％，长白山野山参细胞水提取物4-6％，余量为水。
18.优选地，所述抗衰霜包括如下重量百分数的组分：丙烯酰二甲基牛磺酸铵/vp共聚物0.05～0.3％，丁二醇2％～6％，甘油2％～5％，黄原胶0.05％～0.3％，透明质酸钠 0.01％～0.1％，聚谷氨酸钠0.01％～0.1％，edta-2na 0.03％～0.1％，尿囊素0.05％～0.3％，甘草酸二钾0.01％～0.2％，甜菜碱1％～3％，海藻糖0.1％～1％，羟苯甲酯0.15％～0.3％，氢化卵磷脂0.01％～0.2％，聚山梨醇酯-20 1％～3％，鲸蜡醇磷酸酯钾0.1％～1％，辛酸/ 癸酸甘油三酯1％～4％，聚二甲基硅氧烷1％～5％，生育酚乙酸酯0.1％～0.5％，羟苯丙酯0.05％～0.5％，角鲨烷0.5％～3％，鲸蜡硬酯醇0.5％～3％，霍霍巴籽油1％～3％，环五聚二甲基硅氧烷2％～10％，四羟丙基乙二胺0.1％～0.5％，苯氧乙醇和乙基己基甘油混合液0.2％～1％，羟乙基哌嗪乙烷磺酸1％～3％，烟酰胺1％～3％，泛醇0.1％～1％，香精0.01％～0.1％，长白山野山参细胞水提取物4-6％，余量为水。
19.优选地，所述抗衰霜包括如下重量百分数的组分：丙烯酸(酯)类/c10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物0.05～0.3％，丁二醇2％～6％，甘油2％～5％，丙烯酰二甲基牛磺酸铵/vp共聚物0.05％～0.3％，透明质酸钠0.01％～0.1％，聚谷氨酸钠0.01％～0.1％， edta-2na 0.03％～0.1％，尿囊素0.05％～0.3％，甘草酸二钾0.01％～0.2％，甜菜碱 1％～3％，海藻糖0.1％～1％，羟苯甲酯0.15％～0.3％，氢化卵磷脂0.01％～0.2％，聚山梨醇酯-20 1％～3％，peg-20甲基葡糖倍半硬脂酸酯1％～3％，聚甘油-3-甲基葡糖二硬脂酸酯0.1％
～1％，辛酸/癸酸甘油三酯1％～4％，聚二甲基硅氧烷1％～5％，生育酚乙酸酯0.1％～0.5％，羟苯丙酯0.05％～0.5％，角鲨烷0.5％～3％，鲸蜡硬酯醇0.5％～3％，霍霍巴籽油1％～3％，环五聚二甲基硅氧烷2％～10％，四羟丙基乙二胺0.1％～0.5％，苯氧乙醇和乙基己基甘油混合液0.2％～1％，羟乙基哌嗪乙烷磺酸1％～3％，烟酰胺 1％～3％，泛醇0.1％～1％，香精0.01％～0.1％，长白山野山参细胞水提取物4-6％，余量为水。
20.优选地，所述长白山野山参细胞水提取物的制备方法包括如下步骤：
21.a.在无菌条件下，将长白山野山参离体的植物器官、组织、细胞或原生质体经愈伤组织诱导、继代和筛选后，接种在b5或ms植物组织培养基上，在25
±
5℃的培养条件下进行培养，获得的长白山野山参细胞培养物；
22.b.取步骤a获得的长白山野山参细胞，使用纯水洗涤；
23.c.将洗净的长白山野山参细胞放入均质器，添加纯水，长白山野山参细胞的重量和水的重量比为1:1-1:10，匀浆；
24.d.使用孔径为0.22um的滤膜过滤步骤c得到的匀浆液，分装，于-5℃保存。
25.优选地，步骤b中，洗涤次数为3次，每次纯水的使用量为长白山野山参细胞重量的5倍。
26.优选地，步骤a中所述的愈伤组织诱导、继代和筛选的具体过程为：
27.1)取长白山野山参根为外植体，消毒后去除表面表皮，接种在愈伤诱导培养基上，在25
±
2℃条件下进行培养，获得野山参愈伤组织；
28.2)取步骤1)得到的野山参愈伤组织，接种在野山参细胞培养基中，在25
±
2℃条件下进行培养，30-40天转接一次；
29.3)对步骤2)获得的野山参细胞不断继代培养，以生长速度、野山参皂甙含量为指标筛选得到长势较好、野山参皂甙含量最高的野山参细胞系。
30.本发明另一方面提供一种含长白山野山参细胞水提取物的抗衰霜的制备方法，主要包括以下步骤：
31.(1)将纯水加入水相锅，开启快速搅拌，将丙烯酸(酯)类/c10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物或丙烯酰二甲基牛磺酸铵/vp共聚物、(丁二醇、甘油、黄原胶或丙烯酰二甲基牛磺酸铵/vp共聚物、透明质酸钠和聚谷氨酸钠，预先混合)缓慢加入充分搅拌使之充分分散溶胀，加入海藻糖、尿囊素、edta-2na、甘草酸二钾、甜菜碱、羟苯甲酯，补加纯水1.5％；
32.(2)加热升温(目标85℃，偏差
±
3℃)，水相锅升温到目标温度后，加入氢化卵磷脂，保温搅拌10min；
33.(3)将peg-20甲基葡糖倍半硬脂酸酯或/和聚山梨醇酯-20、甲基葡糖倍半硬脂酸酯或鲸蜡醇磷酸酯钾或聚甘油-3-甲基葡糖二硬脂酸酯、角鲨烷、霍霍巴籽油、辛酸/癸酸甘油三酯、聚二甲基硅氧烷、生育酚乙酸酯、鲸蜡硬酯醇、羟苯丙酯依次加入到油锅中，加热升温至85℃，保温10min备用；
34.(4)真空乳化锅预热到40℃，抽真空，将水相抽入乳化锅，开启快速搅拌，开启均质1800rpm均质3min，抽入油相，开启均质3000rpm，5min，保温搅拌15min，然后开始冷却降温，转入下一步操作；
35.(5)真空乳化锅降温至75℃，加入环五聚二甲基硅氧烷，开启均质3000rpm， 5min，保温搅拌10min，继续降温；
36.(6)真空乳化锅降温至50℃时，将原料(四羟丙基乙二胺、水，预先溶解)加入真空乳化锅,持续搅拌继续降温，降温至45℃，将苯氧乙醇、乙基己基甘油、香精、 (羟乙基哌嗪乙烷磺酸、水，预先溶解)、(烟酰胺、水，预先溶解)、(泛醇、水，预先溶解)、长白山野山参细胞水提取物逐个加入真空乳化锅，均质1800rpm,1min 持续搅拌并降温；降温至38℃以下出料，即得。
37.本发明相对于现有技术具有的有益效果如下：
38.1.本发明的含长白山野山参细胞水提取物的抗衰霜，可有效保障野山参细胞水提取物的活性，配合多种肌肤养护成分，能够对皮肤起到减少皱纹的作用，并且具有保湿提亮滋润的功效，无刺激作用。
39.2.本发明采用均质和超滤相结合提取野山参细胞水提取物，两者的结合保证了提取的充分性，又能够获得合适粒径的提取物，并且不需要蒸发干燥，其相比普通的提取方法，操作简单，提取效率高，活性成分得率高，节约能源，提高了工业生产效率。
具体实施方式
40.下面结合实施例对本发明进行详细的说明，但本发明的实施方式不限于此，显而易见地，下面描述中的实施例仅是本发明的部分实施例，对于本领域技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，获得其他的类似的实施例均落入本发明的保护范围。
41.实施例1野山参细胞的获得
42.1.培养基的配制
43.(1)配制野山参愈伤诱导培养基，ms基础培养基(配方见表1)中添加 0.2mg/l-0.5mg/lga(赤霉素)、20g/l-30g/l蔗糖、0.6g/l-0.8g/l琼脂。
44.(2)配制野山参细胞培养基，ms基础培养基(配方见表1)中添加0.2mg/l-0.5mg/l 6-ba(6-苄基嘌呤)、2-4mg/l naa(萘乙酸)、0.6g/l-0.8g/l琼脂及20g/l-30g/l蔗糖。
45.表1.ms基础培养基
46.[0047][0048]
2.野山参细胞的诱导
[0049]
(1)野山参愈伤组织制备：取野生野山参根为外植体，消毒后去除表面表皮，接种在愈伤诱导培养基上，在25
±
2℃条件下进行培养，获得愈伤组织；
[0050]
(2)野山参细胞的培养：取步骤(1)中的野山参愈伤组织，接种在野山参细胞培养基中，在25
±
2℃条件下进行培养，30-40天转接一次；
[0051]
(3)野山参细胞的继代和筛选：对步骤(2)中的细胞不断继代培养，筛选得到三种野山参细胞组织系：白色系、绿色系、黄色系，通过对其生长速度、野山参皂甙含量的检测，确定黄色系为长势较好，野山参皂甙含量最高的细胞系。
[0052]
3.生长速度测定
[0053]
(1)干重法测定：在同样的接种与培养条件下进行培养，在同样培养天数下，对收集获得培养物进行50℃烘干至恒重后，测定每瓶培养物的干重，
[0054]
4.含量测定
[0055]
色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相a，以水为流动相b，按表2中的洗脱程序进行梯度洗脱；检测波长为203nm。理论板数按人参皂苷rg1峰计算应不低于6000。
[0056]
表2.液相色谱洗脱参数
[0057]
时间(分钟)流动相a(％)流动相b(％)0～35198135～5519-2981-7155～70297170～10029-4071-60
[0058]
对照品溶液的制备：精密称取人参皂苷rg对照品、人参皂苷re对照品及人参皂苷rb对照品，加甲醇制成每1ml各含0.2mg的混合溶液，摇匀，即得。
[0059]
供试品溶液的制备：取培养的野山参细胞粉末(过四号筛)约1g，精密称定，置索氏提取器中，加三氯甲烷加热回流3小时，弃去三氯甲烷液，药渣挥干溶剂，连同滤纸筒移入100ml锥形瓶中，精密加水饱和正丁醇50ml，密塞，放置过夜，超声处理(功率250w，频率50khz)30分钟，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液25ml，置蒸发皿中蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
[0060]
测定过程：分别精密吸取对照品溶液10μl与供试品溶液10～20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
[0061]
5.野山参细胞的大量繁殖
[0062]
取上述步骤(3)中的含量最高的黄色细胞系，接种在野山参细胞培养基中，在25
±
2 ℃条件下进行培养，30-40天后进行收集，获得所需要的培养物。
[0063]
6.培养物有效成分含量
[0064]
参考上述含量测定方法检测大量繁殖获得的野山参细胞的人参皂甙含量，具体结果如表3所示。
[0065]
表3.大量繁殖的野山参细胞的人参皂甙含量
[0066] rs-0927-1rs-927-2rs-0928-3rs-200915rs-0916人参皂苷rg10.878％0.784％0.058％0.049％0.035％人参皂苷re0.152％0.675％0.197％0.285％0.330％人参皂苷rg20.066％0.185％0.022％0.023％0.025％人参皂苷rb10.170％0.541％1.039％1.149％1.628％人参皂苷rc0.025％0.079％0.415％0.426％0.843％人参皂苷rb20.032％0.109％0.427％0.404％0.761％人参皂苷rd0.042％0.189％0.301％0.242％0.598％总皂苷含量1.364％2.562％2.458％2.577％4.221％
[0067]
实施例2
[0068]
一种含长白山野山参细胞水提取物抗衰霜的制备方法，包括以下步骤：
[0069]
(1)将纯水加入水相锅，开启快速搅拌，将丙烯酸(酯)类/c
10-30
烷醇丙烯酸酯交联聚合物、(丁二醇、甘油、黄原胶、透明质酸钠和聚谷氨酸钠，预先混合)缓慢加入充分搅拌使之充分分散溶胀，加入海藻糖、尿囊素、edta-2na、甘草酸二钾、甜菜碱、羟苯甲酯，补加纯水1.5％；
[0070]
(2)加热升温(目标85℃，偏差
±
3℃)，水相锅升温到目标温度后，加入原料氢化卵磷脂，保温搅拌10min；同时进行油相锅操作：
[0071]
(3)peg-20甲基葡糖倍半硬脂酸酯、甲基葡糖倍半硬脂酸酯、角鲨烷、霍霍巴籽油、辛酸/癸酸甘油三酯、聚二甲基硅氧烷、生育酚乙酸酯、鲸蜡硬酯醇、羟苯甲酯依次加入到油锅中，加热升温至85℃，保温10min备用；
[0072]
(4)真空乳化锅预热到40℃，抽真空，将水相抽入乳化锅，开启快速搅拌，开启均质1800rpm均质3min，抽入油相，开启均质3000rpm，5min，保温搅拌15min，然后开始冷却降温，转入下一步操作；
[0073]
(5)真空乳化锅降温至75℃，加入环五聚二甲基硅氧烷，开启均质3000rpm，5min，保温搅拌10min，继续降温；
[0074]
(6)真空乳化锅降温至50℃时，将原料(四羟丙基乙二胺、水，预先溶解)加入真空乳化锅,持续搅拌继续降温，降温至45℃，将苯氧乙醇、乙基己基甘油、香精、 (羟乙基哌嗪乙烷磺酸、水，预先溶解)、(烟酰胺、水，预先溶解)、(泛醇、水，预先溶解)、长白山野山参细胞水提取物逐个加入真空乳化锅，均质1800rpm,1min 持续搅拌并降温；降温至38℃以下出料，即得。
[0075]
所述长白山野山参细胞水提取物的制备方法，包括以下步骤：
[0076]
a取新鲜的长白山野山参细胞，使用纯水洗涤；
[0077]
b洗净的长白山野山参细胞放入均质器，添加纯水，长白山野山参细胞的重量和水
的重量比为1:1，匀浆；
[0078]
c使用孔径为0.22um的滤膜过滤步骤b得到的匀浆液，分装，于-5℃保存。
[0079]
其中，长白山野山参细胞水提取物包括如下重量百分数的组分：人参皂苷rg1 0.0211％、人参皂苷re 0.0151％、人参皂苷rg2 0.0038％、人参皂苷rb1 0.0023％、人参皂苷rc 0.0001％、人参皂苷rb2 0.0003％、人参皂苷rd 0.0006％。
[0080]
表4：实施例2的抗衰霜的组分组成
[0081]
[0082][0083]
实施例3
[0084]
一种含长白山野山参细胞水提取物抗衰霜的制备方法，包括以下步骤：
[0085]
(1)将纯水加入水相锅，开启快速搅拌，将丙烯酰二甲基牛磺酸铵/vp共聚物、 (丁二醇、甘油、黄原胶、透明质酸钠和聚谷氨酸钠，预先混合)缓慢加入充分搅拌使之充分分散溶胀，加入海藻糖、尿囊素、edta-2na、甘草酸二钾、甜菜碱、羟苯甲酯，补加纯水1.5％；
[0086]
(2)加热升温(目标85℃，偏差
±
3℃)，水相锅升温到目标温度后，加入原料氢化卵磷脂，保温搅拌10min；同时进行油相锅操作：
[0087]
(3)聚山梨醇酯-20、鲸蜡醇磷酸酯钾、角鲨烷、霍霍巴籽油、辛酸/癸酸甘油三酯、聚二甲基硅氧烷、生育酚乙酸酯、鲸蜡硬酯醇、羟苯丙酯依次加入到油锅中，加热升温至85℃，保温10min备用；
[0088]
(4)真空乳化锅预热到40℃，抽真空，将水相抽入乳化锅，开启快速搅拌，开启均质1800rpm均质3min，抽入油相，开启均质3000rpm，5min，保温搅拌15min，然后开始冷却降温，转入下一步操作；
[0089]
(5)真空乳化锅降温至75℃，加入环五聚二甲基硅氧烷，开启均质3000rpm，5min，保温搅拌10min，继续降温；
[0090]
(6)真空乳化锅降温至50℃时，将原料(四羟丙基乙二胺、水，预先溶解)加入真空乳化锅,持续搅拌继续降温，降温至45℃，将苯氧乙醇、乙基己基甘油、香精、 (羟乙基哌嗪
乙烷磺酸、水，预先溶解)、(烟酰胺、水，预先溶解)、(泛醇、水，预先溶解)、长白山野山参细胞水提取物逐个加入真空乳化锅，均质1800rpm,1min 持续搅拌并降温；降温至38℃以下出料，即得。
[0091]
所述长白山野山参细胞水提取物的制备方法，包括以下步骤：
[0092]
a取新鲜的长白山野山参细胞，使用纯水洗涤；
[0093]
b洗净的长白山野山参细胞放入均质器，添加纯水，长白山野山参细胞的重量和水的重量比为1:1，匀浆；
[0094]
c使用孔径为0.22um的滤膜过滤步骤b得到的匀浆液，分装，于-5℃保存。
[0095]
表5：实施例3的抗衰霜的组分组成
[0096]
[0097][0098]
实施例4
[0099]
一种含长白山野山参细胞水提取物抗衰霜的制备方法，包括以下步骤：
[0100]
(1)将纯水加入水相锅，开启快速搅拌，将丙烯酸(酯)类/c
10-30
烷醇丙烯酸酯交联聚合物、(丁二醇、甘油、丙烯酰二甲基牛磺酸铵/vp共聚物、透明质酸钠和聚谷氨酸钠，预先混合)缓慢加入充分搅拌使之充分分散溶胀，加入海藻糖、尿囊素、 edta-2na、甘草酸二钾、甜菜碱、羟苯甲酯，补加纯水1.5％；
[0101]
(2)加热升温(目标85℃，偏差
±
3℃)，水相锅升温到目标温度后，加入原料氢化卵磷脂，保温搅拌10min；同时进行油相锅操作：
[0102]
(3)聚山梨醇酯-20、peg-20甲基葡糖倍半硬脂酸酯、聚甘油-3甲基葡糖二硬脂酸酯、角鲨烷、霍霍巴籽油、辛酸/癸酸甘油三酯、聚二甲基硅氧烷、生育酚乙酸酯、鲸蜡硬酯醇、羟苯甲酯依次加入到油锅中，加热升温至85℃，保温10min备用；
[0103]
(4)真空乳化锅预热到40℃，抽真空，将水相抽入乳化锅，开启快速搅拌，开启均质1800rpm均质3min，抽入油相，开启均质3000rpm，5min，保温搅拌15min，然后开始冷却降温，转入下一步操作；
[0104]
(5)真空乳化锅降温至75℃，加入环五聚二甲基硅氧烷，开启均质3000rpm，5min，保温搅拌10min，继续降温；
[0105]
(6)真空乳化锅降温至50℃时，将原料(四羟丙基乙二胺、水，预先溶解)加入真空乳化锅,持续搅拌继续降温，降温至45℃，将苯氧乙醇、乙基己基甘油、香精、 (羟乙基哌嗪乙烷磺酸、水，预先溶解)、(烟酰胺、水，预先溶解)、(泛醇、水，预先溶解)、长白山野山参细胞水提取物逐个加入真空乳化锅，均质1800rpm,1min 持续搅拌并降温；降温至38℃以下出料，即得。
[0106]
所述长白山野山参细胞水提取物的制备方法，包括以下步骤：
[0107]
a取新鲜的长白山野山参细胞，使用纯水洗涤；
[0108]
b洗净的长白山野山参细胞放入均质器，添加纯水，长白山野山参细胞的重量和水的重量比为1:1，匀浆；
[0109]
c使用孔径为0.22um的滤膜过滤步骤b得到的匀浆液，分装，于-5℃保存。
[0110]
表6：实施例4的抗衰霜的组分组成
[0111]
[0112][0113]
对比例1
[0114]
一种抗衰霜的制备方法，包括以下步骤：
[0115]
(1)将纯水加入水相锅，开启快速搅拌，将丙烯酸(酯)类/c
10-30
烷醇丙烯酸酯交联聚合物、(丁二醇、甘油、黄原胶、透明质酸钠和聚谷氨酸钠，预先混合)缓慢加入充分搅拌使之充分分散溶胀，加入海藻糖、尿囊素、edta-2na、甘草酸二钾、甜菜碱、羟苯甲酯，补加纯水1.5％；
[0116]
(2)加热升温(目标85℃，偏差
±
3℃)，水相锅升温到目标温度后，加入原料氢化卵磷脂，保温搅拌10min；同时进行油相锅操作：
[0117]
(3)peg-20甲基葡糖倍半硬脂酸酯、甲基葡糖倍半硬脂酸酯、角鲨烷、霍霍巴籽油、辛酸/癸酸甘油三酯、聚二甲基硅氧烷、生育酚乙酸酯、鲸蜡硬酯醇、羟苯甲酯依次加入到油锅中，加热升温至85℃，保温10min备用；
[0118]
(4)真空乳化锅预热到40℃，抽真空，将水相抽入乳化锅，开启快速搅拌，开启均质1800rpm均质3min，抽入油相，开启均质3000rpm，5min，保温搅拌15min，然后开始冷却降温，转入下一步操作；
[0119]
(5)真空乳化锅降温至75℃，加入环五聚二甲基硅氧烷，开启均质3000rpm，5min，保温搅拌10min，继续降温；
[0120]
(6)真空乳化锅降温至50℃时，将原料(四羟丙基乙二胺、水，预先溶解)加入真空乳化锅,持续搅拌继续降温，降温至45℃，将苯氧乙醇、乙基己基甘油、香精、 (羟乙基哌嗪乙烷磺酸、水，预先溶解)、(烟酰胺、水，预先溶解)、(泛醇、水，预先溶解)、余量水逐个加入真空乳化锅，均质1800rpm,1min持续搅拌并降温；降温至38℃以下出料，即得。
[0121]
表7：对比例1的抗衰霜的组分组成
[0122][0123]
实施例5
[0124]
抗衰霜效果评价
[0125]
试验方法：在同一地区，同一时间筛选200例皮肤出现老化的女性志愿者，年龄 35-50岁，平均年龄43岁。
[0126]
入选标准：眼部周围都有轻度或中度的皱纹、皮肤干燥，弹性降低，出现皱纹，色素沉着、肤色灰暗等皮肤老化现象；并随机分为4组，每组50人，4组志愿者分别对应使用实施例2-4和对比例1中的抗衰霜，且每组志愿者均使用对应试验产品作为唯一眼部护理产品，在早、晚进行脸部清洁后，涂抹于眼部周围并进行轻轻按压至吸收，测试时间为90天，参加试验的志愿者每天反馈眼部皮肤变化情况和使用感受，进行记录情况、汇总数据，并对受试者进行效果评价。
[0127]
皮肤老化评估：通过观察受试者的受试区来评价(鱼尾纹、眉间纹、前额皱纹)。
[0128]
评判标准：
[0129]
没有皱纹
[0130]
轻度：2-3条皱纹，长度＜1cm
[0131]
中度：3-6条皱纹，长度＜2cm
[0132]
重度：有数条皱纹长度3cm以上，同时伴有浅皱纹
[0133]
表8：试验结束后各组受试者的皮肤老化情况统计
[0134]
组别没有皱纹(例)轻度(例)中度(例)重度(例)实施例244510实施例340730实施例441450对比例1192056
[0135]
经过上述试验可知，本发明实施例2～4所制备的抗衰霜不仅能够缓解和预防皱纹的产生，还具有较好的保湿作用，从而达到抗衰老的目的。
[0136]
最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。