1.本发明涉及一种布比卡因氮氧化物杂质的单晶制备方法及其表征。
背景技术：
2.布比卡因是一种酰胺类长效局麻药，主要通过抑制神经细胞膜的钠离子通道，阻断神经兴奋与传导。适用于局部浸润麻醉、骶管阻滞、外周神经阻滞、硬脊膜外阻滞和蛛网膜下隙阻滞。临床上常用其盐酸盐，为白色结晶性粉末，易溶于乙醇，在水中溶解。布比卡因盐酸盐及其制剂被多个国家的药典收录，而布比卡因未见收录。
3.研究人员在对布比卡因原料药进行稳定性研究时，发现布比卡因在放置过程中，会发生降解，产生两个分子量相同的杂质，质谱高分辨结果显示这两个杂质具有相同的元素组成，均是氧化降解的产物。二级质谱分析，两个杂质的碎片离子基本相同，不能根据质谱确定结构。目前尚未有关于上述杂质的文献报道，需要开展布比卡因原料药相关杂质的研究。
技术实现要素：
4.本发明需要解决的问题是，克服本领域目前对布比卡因氮氧化物杂质结构表征研究少的缺陷，提供了一种新的布比卡因氮氧化物杂质的立体结构，提供了一种布比卡因氮氧化物杂质的单晶制备方法并对该杂质的结构进行表征。
5.在本发明的第一方面，提供了一种布比卡因的杂质的单晶的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
6.(s1)将布比卡因的杂质溶于易溶溶剂获得溶液；
7.任选地(s2)将难溶溶剂加入至步骤s1获得的溶液达到或接近饱和；和
8.(s3)静置，使溶剂自然挥发，直至得到所述布比卡因的杂质的单晶，
9.其中，所述易溶溶剂为乙醚、二氯甲烷、三氯甲烷、四氢呋喃、1,2-二氯乙烷或两种以上的混合溶剂；所述难溶溶剂为石油醚、正己烷、环己烷、甲基叔丁基醚或两种以上的混合溶剂。
10.在另一优选例中，所述易溶溶剂为乙醚、二氯甲烷、四氢呋喃或两种以上的混合溶剂。
11.在另一优选例中，所述易溶溶剂为乙醚。
12.在另一优选例中，所述布比卡因的杂质与所述易溶溶剂的质量体积比为8-15g/l，例如10g/l、12g/l。
13.在另一优选例中，所述难溶溶剂为石油醚、正己烷、环己烷或两种以上的混合溶剂。
14.在另一优选例中，所述易溶溶剂与所述难溶溶剂的体积比为1:1-1:4，例如1:1、1:2、1:4。
15.在另一优选例中，所述制备方法在25
±
10℃下进行。
16.在另一优选例中，所述布比卡因的杂质通过制备液相方法进行分离制备。
17.在本发明第二方面，提供了一种布比卡因的杂质的单晶，所述单晶由本发明第一方面所述的制备方法制备获得。
18.在本发明第三方面，提供了如本发明第二方面所述布比卡因的杂质的单晶的用途，用作布比卡因原料药及其复方制剂质量研究的杂质标准品。
19.应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。
附图说明
20.图1示出布比卡因氮氧化物杂质的液相色谱图。
21.图2示出布比卡因氮氧化物杂质2的结构图。
具体实施方式
22.本发明人经过广泛而深入的研究，由于质谱、核磁等无法确定杂质的绝对结构，首次开发了一种布比卡因杂质的单晶制备方法，获得单一晶型，确定了该布比卡因杂质的三维结构。本发明公开的布比卡因氮氧化物杂质的单晶制备方法，为布比卡因氮氧化物杂质的结构表征提供依据，为布比卡因原料药的质量研究提供杂质标准品。在此基础上，完成了本发明。
23.术语
24.如本文所用，术语“任选地”是指可加，可不加。
25.下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则百分比和份数是重量百分比和重量份数。
26.实施例1.布比卡因氮氧化物杂质2单晶制备与结构表征
27.1.1杂质2的制备
28.布比卡因在放置过程中，会发生降解，产生两个分子量相同的杂质，液相色谱图如图1所示。
29.采用制备液相方法对杂质2进行分离制备，获得杂质2纯品。
30.杂质2的核磁共振数据及归属如下：1hnmr(500mhz,cd3od)δppm 1.001(t，j＝7.5hz，3h)1.383(m，2h)1.723(m，3h)1.894(m，1h)2.016(m，2h)2.209(s，6h)2.240(m，1h)2.690(m，1h)3.098(brd，j＝12hz，1h)3.231(m，1h)3.534(m，1h)4.132(brt，j＝4.5hz，1h)4.252(m，1h)7.110(m，3h)；
31.13
cnmr(500mhz,cd3od)δppm 14.70(ch3)18.98(ch3)19.78(ch2)21.56(ch2)22.08(ch2)25.42(ch2)27.06(ch2)64.59(ch2)69.05(ch2)74.19(ch)129.30(ch)129.84(ch)134.98(c)137.10(c)169.33(-c＝o)。
32.1.2单晶制备方法
33.取1mg的布比卡因氮氧化物杂质2，加入约0.1ml易溶溶剂溶解，封口，或者加入适
量难溶溶剂使样品溶液达到或接近饱和，封口，在室温下静置，使溶剂自然挥发，直至得到能够上机检测的晶型。其中，易溶溶剂为乙醚、二氯甲烷、四氢呋喃及其混合溶剂的一种；难溶溶剂为石油醚、正己烷、环己烷及其混合溶剂的一种。
34.1.3单晶制备结果列表
35.氮氧化物杂质2单晶制备条件与结果
36.溶剂体积比例结果二氯甲烷1无晶体产生乙醚1颗粒状晶体，上机检测二氯甲烷：石油醚1:1，1:2块状晶体，质量差二氯甲烷：正己烷1:2，1:4块状晶体四氢呋喃：环己烷1:1块状晶体
37.1.4单晶衍射结果
[0038][0039]
晶体数据
[0040][0041]
原子份数坐标和各向同性或等效各向同性位移参数
[0042]
[0043]
[0044]
[0045]
[0046][0047]
[0048]
原子位移参数原子位移参数
[0049]
[0050]
[0051]
[0052][0053]
几何参数几何参数
[0054]
[0055]
[0056][0057]
基于上述分析数据，确认布比卡因氮氧化物杂质2的结构如图2所示。
[0058]
本发明公开的布比卡因氮氧化物杂质的单晶制备方法，为布比卡因氮氧化物杂质的结构表征提供依据，能够为布比卡因原料药的质量研究提供杂质标准品。
[0059]
在本发明提及的所有文献都在本技术中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本技术所附权利要求书所限定的范围。