一种c
14
位氨基取代粉防己碱衍生物及其制备和应用
技术领域
1.本发明属于药物化学技术领域，涉及天然药物粉防己碱的衍生物，特别是涉及c
14
位取代粉防己碱衍生物，以及该衍生物的制备方法和应用。
背景技术：
2.粉防己，为防已科千金藤属植物粉防己(stephania tetrandra s. moore)的干燥根，在药典中被广泛引用治疗结核病、痢疾、哮喘、高血糖等疾病。
3.粉防己碱(tetrandrine，简称tet)又称汉防己甲素，是粉防己的主要活性成分，属异喹啉类化合物，分子式c
38h42
n2o6，化学式(6,6',7,12-四甲氧基-2,2'二甲基小檗胺)，分子量622.73g/mol，具体结构如下所示：。
4.从化学性质来看，粉防己碱中有两个叔胺氮原子，碱性较强；且含有多个烷氧基，脂溶性较高[comprehensive profiling of stephania tetrandra (fangji) by stepwise dfi and nl-dependent structure annotation algorithm-based uhplc-q-tof-ms and direct authentication by lmj-hrms[j]. journal of pharmaceutical and biomedical analysis, 2020, 185(5): 136-153.]。作为临床用药，粉防己碱主要用于治疗矽肺病、自身免疫性疾病、炎症性肺部疾病、心血管疾病和高血压疾病等。
[0005]
近年来越来越多的研究发现，粉防己碱在癌症治疗中具有药理作用的潜力。许多研究表明，粉防己碱及其衍生物对肝癌、前列腺癌、乳腺癌、结肠癌[tetrandrine induces mitochondria-mediated apoptosis in human gastric cancer bgc-823 cells[j]. plos one, 2013, 8(10): 1-10.]、膀胱癌、白血病等具有不同的生物活性，其作用机制主要分为直接的细胞毒性、诱导细胞凋亡、阻滞细胞周期、抑制肿瘤细胞迁移和侵袭、抗多重耐药作用等[tetrandrine, a chinese plant-derived alkaloid, is a potentialcandidate for cancer chemotherapy [j]. oncotarget, 2016, 7: 40800-40815.]。
[0006]
关于粉防己碱的化学修饰，基本上为母体结构中功能基团的转化，如结构中的甲氧基酰化、去甲基化，n取代基的氧化还原，母体结构的降解等[bisbenzylisoquinoline alkaloids from thalictrum cultratum. the structures of thalrugosinone and thalpindione[j]. j. nat. prod, 1985, 48(9): 962-963.]。粉防己碱的结构修饰可以概括总结为以下几条主要路线：在c5或c
14
位置引入卤素，通过钯催化的偶联反应构建c-c或
c-n键；在c5位置引入硝基，还原为氨基，酰化或磺酰化；在异喹啉叔胺氮上烷基化制备季铵盐。
[0007]
但目前对粉防己碱修饰所得的衍生物数量较少，衍生化方法探究以及构效关系不明确是当前存在的主要问题。
技术实现要素：
[0008]
本发明的目的是通过对粉防己碱类化合物构效关系的研究和筛选，合成出一种具有抗肿瘤作用的c
14
位氨基取代粉防己碱衍生物，并通过实验证明，其对肿瘤细胞具有明显的抑制活性作用。
[0009]
本发明首先提供了一种下述通式（i）所示结构的c
14
位氨基取代粉防己碱衍生物，包括其药学上可接受的加成物、复合物、盐、分解产物或代谢产物的形式。
[0010]
本发明上述提供的c
14
位氨基取代粉防己碱衍生物，是在粉防己碱的c
14
位置上连接了一个-nh-r官能基团。
[0011]
其中的基团r选自氢、、、、或。
[0012]
上述基团r中，更具体地，r1代表连接在苯环上的一个或一个以上的取代基，选自氢、卤原子、c
1-4
烷基、c
1-4
酰基、c
1-4
烷氧基、c
1-4
烷硫基、任选卤代的c
1-4
烷氧基、苯基或咔唑基；r2代表h、c
1-4
烷基或c
1-4
烷氧基；x代表卤原子；a代表o或s。
[0013]
本发明的c
14
位氨基取代粉防己碱衍生物中，优选地，所述基团r选自氢、、或。
[0014]
其中：r1代表连接在苯环上的一个或一个以上的取代基，选自氢、卤原子、c
1-4
烷基、c
1-4
酰基、c
1-4
烷氧基、c
1-4
烷硫基、任选卤代的c
1-4
烷氧基、苯基或咔唑基；x代表卤原子。
[0015]
本发明的c
14
位氨基取代粉防己碱衍生物中，更优选地，所述基团r选自、或。
[0016]
其中：r1代表连接在苯环上的一个或一个以上的取代基，选自c
1-4
烷基、c
1-4
酰基、c
1-4
烷氧基、c
1-4
烷硫基或苯基；x代表卤原子。
[0017]
本发明的c
14
位氨基取代粉防己碱衍生物可以选自以下具体化合物。
[0018]
14-胺基粉防己碱，英文名称14-amino-tetrandrine，分子式c
38h44
n3o6，分子量638.32。
[0019]
14-(4-氟苯胺基)-粉防己碱，英文名称14-n-(4-fluorophenyl)-amino-tetrandrine，分子式c
44h46
fn3o6，分子量731.35。
[0020]
14-(3-溴苯胺基)-粉防己碱，英文名称14-n-(3-bromophenyl)-amino-tetrandrine，分子式c
44h46
brn3o6，分子量793.26。
[0021]
14-(4-溴苯胺基)-粉防己碱，英文名称14-n-(4-bromophenyl)-amino-tetrandrine，分子式c
44h46
brn3o6，分子量793.27。
[0022]
14-(4-碘苯胺基)-粉防己碱，英文名称14-n-(4-iodophenyl)-amino-tetrandrine，分子式c
44h46
in3o6，分子量839.25。
[0023]
14-(4-异丁基苯胺基)-粉防己碱，英文名称14-n-(4-isobutylphenyl)-amino-tetrandrine，分子式c
48h55
n3o6，分子量769.42。
[0024]
14-(4-叔丁基苯胺基)-粉防己碱，英文名称14-n-(4-(tert-butyl)phenyl)-amino-tetrandrine，分子式c
48h55
n3o6，分子量769.42。
[0025]
14-(3-乙酰基苯胺基)-粉防己碱，英文名称14-n-(3-acetylphenyl)-amino-tetrandrine，分子式c
46h49
n3o7，分子量755.37。
[0026]
14-(3,5-二甲氧基苯胺基)-粉防己碱，英文名称14-n-( 3,5-dimethoxyphenyl)-amino-tetrandrine，分子式c
46h51
n3o8，分子量773.38。
[0027]
14-(3,4,5-三甲氧基苯胺基)-粉防己碱，英文名称14-n-(3,4,5-trimethoxyphenyl)-amino-tetrandrine，分子式c
47h53
n3o9，分子量803.39。
[0028]
14-(3-甲硫基苯胺基)-粉防己碱，英文名称14-n-(3-(methylthio)phenyl)-amino-tetrandrine，分子式c
45h49
n3o6s，分子量759.34。
[0029]
14-(4-三氟甲氧基苯胺基)-粉防己碱，英文名称14-n-(4-(trifluoromethoxy)phenyl)-amino-tetrandrine，分子式c
45h45
f3n2o7，分子量797.34。
[0030]
14-(4-联苯胺基)-粉防己碱，英文名称14-n-([1,1'-biphenyl]-4-yl)-amino-tetrandrine，分子式c
50h51
n3o6，分子量789.39。
[0031]
14-(9h-咔唑-9-苯胺基)-粉防己碱，英文名称14-n-(9h-carbazol-9-phenyl)-amine-tetrandrine，分子式c
56h54
n4o6，分子量878.41。
[0032]
14-(2-萘胺基)-粉防己碱，英文名称14-n-(naphthyl)-amino-tetrandrine，分子式c
48h49
n3o6，分子量763.37。
[0033]
14-(6-甲氧基-2-萘胺基)-粉防己碱，英文名称n-(6-methoxy-2-naphthalene)-amino-tetrandrine，分子式c
49h51
n3o7，分子量793.38。
[0034]
14-(2-氯-5-吡啶胺基)-粉防己碱，英文名称14-n-(2-chloro-5-pyridine)-amino-tetrandrine，分子式c
43h45
cln4o6，分子量748.32。
[0035]
14-(3-溴-5-吡啶胺基)-粉防己碱，英文名称14-n-(3-bromo-5-pyridine)-amino-tetrandrine，分子式c
43h45
brn4o6，分子量794.26。
[0036]
14-(2-甲氧基-5-嘧啶胺基)-粉防己碱，英文名称14-n-(2-methoxypyrimidin-5-yl)-amino-tetrandrine，分子式c
43h47
n5o7，分子量745.36。
[0037]
14-(3-二苯并呋喃胺基)-粉防己碱，英文名称14-n-(dibenzo[b,d]furan-3-yl)-amino-tetrandrine，分子式c
50h49
n3o7，分子量803.39。
[0038]
14-(4-二苯并噻吩胺基)-粉防己碱，英文名称n-(4-dibenzothiophene)-amino-tetrandrine，分子式c
50h49
n3o6，分子量819.34。
[0039]
进一步地，本发明提供的c
14
位氨基取代粉防己碱衍生物还包括了这些化合物可能存在的立体异构体和光学异构体。
[0040]
本发明提供的c
14
位氨基取代粉防己碱衍生物作为粉防己碱类化合物中的一类，可以通过适当的方法被制备得到。
[0041]
本发明对所述制备方法并没有特别的限定，任何一种可以在粉防己碱的c
14
位连接上本发明所述取代胺基的方法，都可以作为本发明c
14
位氨基取代粉防己碱衍生物的制备方法。
[0042]
一种可行的制备本发明所述c
14
位氨基取代粉防己碱衍生物的方法是，将粉防己碱硝化得到14-硝基粉防己碱、转化为14-胺基粉防己碱，再以14-胺基粉防己碱与含r基的硼酸化合物反应，转化为所述结构的c
14
位氨基取代粉防己碱衍生物。
[0043]
更具体地，是先以浓硝酸为硝化体系对粉防己碱进行硝化得到14-硝基粉防己碱，再在水合肼和钯碳作用下转化为14-胺基粉防己碱，最后在醋酸铜和碱的作用下，14-胺基粉防己碱与含r基的硼酸化合物反应，转化为通式（i）所示结构的c
14
位取代粉防己碱衍生物目标产物。
[0044]
本发明还提供了所述c
14
位氨基取代粉防己碱衍生物在制备抗肿瘤药物中的应用，以及含有c
14
位氨基取代粉防己碱衍生物作为有效成分的抗肿瘤药物。
[0045]
本发明所述的肿瘤可以包括但不限于是白血病、多发性骨髓瘤、淋巴瘤、肝癌、胃癌、乳腺癌、胆管细胞癌、胰腺癌、肺癌、结肠癌、骨肉瘤、黑色素瘤、人宫颈癌、神经胶质瘤、鼻咽癌、喉癌、膀胱癌或前列腺癌等。
[0046]
其中，所述的肿瘤特别是指肝癌或肺癌。
[0047]
细胞实验结果显示，本发明的c
14
位氨基取代粉防己碱衍生物能有效诱导肝癌
hepg2细胞死亡，与粉防己碱比较具有明显的抗肿瘤细胞株生物活性。
具体实施方式
[0048]
下面结合实施例对本发明的具体实施方式作进一步描述。以下实施例仅用于更加清楚地说明本发明的技术方案，而不是限制本发明的保护范围。本领域普通技术人员在不脱离本发明原理和宗旨的情况下，针对这些实施例进行的各种变化、修改、替换和变型，均应包含在本发明的保护范围之内。
[0049]
在本发明的优选实施例中，c
14
位氨基取代粉防己碱衍生物可以按照以下工艺路线实现，区别仅在于粉防己碱c
14
位连接胺基的取代r基团不同。
[0050]
本发明是采用已知的文献方法制备粉防己碱衍生物，并以tlc法对反应过程进行控制，用hplc法对衍生物进行纯度分析。
[0051]
具体地，先由粉防己碱与硝酸醋酐在tlc监控下，-10～0℃反应一段时间，生成产物14-硝基粉防己碱。该产物溶于甲醇，再与钯碳、水合肼在70～80℃下反应一段时间，生成产物14-胺基粉防己碱。最后，将14-胺基粉防己碱与吡啶、醋酸铜和含r基的硼酸化合物在室温下搅拌chan-lam-evans偶联反应12～18h后，获得c
14
位氨基取代粉防己碱衍生物。
[0052]
其中，用于制备反应的主要原料粉防己碱是由天然产物提取分离得到，也可以在市场上购买获得。
[0053]
其他制备反应的原料例如有机酸、有机酸酐或芳基硼酸，以及反应中一般都需要使用的催化剂等试剂，全部可以在市场上购买获得。
[0054]
其中chan-lam-evans偶联反应需要在溶剂中进行。溶剂的选择取决于原料的极性和溶解性。使用的溶剂包括但不限于是二氯甲烷(dcm)、四氢呋喃(thf)、n,n-二甲基甲酰胺(dmf)、二甲亚砜(dmso)等各种有机极性溶剂。
[0055]
常规的化学转换可用于实施本发明。本领域的技术人员可以决定用于这些化学转换的适当的化学试剂、溶剂、保护基和反应条件。
[0056]
实施例1：制备14-硝基粉防己碱。
[0057]
将粉防己碱溶于hno3与(ch3co)2o的混合溶液中，低温搅拌反应一定时间，以tlc监测反应结束后，用冷的氨水溶液淬灭反应原液，ch2cl2萃取，将萃取液以无水硫酸钠干燥后过滤，减压蒸馏除去溶剂，蒸干得到14-硝基粉防己碱。
[0058]
产物为黄色固体，产率96%，mp: 176-177℃。
[0059]1h nmr (cdcl3, 400 mhz) δ (ppm): 7.42 (1h, s), 7.37 (1h, dd, j = 4.0, 8.0 hz), 7.12 (1h, dd, j = 4.0, 8.0 hz), 6.77 (1h, dd, j = 4.0, 8.0 hz), 6.54 (1h, s), 6.52 (1h, s), 6.30 (1h, s), 6.28 (1h, dd, j = 4.0, 8.0 hz), 5.98 (1h, s), 3.98 (3h, s), 3.91 (1h, dd, j = 4.0, 12.0 hz), 3.75 (3h, s), 3.69-3.63 (1h, m), 3.52-3.49 (2h, m), 3.38 (3h, s), 3.30-3.25 (1h, m), 3.18 (3h, s), 2.96-2.73 (7h, m), 2.63 (3h, s), 2.53 (1h, d, j = 12.0 hz), 2.35 (1h, m), 2.21 (3h, s)。
[0060]
13
c nmr (cdcl3, 100 mhz) δ (ppm): 152.3, 152.1, 151.5, 148.7, 148.2, 146.5, 144.2, 143.5, 137.5, 136.4, 133.1, 130.5, 130.4, 128.9, 128.1, 127.6, 121.6, 121.4, 121.3, 119.9, 117.2, 112.5, 108.2, 105.8, 63.6, 61.7, 60.3, 56.3, 55.8, 55.7, 45.3, 43.2, 42.8, 41.5, 37.9, 36.8, 25.3, 21.6。
[0061]
hrms (esi-tof): calcd. for c
38h42
n3o8，[m+h]
+
: 668.2986，精确分子量(c
38h41
n3o8) m/z: 667.2986。
[0062]
实施例2：14-胺基粉防己碱的制备。
[0063]
取适量14-硝基粉防己碱，与钯碳催化剂一起加入水合肼与无水甲醇的混合液中，在80℃下搅拌反应一段时间。将反应混合物冷却至室温，过滤除去钯碳催化剂，滤液以旋转蒸发仪进行蒸发浓缩。
[0064]
浓缩物加水清洗，以ch2cl2多次萃取，萃取液以无水硫酸钠干燥后过滤，减压蒸馏除去溶剂，以ch2cl2/meoh(50/1，v/v)溶液为洗脱剂，柱色谱纯化得到14-胺基粉防己碱。
[0065]
产物为白色固体，产率87%，mp: 164-166℃。
[0066]1h nmr (cdcl3, 400 mhz) δ(ppm): 7.28 (1h, dd, j = 4.0, 8.0 hz), 7.18 (1h, dd, j = 4.0, 8.0 hz), 6.60 (1h, dd, j = 4.0, 8.0 hz), 6.50 (1h, s), 6.46 (1h, s), 6.31 (1h, s), 6.29 (1h, s), 6.12 (1h, dd, j = 4.0, 8.0 hz), 5.87 (1h, s), 3.94 (1h, d, j = 12.0 hz), 3.87 (3h, s), 3.80 (1h, dd, j = 4.0, 12.0 hz), 3.73 (3h, s), 3.64 (1h, m), 3.42 (1h, m), 3.35 (3h, s), 3.22 (1h, dd, j = 4.0, 8.0 hz), 3.11 (3h, s), 2.88 (7h, m), 2.61 (3h, s), 2.42 (3h, s), 2.35 (2h, m)。
[0067]
13
c nmr (cdcl3, 100 mhz) δ (ppm): 156.6, 151.6, 149.4, 148.7, 148.5, 144.2, 142.0, 140.8, 138.0, 133.2, 132.6, 129.3, 128.0, 127.6, 127.4, 122.6, 122.1, 121.3, 120.9, 120.5, 120.2, 112.3, 105.8, 100.6, 64.2, 61.5, 59.9, 56.1, 55.6, 55.5, 44.9, 43.2, 42.3, 40.8, 40.0, 38.7, 24.6, 20.6。
[0068]
hrms (esi-tof): calcd. for c
38h44
n3o6，[m+h]
+
: 638.3243，精确分子量(c
38h43
n3o6) m/z: 637.3243。
[0069]
实施例3：14-(4-氟苯胺基)-粉防己碱的制备。
[0070]
取适量14-胺基粉防己碱，加入吡啶、醋酸铜和4-氟苯硼酸，室温下搅拌反应一定
14.1。
[0170]
hrms (esi-tof): calcd. for c
43h45
brn4o6，[m+h]
+
: 795.2601，精确分子量(c
43h44
brn4o6) m/z: 794.2601。
[0171]
实施例20：14-(2-甲氧基-5-嘧啶胺基)-粉防己碱的制备。
[0172]
取适量14-胺基粉防己碱，加入吡啶、醋酸铜和2-甲氧基-5-嘧啶硼酸，室温下搅拌反应一定时间，无水硫酸钠干燥，蒸干，得14-(2-甲氧基-5-嘧啶胺基)-粉防己碱。
[0173]
产物为黄褐色固体，产率87.5%，mp:89.7-90.3℃。
[0174]1h nmr (400 mhz, cdcl3) δ: 8.29 (s, 1h), 7.37-7.15 (m, 3h), 6.76 (s, 1h), 6.62 (d, j = 14.4 hz, 2h), 6.50 (s, 1h), 6.33 (d, j = 15.6 hz, 1h), 6.15 (d, j = 7.9 hz, 1h), 5.91 (s, 1h), 4.08 (s, 1h), 3.99 (s, 3h), 3.93 (s, 2h), 3.85 (s, 3h), 3.75 (s, 3h), 3.65-3.45 (m, 3h), 3.39 (d, j = 13.9 hz, 3h), 3.26 (s, 1h), 3.13 (s, 3h), 2.97 (d, j = 9.5 hz, 5h), 2.86-2.70 (m, 2h), 2.64 (s, 3h), 2.53 (s, 3h), 2.43 (d, j = 16.0 hz, 2h)。
[0175]
13
c nmr (101 mhz, cdcl3) δ: 159.8, 157.0, 156.4, 152.0, 149.2, 149.0, 148.8, 148.2, 147.9, 144.4, 143.3, 138.2, 137.3, 134.7, 134.4, 133.1, 132.9, 130.0, 129.8, 127.6, 127.2, 124.7, 122.2, 121.5, 121.3, 121.0, 120.6, 112.3, 105.9, 100.8, 64.1, 61.7, 60.1, 56.4, 55.7, 55.6, 54.8, 44.6, 43.1, 41.8, 40.8, 39.8, 38.7, 31.9, 29.7, 29.4, 27.2。
[0176]
hrms (esi-tof): calcd. for c
43h47
n5o7，[m+h]
+
: 746.3560，精确分子量(c
43h46
n5o7) m/z: 745.3560。
[0177]
实施例21：14-(3-二苯并呋喃胺基)-粉防己碱的制备。
[0178]
取适量14-胺基粉防己碱，加入吡啶、醋酸铜和4-二苯并呋喃硼酸，室温下搅拌反应一定时间，无水硫酸钠干燥，蒸干，得14-(3-二苯并呋喃胺基)-粉防己碱。
[0179]
产物为黄褐色固体，产率87.8%，mp:147.7-148.0℃。
[0180]1h nmr (400 mhz, cdcl3) δ: 7.33 (d, j = 7.1 hz, 1h), 7.26 (s, 1h), 7.22 (d, j = 6.8 hz, 1h), 7.05 (d, j = 8.1 hz, 2h), 6.99 (s, 1h), 6.85 (t, j = 7.8 hz, 2h), 6.67 (d, j = 8.0 hz, 1h), 6.59 (s, 1h), 6.50 (s, 1h), 6.30 (s, 1h), 6.17 (d, j = 7.5 hz, 1h), 5.93 (s, 1h), 3.97-3.92 (m, 1h), 3.88 (s, 3h), 3.74 (s, 3h), 3.68-3.44 (m, 4h), 3.37 (s, 3h), 3.32 (d, j = 9.0 hz, 2h), 3.13 (s, 3h), 3.09-3.05 (m, 1h), 3.02 (d, j = 8.6 hz, 2h), 2.99-2.86 (m, 3h), 2.86-2.70 (m, 3h), 2.64 (s, 3h), 2.53 (s, 3h), 2.49-2.31 (m, 3h)。
[0181]
13
c nmr (101 mhz, cdcl3) δ: 155.9, 151.9, 149.2, 148.9, 148.3, 147.3, 144.3, 144.1, 140.8, 138.6, 138.1, 136.0, 133.4, 132.9, 130.6, 130.3, 129.9, 129.8, 128.9, 127.7, 127.3, 126.7, 126.6, 126.3, 123.3, 123.0, 121.6, 121.4, 121.2, 121.2, 121.0, 120.9, 120.8, 118.7, 117.7, 117.6, 113.5, 112.3, 105.9, 104.3, 64.2, 61.8, 60.1, 56.4, 55.7, 55.6, 43.1, 42.1, 40.9, 39.5, 38.7, 31.9, 29.7, 29.4。
[0182]
hrms (esi-tof): calcd. for c
50h49
n3o7，[m+h]
+
: 804.3870，精确分子量(c
50h48
n3o7) m/z: 803.3870。
[0183]
实施例22：14-(4-二苯并噻吩胺基)-粉防己碱的制备。
[0184]
取适量14-胺基粉防己碱，加入吡啶、醋酸铜和4-二苯并噻吩硼酸，室温下搅拌反应一定时间，无水硫酸钠干燥，蒸干，得14-(4-二苯并噻吩胺基)-粉防己碱。
[0185]
产物为黄褐色固体，产率79.0%，mp:101.8-102.6℃。
[0186]1h nmr (400 mhz, cdcl3) δ: 8.14 (d, j = 7.7 hz, 2h), 7.41 (dd, j = 4.5, 1.3 hz, 4h), 7.36 (s, 1h), 7.34 (s, 1h), 7.32 (d, j = 1.8 hz, 1h), 7.29-7.20 (m, 3h), 7.17-7.06 (m, 3h), 6.70 (dd, j = 8.4, 2.5 hz, 1h), 6.65 (s, 1h), 6.50 (s, 1h), 6.32 (s, 1h), 6.18 (dd, j = 8.4, 2.0 hz, 1h), 5.95 (s, 1h), 4.02 (d, j = 9.4 hz, 1h), 3.93 (s, 3h), 3.86 (s, 1h), 3.75 (s, 3h), 3.68 (d, j = 5.0 hz, 1h), 3.50 (d, j = 6.2 hz, 1h), 3.39 (s, 3h), 3.31 (d, j = 7.6 hz, 1h), 3.14 (s, 3h), 3.11 (s, 1h), 2.93 (d, j = 6.4 hz, 3h), 2.83-2.71 (m, 2h), 2.63 (s, 3h), 2.58 (s, 3h), 2.46 (d, j = 5.3 hz, 2h)。
[0187]
13
c nmr (101 mhz, cdcl3) δ: 155.2, 150.8, 148.3, 148.0, 147.5, 143.5, 142.9, 139.9, 137.9, 137.0, 136.1, 136.0, 135.6, 132.1, 131.8, 128.7, 127.0, 126.7, 126.4, 125.5, 125.3, 125.1, 124.6, 123.3, 121.8, 121.1, 120.9, 120.4, 120.3, 120.1, 119.8, 111.6, 111.5, 111.3, 104.9, 104.0, 63.2, 61.2, 59.1, 55.3, 54.7, 54.6, 43.7, 42.4, 40.9, 40.1, 39.0, 37.8, 30.9, 28.7。
[0188]
hrms (esi-tof): calcd. for c
50h49
sn3o6，[m+h]
+
: 820.3435，精确分子量(c
50h48
sn3o6) m/z: 819.3435。
[0189]
应用例：c
14
位氨基取代粉防己碱衍生物抗肿瘤细胞活性测定。
[0190]
实验材料：人hepg2肝癌细胞株，人a549肺癌细胞株，均由中国科学院上海药物研究所提供。
[0191]
对照药：粉防己碱标准品，购自南京道斯夫生物科技有限公司；阿霉素。
[0192]
取处于对数生长期，生长状态良好的人源肝癌hepg2细胞，以5
×
106个/孔接入96孔板中，培养液为含10%胎牛血清的1640细胞培养液，第二天加入不同浓度的c
14
位氨基取代粉防己碱衍生物，混匀后，置于含5% co2的细胞培养箱，37℃培养48h，以mtt法测定活细胞浓度。
[0193]
取处于对数生长期，生长状态良好的人源肺癌a549细胞，以5
×
106个/孔接入96孔板中，培养液为含10%胎牛血清的1640细胞培养液，第二天加入不同浓度的c
14
位氨基取代粉防己碱衍生物，混匀后，置于含5% co2的细胞培养箱，37℃培养48h，用mtt法测定活细胞浓度。
[0194]
将空白组(不加化合物处理)的细胞活力设为100%，计算出不同化合物作用后的细胞活力(%)和48h肿瘤细胞半数生长抑制浓度(48h的ic
50
值)。
[0195]
表1给出了细胞活性测定的具体实验结果。
[0196]
表1中各实施例化合物的r基团如以下表2所示。
[0197]
表1结果显示，本发明制备的c
14
位氨基取代粉防己碱衍生物能有效诱导人肝癌hepg2细胞和肺癌a549细胞死亡，与对照药物阿霉素和粉防己碱比较，具有更高的抗肿瘤细胞生物活性。
[0198]
本发明以上实施例并没有详尽叙述所有的细节，也不限制本发明仅为以上所述实施例。本领域普通技术人员在不脱离本发明原理和宗旨的情况下，针对这些实施例进行的各种变化、修改、替换和变型，均应包含在本发明的保护范围之内。